감마선 처리에 의해 유도된 심비디움 돌연변이체의 돌연변이 발생빈도 및 안정성, 기작, 유도효율 증진 연구

학위논문(박사)--서울대학교 대학원 :농업생명과학대학 식물생산과학부(원예과학전공),2020. 2. 강병철.Mutation breeding techniques using physical mutagens (e.g., γ-rays, X-rays, and ion beams) have been widely used to develop mutant cultivars in diverse plant species. In 226 plant species, 3,308 mutants developed with physical mutagens have been registered in the Mutant Variety Database of the joint Food and Agriculture Organization of the United Nations/International Atomic Energy Agency. Especially, this technique is a useful method to improve one or two characteristics of elite cultivars. In seed propagated crops, the broad studies on mutation induction, optimal radiation dose, mutation efficiency, and so on have been conducted. However, in the vegetatively propagated plant species except chrysanthemum the studies have been performed restrictively and especially on Cymbidium. In this study, I focused on the analysis of optimal γ-irradiation condition, mutation frequency, stability of chimeras, mutation mechanism, and induction efficiency of mutation in Cymbidium. To analyze the effects of the total dose and irradiation duration on the growth of Cymbidium hybrid, samples were irradiated with seven total doses of γ-rays (0, 20, 40, 60, 80, 100, and 120 Gy) and five irradiation durations (1, 4, 8, 16, and 24 h). Survival and multiplication rates were measured at 3 and 6 months after irradiation (MAI), whereas the regeneration rate was analyzed at 9 MAI. The optimal doses (LD50) for each irradiation duration were estimated: 1 h, 16.1 Gy; 4 h, 23.6 Gy; 8 h, 37.9 Gy; 16 h, 37.9 Gy; and 24 h, 40.0 Gy. The estimated optimal doses were duration-dependent at irradiation durations shorter than 8 h, but not at irradiation durations exceeding 8 h. Using the results of the first experiment as a reference, mutant populations were constructed using diverse γ-irradiation conditions as follows: RB003, irradiation conditions of 50 Gy/ 24 h, 50 Gy/ 16 h, 50 Gy/ 8 h, 35 Gy/ 4 h, and 25 Gy/ 1 h; RB012, irradiation conditions of 40 Gy/ 24 h, 40 Gy/ 16 h, 40 Gy/ 8 h, 30 Gy/ 4 h, 20 Gy/ 1 h, 30 Gy/ 24 h, and 30-30 Gy/ 24 h [re-irradiation of the population treated with 30 Gy/ 24 h]. In the RB003 and RB012 populations, the highest mutation frequency was identified as 4.06% (irradiation condition of 35 Gy/ 4 h) and 1.51% (20 Gy/ 1 h), respectively. Compared with the RB012 population γ-irradiated with 30 Gy/ 24 h, there was no difference on the mutation frequency of the re-irradiated (30-30 Gy/ 24 h) population: 30 Gy/ 24 h, mutation frequency of 0.68%; 30-30 Gy/ 24 h, 0.67%. These results indicate the mutations induced by a short-term treatment may be similar to those induced by a treatment over a longer period. Additionally, leaf-color mutants was identified as relatively stable chimera types, but leaf-shape mutants was unstable and the stability of chimeras was different depending on the type and the location of a mutation on the cell layers. A mutant displaying light-green leaves, obtained by γ-ray-based mutagenesis of a Cymbidium, was subjected to RNA sequencing (RNA-seq) to identify genes associated with leaf color. A total of 144,918 unigenes obtained from more than 25 million generated reads were assigned to 22 metabolic pathways in the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes database. In addition, Gene Ontology was used to classify the predicted functions of unigenes into 73 functional groups. The RNA-seq analysis identified 2,267 genes differentially expressed between wild-type and mutant Cymbidium. Genes involved in chlorophyll biosynthesis and degradation as well as metal ion transport were identified and further evaluated by quantitative real-time PCR. No change was detected in genes involved in chlorophyll biosynthesis. In contrast, seven genes involved in ion transport were down-regulated, and chlorophyllase 2, associated with chlorophyll degradation, was up-regulated. Taken together, our results suggest that alteration in chlorophyll metabolism and/or ion transport regulate leaf color in Cymbidium. This study was approached from the theoretical background that de-condensed chromatins are readily affected by radiation. I selected leaf color of Cymbidium as target traits for trait-targeted mutagenesis, and focused on genes encoding proteins in chlorophyll biosynthetic pathways. Light modulation was used to control the expression of genes related to chlorophyll biosynthesis in Cymbidium. γ-irradiation was conducted when genes encoding proteins of chlorophyll pathways were highly expressed. Light modulation followed by γ-ray treatment resulted in a 1.4~2.0-fold increase in the mutation frequency of leaf-color compared with γ-ray treatment alone without light modulation in Cymbidium. These results indicate that the highly expressed condition of genes associated with specific trait is readily affected by radiation, resulting in an increased frequency of mutation related to the target trait. The information presented herein regarding optimal γ-irradiation condition, mutation frequency, stability of chimeras, mutation mechanism, and induction efficiency of mutation will be useful for the mutation breeding of Cymbidium.물리적 돌연변이원(감마선, X-선, 이온빔 등)을 이용한 방사선 돌연변이 육종법은 다양한 식물에 활용되어 현재까지 공식적으로 3,000종 이상이 개발되었다. 특히, 우수 품종의 1~2개 형질을 개량하는데 유용하게 활용되고 있으며, 종자번식 작물을 중심으로 돌연변이의 유기 기작, 적정 방사선 처리조건, 돌연변이 발생빈도 등에 대해 활발한 연구가 진행되었다. 반면, 영양번식 작물의 경우 국화를 제외하고는 관련 연구가 제한적으로 진행되었으며, 특히 한국, 중국, 일본의 화훼산업에서 중요한 화훼작물에 속하는 난의 경우 보고된 연구가 거의 없다. 본 연구에서는 심비디움을 대상으로 적정 방사선 처리조건, 돌연변이 발생빈도, 돌연변이체의 키메라 안정성, 변이 기작, 돌연변이 유기효율 증진에 대한 연구를 목적으로 한다. 심비디움의 적정 감마선 처리조건 분석은 다양한 조사시간(1, 4, 8, 16, 24시간) 및 조사선량(0, 20, 40, 60, 80, 120Gy)로 처리한 후 3, 6, 9개월에 생존율, 증식률, 재분화율을 비교한 결과 조사시간 1-8시간까지는 RD50 및 LD50이 조사시간에 비례적으로 증가하였으나, 8-24시간에서는 차이가 없는 것을 확인하였다. 1차 도출결과를 활용하여 다양한 감마선 처리집단을 구축하고 돌연변이 발생빈도를 분석한 결과 특정 조사조건(RB003: 35Gy/4h, 변이빈도 4.06%; RB012: 20Gy/1h, 변이빈도 1.51%)에서 높은 변이빈도 및 스펙트럼을 보이는 것으로 확인되었다. 반면, 감마선 재조사에서는 돌연변이 발생빈도에 차이가 없었다. 이러한 결과는 상대적으로 짧은 4시간 이하의 감마선 조사를 통해서 다수의 변이체를 유기할 수 있음을 의미한다. 또한 변이체의 키메라 안정성을 분석한 결과 추정되는 키메라의 발생 형태에 따라 안정성에 차이가 있음을 확인하였다. 감마선에 의한 심비디움 엽색변이체(RB003-S12, 엽록소 감소 돌연변이체)의 변이 메커니즘을 분석하기 위해 대조구와 돌연변이체의 RNA를 추출하여 염기서열을 분석하였다. 그 결과 대조구와 돌연변이체 간의 유전자 발현 차이를 보이는 2,267개(724개 증가, 529개 감소)의 유전자를 도출하였으며, 엽록소 합성 및 분해, 금속이온 전달자에 연관된 유전자가 다수 포함된 것으로 확인되었다. 해당 유전자의 유전자 발현을 정량적 PCR로 분석한 결과 엽록소 생합성과 연관된 유전자는 확인되지 않았으며, 7개의 이온 전달자 유전자는 발현이 감소되었고 엽록소 분해 유전자(chlorophyllase 2)는 발현이 증가되는 것으로 확인되었다. 이러한 결과는 엽록소 및 금속이온 전달 대사과정에서 발생된 돌연변이가 엽색의 변화를 미친다는 것을 의미한다. 특정 전 처리를 통해 목표 형질의 유전자 발현이 증가된 상태에서 감마선을 처리할 경우 목표 형질의 돌연변이 유기효율이 증진될 수 있는지를 분석하기 위해 심비디움의 엽색을 대상으로 분석을 하였다. 심비디움 기내배양 라이좀을 광 조절(암처리 및 광처리)를 통해 엽록소 생합성을 유도한 후 감마선을 조사하고 엽색 돌연변이의 발생 빈도를 분석하였다. 그 결과 1차 재분화체에 비해 2차 재분화체에서 엽색 돌연변이의 발생 빈도가 높았으며, 광 조절 후 감마선을 조사한 경우(RB003: 변이빈도 0.51%, RB012: 변이빈도 0.30%) 감마선만 조사한(RB003: 변이빈도 0.37%, RB012: 변이빈도 0.15%) 시험구에 비해 엽색 돌연변이의 발생 빈도가 1.4-2.0배 증진된 것으로 분석되었다. 본 연구결과는 심비디움의 돌연변이 육종연구에서 돌연변이 유기 및 키메라의 안정화, 변이 유기증진 등에 중요한 기초자료로 활용될 것으로 기대한다.GENERAL INTRODUCTION 1 REFERENCES 6 CHAPTER I. Effects of the total dose and duration of γ-irradiation on the growth responses and induced SNPs of a Cymbidium hybrid 10 ABSTRACT 11 INTRODUCTION 12 MATERIALS AND METHODS 16 Plant materials 16 γ-Irradiation 16 Evaluation of PLB growth responses 17 DNA extraction 17 GBS analysis 18 RESULTS 20 Effects of the total dose and irradiation duration on PLB growth responses 20 Estimated 50% lethal dose (LD50) and 50% reduction dose (RD50) 26 Evaluation of heterozygosity, natural variation, and induced SNPs. 29 DISCUSSION 32 Effects of the total dose and irradiation duration on PLB growth responses 32 Optimal γ-irradiation for inducing mutations 35 Genome complexity and induced SNPs 36 REFERENCES 39 CHAPTER II. Frequency, spectrum, and stability of leaf mutants induced by diverse γ-ray treatments in two Cymbidium hybrids 43 ABSTRACT 44 INTRODUCTION 45 MATERIALS AND METHODS 49 Plant materials 49 Optimal γ-ray dose determination 49 Mutant population construction 50 Phenotype and stability analysis of leaf mutants 50 RESULTS 52 Effects of γ-irradiation on rhizome growth parameters 52 Comparison of mutation frequency and spectrum among γ-irradiated populations 55 Evaluation of stability among leaf mutants 60 DISCUSSION 64 Optimal γ-irradiation condition for mutation induction 64 Frequency and spectrum of induced leaf mutants 65 Effects of short-term irradiation and re-irradiation on mutation induction 66 Stability of induced chimera mutants 68 REFERENCES 70 CHAPTER III. Transcriptome analysis to identify candidate genes associated with the yellow-leaf phenotype of a Cymbidium mutant generated by γ-irradiation 73 ABSTRACT 74 INTRODUCTION 75 MATERIALS AND METHODS 78 Plant materials 78 RNA extraction 78 Quantitative real-time PCR (qRT-PCR) analysis 78 Chl and carotenoid content assay 79 RNA sequencing and de novo assembly 80 Functional annotation 80 Identification of differentially expressed genes between wild type and S12 mutant 81 RESULTS 83 Reduced accumulation of Chls and carotenoids in the S12 mutant 83 The implicated role of ion transport and Chl catabolism in the S12 phenotype according to DEG analysis 92 DISCUSSION 109 REFERENCES 113 CHAPTER IV. γ-irradiation combined with light modulation increases the frequency of leaf-color mutation in Cymbidium 120 ABSTRACT 121 INTRODUCTION 122 MATERIALS AND METHODS 126 Plant materials 126 Light modulation 126 Chl analysis 127 RNA extraction and RT-qPCR analysis 127 γ-ray treatments and evaluation of induced leaf mutants 128 Statistical analyses 129 RESULTS 130 Effect of light modulation on Chl degradation and biosynthesis 130 Effect of light modulation on Chl pathway gene expression 135 Induction frequency of Chl-related leaf-color mutants 137 DISCUSSION 141 Light modulation up-regulates gene expression in Chl pathway 141 Light modulation followed by γ-ray treatment increases leaf-color mutation 143 REFERENCES 145 GENERAL CONCLUSION 152 ABSTRACT IN KOREAN 156Docto

애기장대 유래 Pseudouridine Kinase의 구조와 생화학적 기능 분석

학위논문(박사) -- 서울대학교대학원 : 농업생명과학대학 농생명공학부, 2021.8. 이상기.RNA의 변형은 종류가 매우 다양하며 각각 RNA들의 안정성, mRNA와 단백질들간의 상호작용 그리고 단백질로의 번역과정에 효율성을 조절하는 등 다양한 역할을 담당한다. 대부분의 경우, RNA의 변형은 효소들에 의해서 특정 RNA에 부위 특이적으로 일어난다. 이들의 생물학적 역할, 생합성과정 관련 연구들과 비교해 변형된 RNA 의 분해 관련 연구는 비교적 미비하다. 가장 많이 발견되는 RNA 변형중 하나인 pseudouridine의 대사 관련 효소들이 최근 애기장대에서 동정이 되었다. 애기장대에서는 두개의 효소에 의해 pseudouridine의 분해를 촉매된다: PSEUDOURIDINE KINASE (PUKI) 와 PSEUDOURIDINE MONOPHOSPHATE GLYCOSYLASE (PUMY). PUKI와 PUMY는 pseudouridine을 pseudouridine monophosphate로 인산화 시키는 과정과 pseudouridine monophosphate를 uracil과 ribose 5’-phosphate로 가수분해하는 과정을 각각 촉매 한다. 차례로 해당 산물들은 pyrimidine의 일반적인 대사과정이나 재활용 과정에 사용된다. 본 학위논문에서는 pseudouridine 분해의 첫번째과정을 담당하는 효소인 애기장대 유래 PUKI의 단백질 삼차 구조를 분석하고, 규명된 단백질의 구조를 기반으로 기질 특이성에 관련된 인자들을 밝히고자 한다. AtPUKI는 PfkB family에 속하는 carbohydrate kinase로써, homodimer가 생물학적 기능 단위이다. 구조적인 특징으로는 α/β domain를 중심으로 가지고 있으며, 이로부터 유래한 β-strand domain로 구성이 되어있다. 흥미롭게도, β-strand domain는 dimerization interface를 제공하는 동시에 기질 특이성을 결정짓는 역할을 수행한다. AtPUKI, pseudouridine 그리고 ATP 결합구조를 토대로 AtPUKI에는 pseudouridine이 결합할 수 있는 독특한 결합부위가 존재하며, 이는 여러 개의 친수성 아미노산들에 의해 매개가 되는 것을 확인하였다. 특히, 인접한 단량체의 β-strand domain로부터 유래한 loop 또한 기질의 특이성을 결정짓는데 중요한 역할을 하며, 구조적인 변화의 수반이 요구된다는 것을 제시하였다. 이러한 동적인 특징은 AtPUKI가 uridine보다 pseudouridine에 높은 촉매 효율을 보이는 이유를 잘 설명한다. 두 기질들은 모두 AtPUKI와 비슷한 결합 친화도를 보이며 잘 결합하지만, 오직 pseudouridine만이 AtPUKI의 구조적인 변화를 야기하며 효소에 의해 효율적으로 분해된다(높은 turnover rate)는 것을 제시했다. 이러한 결과들은 어떻게 AtPUKI가 uridine을 포함하는 다른 pyrimidine nucleoside의 항상성을 방해하지 않고, pseudouridine의 인산화에만 관여하는지를 잘 설명하며, 더 나아가 PfkB family에 속하는 다양한 효소들의 구조적 그리고 기능적 다양성의 예시로서 사용될 수 있다.RNA modifications are chemically diverse site-specific events, achieved in most cases through an enzyme-dependent reaction. They regulate the stability of RNAs, mRNA–protein interactions, and translation efficiency. Compared to studies related to the biological role and biosynthesis process of RNA modifications, studies on the degradation of modified RNA are relatively incomplete. Recently, metabolic fate of pseudouridine, one of the most prevalent modified RNAs, was characterized in plant Arabidopsis thaliana. In the A. thaliana, two enzymes are responsible for pseudouridine degradation: PSEUDOURIDINE KINASE (PUKI) and PSEUDOURIDINE MONOPHOSPHATE GLYCOSYLASE (PUMY). PUKI and PUMY are involved in phosphorylating pseudouridine into pseudouridine monophosphate and hydrolyzing pseudouridine monophosphate into uracil and ribose 5’-phosphate, respectively. The resulting products can be subjected to a general pathway for pyrimidine catabolism or the salvage pathway. In this thesis, I conducted structural and biochemical analyses of PUKI from A. thaliana (AtPUKI), the enzyme catalyzing the first step in pseudouridine degradation. AtPUKI, a member of the phosphofructokinase B (PfkB) family of carbohydrate kinases, is a homodimeric α/β protein with a protruding small β-strand domain, which serves simultaneously as dimerization interface and dynamic substrate specificity determinant. AtPUKI has a unique nucleoside binding site specifying the binding of pseudourine, of which one is mediated by a loop from the small β-strand domain of the adjacent monomer. Conformational transition of the dimerized small β-strand domains containing active site residues is required for substrate specificity. This dynamic feature explains the higher catalytic efficiency for pseudouridine over uridine. Both substrates bind well to the AtPUKI with similar Km value, but only pseudouridine is turned over efficiently. These results provide an example for structural and functional divergence in the PfkB family and highlight how AtPUKI avoids futile uridine phosphorylation which in vivo would disturb pyrimidine homeostasis.Introduction 1 RNA modification 2 Chemical property and role of pseudouridine 5 Catabolism of canonical pyrimidine nucleoside 6 Catabolism of non-canonical nucleotides 10 Materials and Methods 17 Cloning and purification of AtPUKI 18 Crystallization and structure determination 27 Activity assays 33 Results and Discussion 37 Structure of unliganded AtPUKI 38 Structural homologs of AtPUKI and the structure of the monovalent cation-binding site 47 The ternary complex of AtPUKI with pseudouridine and ADP 55 Functional features of the AtPUKI active site residues 67 High fidelity of AtPUKI for pseudouridine 88 The substrate pocket of AtPUKI in comparison to ribokinase and adenosine kinase 90 The Mg2+-binding site and catalysis in AtPUKI 93 Reference 97 Accession numbers 102 Abstract in Korean 103박

Effect of Rollback in Triplet Loss based Deep Network for Person Re-Identification

학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :공과대학 전기·컴퓨터공학부,2019. 8. 최진영.Person re-identification is the technique for matching information of the same person among images taken by several non-overlapping camera. It can be usefully applied to human tracking, visual surveillance, forensics and so on. Person re-identification has two main branches: "Cross-entropy method" based on image classification technique and "Triplet method" using image pair input and triplet loss function. Because each method has its own advantage, it is difficult to compare which method is proper to solve the open problem like person re-identification. In this paper, we compare Cross-entropy method and Triplet method, and apply the effect of rollback, which was previously used only for Cross-entropy method, to Triplet method. In addition, we propose an algorithm that can achieve better performance by applying both Cross-entropy method and Triplet method simultaneously.사람 재인식 (Person re-identification) 기술은 여러 개의 겹치지 않는 카메라 뷰(camera view)로부터 촬영된 사람들의 정보 중 동일한 사람의 정보를 매칭시키는 기술이다. 이러한 기술들은 대인 이동 경로 추적, 감시 시스템(visual surveillance), 포렌식(forensic) 등에 유용하게 적용될 수 있다. 사람 재인식 기술은 크게 두가지 방향성을 가지는데, 이미지 분류 기반의 cross-entropy 손실함수를 사용하는 방법과 이미지 쌍을 입력받아 triplet 손실함수를 사용하는 방법이 있다. 각각의 방법들의 고유한 특성 때문에 어떤 방법이 열린 집한 문제를 해결하는데 더 유력한 방법이라고 비교하기는 어렵다. 본 논문에는 이미지 분류 기반의 방법과 triplet 손실함수 기반의 방법을 비교하고, 기존에는 이미지 분류 기반의 방법에만 활용되었던 롤백(Rollback)의 효과를 triplet 손실함수 기반의 방법에도 적용하여 해당 방법에 대한 롤백의 유용성을 검토하였다. 추가로, 사람 재인식 기술의 두 방법을 동시에 적용하여 더 좋은 성능을 내는 알고리즘을 제안하였다1 서론 1 1.1 연구 배경 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1.2 연구 내용 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 2 배경 지식 4 2.1 선행 연구 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 2.1.1 사람 재인식 데이터셋의 경향 . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 2.1.2 사람 재인식 기술의 방법 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 2.1.3 학습 전략 개선에 대한 기존의 연구들 . . . . . . . . . . . . 6 2.2 배경 이론 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 2.2.1 이미지 분류를 위한 딥러닝 모델에서 cross-entropy 손실함수 7 2.2.2 사람 재인식을 위한 딥러닝 모델에서의 triplet 손실함수 . . . 8 2.2.3 데이터 증가 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 ii 3 제안 방법 12 3.1 Cross-entropy 방법의 사람 재인식 네트워크 구조 . . . . . . . . . . 12 3.2 Triplet 방법의 사람 재인식 네트워크 구조 . . . . . . . . . . . . . . 13 3.3 Cross-entropy 방법과 Triplet 방법을 통합한 사람 재인식 네트워크 구조 15 3.4 롤백(Rollback)의 적용 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 4 실험 결과 19 4.1 합성곱 신경망 기반 사람 재인식 방법의 학습과 테스트 . . . . . . . 19 4.1.1 사람 재인식 기술의 성능 측정 메트릭 . . . . . . . . . . . . 19 4.1.2 학습 방법 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 4.1.3 테스트 방법 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 4.2 실험 결과 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 4.2.1 실험 세부사항 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 4.2.2 Cross-entropy 방법의 비교 실험 . . . . . . . . . . . . . . . . 24 4.2.3 Triplet 방법의 비교 실험 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 4.2.4 통합 네트워크의 비교 실험 . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 4.2.5 통합 네트워크에서 롤백의 효과 . . . . . . . . . . . . . . . . 27 4.2.6 실험 결과 종합 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 4.2.7 각 scheme 별 통합네트워크의 성능 . . . . . . . . . . . . . . 29 4.2.8 기존에 가장 높은 성능을 발휘하는 사람 재인식 네트워크들 과 통합 네트워크의 성능 비교 . . . . . . . . . . . . . . . . . 30 5 결론 31Maste

시간성의 선적 이미지를 가진 기물 제작 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 디자인학부, 2017. 2. 민복기.본 논문은 판금작업은 비교적 긴 시간이 소요되는 행위라는 것이 연구의 동기가 되었다. 시간을 심리적이고 주관적인 관점에서, 영원(永遠)의 시간, 흐르는 시간, 찰나(刹那)의 시간으로 분류로 세분화하였다. 연구는 이와 같이 시간에 대한 세 가지 분류를 중심으로, 이러한 시간의 개념을 드러내는, 오래된 바위나 나무 같은 자연물의 이미지를 작품의 모티브로 활용하였다. 자연은 영원과 순간, 불변 혹은 변화와 관련되는 시간의 방향성을 효과적으로 보여주는 소재라고 생각했기 때문에 이를 판금기법을 사용하는 기물에 접목시켜 보고자 한다. 시간과 자연의 연관성을 설명하기 위해 물리적 시간, 심리적 시간의 개념을 살펴보고 시적 심상을 활용하여 자연물과 작품의 감성적 연관관계를 전달하고자 하였다. 자연에 존재하는 다수의 선적 이미지는 문학작품을 통해 그 감성을 효과적으로 전달할 것이다. 시간의 세 가지 분류에 따른 자연물의 감성적 측면을 살펴보면 첫째, 영원에 가까운 시간 크기를 가진 자연물로 깎인 절벽, 마모되어 부드러워진 돌, 울창하게 우거진 숲 등을 예로 들 수 있다. 이 자연물들은 서사적 성격을 지니며 인내심, 고독, 외로움, 시련, 경외 같은 정적인 감정들을 떠올리게 하는 매개체가 된다. 둘째, 흐르는 시간의 속성을 가진 자연물로 바람이 만들어 낸 모래사장의 모래의 결, 계속해서 출렁이는 물의 표면을 예로 들 수 있다. 이것은 관성을 가진 지속성과 반복성을 지닌 자연물로, 일상의 감정을 자아내면서도 지루하지 않고 계속 지켜보게 만드는 힘을 가지고 있다. 마지막으로, 찰나의 시간 속성을 가진 자연물로 안개비가 흩날려 내리는 순간과 나뭇잎 사이로 들어오는 반짝이는 햇살의 이미지를 들 수 있다. 찰나의 이미지는 눈으로 보는 순간 없어져 버리고 순간의 감정으로만 기억 할 수 있는 특성이 있다. 따라서 각각의 자연물의 선적이미지를 기물에 나타냄으로써 이와 같은 감성적 측면이 전달되도록 하였다.Ⅰ. 들어가는 말 1 Ⅱ. 시간의 흐름과 자연의 선적 이미지 3 1. 시간의 속성과 자연의 선적 이미지와의 관계 3 1.1. 시간의 속성과 자연의 선적 이미지 3 1.2. 영원(永遠)의 시간과 관련된 자연의 선적 이미지 5 1.3. 흐르는 시간과 관련된 자연의 선적 이미지 6 1.4. 찰나(刹那)의 시간과 관련된 자연의 선적 이미지 7 2. 시간의 세 가지 분류에 따른 감정 9 Ⅲ . 작품연구 15 1. 긴 시간적 속성을 가진 자연이미지를 모티브로 한 작품 17 작품 1. 깎인 절벽 18 작품 2. 부드러워진 돌 23 작품 3. 울창한 숲 27 2. 흐르는 시간의 속성을 가진 자연이미지를 모티브로 한 작품 30 작품 4. 모래사장의 모래 30 작품 5. 흐르는 물줄기 34 3. 찰나의 시간적 속성을 가진 자연이미지를 모티브로 한 작품 39 작품 6. 흩날리는 안개비 39 작품 7. 반짝이는 햇살 42 Ⅳ. 결론 45 참고문헌 48 Abstract 50Maste

SK텔레콤 MelOn

2006년 8월, 서울시 중구 을지로2가에 자리잡은 SK텔레콤의 사옥T-타워는 한밤 중에도 잠들 지 않았다. 불을 환하게 밝힌 이 건물 11층의 SK텔레콤 콘텐츠 사업본부. 임직원은 열띤 토론을 펼 치며 시간 가는 줄 몰랐다. 콘텐츠 사업본부장인 신원수 SK텔레콤 상무와 몇몇 직원들은 SK텔레콤의 뮤직포털멜론 (www.melon.com)의 향후 나아갈 길에 대해 갑론을박 다채로운 의견을 내놓았다. 신원수 상무는 멜론을 위해 개발한 SK텔레콤 고유의 DRM(Digital Right Management: 디지털저작권관리)을 보 다 다른 시각으로 검토해볼 필요가 있다면서앞으로 DRM을 개방한다면, 수익은 줄겠지만 사용 자 기반은 넓어질 것이라고 말했다. DRM을 개방한다는 말은 무슨 의미일까. 현재 SK텔레콤의 멜론은 SK텔레콤과 제휴한 제조업체 의 MP3플레이어, 휴대전화로만 멜론의 음악을 다운로드 하도록 하고 있다. 아울러 멜론 고객의 단말기로 등록한 휴대전화 1대, MP3 플레이어 1대에서만 이용 가능하다. DRM을 개방하면 SK텔레콤 고객도 멜론이 아닌 다른 유료 음악사이트에서 구매한 음악을 자 신의 MP3폰에 옮겨서 들을 수 있게 된다. 즉 DRM은 음악 등 디지털 콘텐트의 무단 사용을 막 아 저작권 관련 당사자들의 이익과 권리를 보호해 주는 일종의디지털 자물쇠역할을 하고 있다

Study on the operation efficiency of steel stock yard using simulation

In shipbuilding industry, The steel plate is a representative material constituting the structural part of the hull such as outer panel, inner panel and reinforcing material, which corresponds to about 10% to 12% of the ship price. These steel plate that are produced in steelworks is come in the shipyard and sent to steel stock yard. Therefore, in order to prevent the delay of the process and to observe the delivery date, a management system is required to allow the stocked steel to be input to the pre-treatment process in a timely manner. However, the steel plate used in the shipyard varies in size and material, and the contracts are concluded for several steelworks, so that the variability of the day of arrival is large. Therefore, time and cost are wasted due to the relocation of the steel during the process of moving the steel plate during the stacking and dispensing operations. In order to solve these problems, this study constructed dispatching model by using discrete event simulation(DES). Through this, it is aimed to explore the best way to operate the steel stock yard efficiently while minimizing the movement fo the crane while maintaining the quality of the steel plates.List of Tables ⅲ List of Figures ⅳ Abstract ⅴ 1. 서 론 1 1.1 연구배경 1 1.2 관련 연구 동향 3 1.3 연구 목적 5 2. 적용개념 6 2.1 이산 사건 시뮬레이션 6 2.1.1 Resource centric simulation 6 2.1.2 Process centric simulation 8 2.2 AnyLogic 솔루션 9 2.3 경제성 분석 11 3. 강재적치장 분석 14 3.1 조선소 강재 주문 프로세스 14 3.2 조선소 강재 입고 및 불출 프로세스 15 3.3 강재적치장 운영상의 문제점 17 3.4 강재적치장 레이아웃 분석 18 3.5 강재적치장 강재 정보 분석 21 4. 강재적치장 모델링 23 4.1 강재적치장 시뮬레이션 플랫폼 23 4.2 강재적치장 운영 프로세스 정의 24 4.3 시뮬레이션 단위 모델 구현 31 4.3.1 시뮬레이션 단위 모델 검증 31 4.4 시뮬레이션 모델 구현 33 4.4.1 객체(Agent) 정의 33 4.4.2 시뮬레이션 변수 정의 36 4.4.3 Collection 정의 39 4.4.4 Statechart 정의 41 4.5 강재적치장 시뮬레이션 모델 구축 43 5. 강재적치장 시뮬레이션 수행 및 결과 분석 56 5.1 시뮬레이션 케이스 정의 56 5.2 시뮬레이션 결과 지표 정의 58 5.3 시뮬레이션 결과 분석 59 5.4 TDABC 분석 63 5.5 강재입고계획 수립 76 6. 결론 78 6.1 연구 결론 78 References 79Maste

소규모맥주 제조업을 중심으로

학위논문 (석사) -- 서울대학교 대학원 : 행정대학원 행정학과(정책학전공), 2020. 8. 김봉환.본 연구는 2020년부터 시행된 맥주의 종량세 전환을 골자로 한 주세법 개정 사례와, 맥주의 종량세 전환을 검토하였으나 실패한 2014년 주세법 시행령 개정 사례를 정책옹호연합모형을 적용하여 분석하였다. 정책옹호연합모형의 여러 요인 중 안정적 외적변수, 역동적 외적변수, 정책하위체제 3가지를 주요 요인으로 설정 후 사례별로 비교 분석하여 어떠한 요인이 정책 산출의 차이를 도출하였는지 확인하고자 하였다. 연구 기간은 종량세로의 전환 요구가 공식적으로 제기되었던 2012년부터 맥주의 종량세 전환이 확정된 2019년까지로 하였으며, 종량세 전환에 관한 연구논문, 국회 회의록, 보도자료, 연구보고서 등의 자료를 수집하는 내용분석방법을 연구 방법으로 채택하였다. 분석 결과 두 사례에 있어 주요한 변화가 있었던 요인은 역동적 외적변수의 정치체제 통치연합 변화였다. 정책 하위체제인 맥주 종가세 유지 옹호연합과 정책중개자 의 변화가 있었지만, 맥주 종가세 유지 옹호연합과 정책중개자는 정치체제 통치연합 변화 요인 중 중소기업 지원 정책 기조의 변화에 따라, 조세 당국의 입장이 변한 것으로, 정치체제 통치연합 변화로 인해 수반되는 변화였기 때문에 결론적으로 정치체제 통치연합 변화가 두 사례의 정책산출 차이에 영향을 미친 것으로 볼 수 있었다. 본 연구는 7년여 사이에 두 차례에 걸쳐 시도된 유사한 정책의 실패 사례와 성공 사례를 다룸으로써 외부요소의 혼동효과를 배제하였다는 점과 각 요인에 대해서 객관적 자료를 바탕으로 분석하였다는 점에서 의의가 있다고 본다. 동일한 정책(맥주의 종량세 전환)이 상반된 결과로 귀결된 것을 대비시키고, 정책옹호연합모형 요인별로 객관적인 자료를 근거로 제시하여 변화 유무를 확인하였으며, 이를 통한 인과관계 설명에 초점을 맞추었다는 점에서 기존 연구의 접근 방식과 차별성을 두었다. 향후, 동일한 정책이 시차를 두고 실패하거나 성공한 사례를 정책옹호연합모형을 적용하여 분석할 때 이와 같은 방식으로도 접근할 수 있음을 제시하였다는 점에서 의의가 있다고 본다.This study analyzed the cases of the revision of the liquor tax act implemented in 2020 and the revision of the 2014 enforcement decree of the liquor tax act, which failed to change the specific tax on beer, by applying the Advocacy Coalition Framework. Among various variables in the Advocacy Coalition Framework, three main variables were Relatively Stable Parameters, External Events, and Policy subsystem. The comparative analysis was conducted on a case-by-case basis to confirm which variables resulted in differences in policy output. This research is from 2012, when the demand for conversion to a unit tax was officially raised, to 2019, when the conversion of a unit tax on beer was confirmed. And the content analysis method was adopted by collecting research papers, minutes of the National Assembly, press releases, and research reports. According to the analysis, the main factor that causes major changes in the two cases was Changes in systemic governing coalition of External Events. While the policy subsystem of "the Union for the Maintenance of an ad valorem tax" and "the Policy Broker" have also changed, Both "the Union for the Maintenance of an ad valorem tax" and "the Policy Broker" have changed in line with the adjustment in the policy stance of supporting small and medium-sized enterprises. It can be regarded as these changes of two factors are resulted from Changes in a systemic governing coalition. This study shows significance in that it excluded the confusion effects of external factors by dealing with similar policy failures and successes attempted twice in seven years and analyzed each factor based on objective data. It was different from the approach of the previous research in that the same policy (the Conversion to a unit tax on Beer) was prepared for the conflicting results, and the change was confirmed based on objective data by the factors of the Advocacy Coalition Framework, and the focus was on explaining the causal relationship. In the future, it can show the significance that the same policy, whether failed or successful with a time lag, can be applied to analyze using the Advocacy Coalition Framework.제 1 장 서론 1 제 1 절 연구의 목적 및 필요성 1 제 2 장 이론적 논의 3 제 1 절 정책옹호연합모형 3 1. 정책옹호연합모형의 개관 3 2. 정책옹호연합모형의 구성요소 4 제 2 절 주세법 7 1. 우리나라의 주류 과세 체계 7 2. 주류시장의 이해 9 3. 종가세와 종량세 12 4. 종가세 및 종량세에 따른 유불리 17 5. 중소기업 정책 강화와 맥주의 종량세 전환의 연관성 21 제 3 장 선행연구의 검토 26 제 1 절 정책옹호연합모형 26 제 2 절 주세법 개정 29 제 4 장 연구 설계와 사례 소개 32 제 1 절 연구설계 32 1. 연구문제 32 2. 자료수집 33 3. 연구 방법 및 분석틀 33 제 2 절 사례소개 35 1. 맥주의 종량세 전환 사례 소개 35 2. 2014년 주세법 시행령 개정 vs 2020년 주세법 개정 38 제 3 절 정책옹호연합모형 구성요소 설정 48 1. 안정적 외적변수 48 2. 역동적 외적변수 61 3. 정책하위체제 83 4. 사례별 비교 요약 88 제 5장 결론 98 제 1 절 연구 결과 98 제 2 절 연구의 의의 99 제 3 절 연구의 한계 100 참고문헌 101 Abstract 111Maste

Improvement of propagation property of THz TEM-mode using tapered parallel plate waveguide

This paper an experimental study of a tapered parallel-plate waveguide(TPPWG) to improve THz coupling to the plate separation gap. Propagating THz waves has a small absorptance and no group velocity dispersion in PPWG 100um gap. However about 30% reflection loss from si lens and has loss to the structure problem. This loss induces a low coupling efficient. To prevent the reflection loss and to concentrate the THz beam on the air gap, of the plate separation the structure of the input side of the PPWG was changed a tapered structure. The five different slop angles of the tapered part-i.e., 20˚,15˚,10˚,5˚, and 3˚ were used to get the THz pulses. As the slop angle of the TPPWG decreased, the amplitudes of the THz pulses were enhanced. Had the slop angle been smaller than 3˚, the measured THz pulse would have been enhanced more. When the input THz beam was incidence to one-sided TPPWG has a reflection on boundary surface. To reduce the reflection, boundary surface made a changing round. When Compare The round TPPWG with non round TPPWG, increased by 15% at the peak to peak and was enhanced by 13% at the 1THz frequency. And, the input-, output- side of the PPWG was changed a two-sided tapered structure. The peak to peak THz amplitude of the two-sided TPPWG improved by 138% compare with the PPWG. also improved by 38% compare with the one-sided TPPWG. The PPWG attenuation loss is considered, the two-sided TPPWG, the on-sided TPPWG and the PPWG had a respectively 56%, 42%, and 27% coupling. Also, Use the PPWG and TPPWG, coupling improvement of TSP was generated on aluminum sheet. The improvement of TSP coupling the aluminum surface was done by the vertical-, horizontal-, and check grooves on the aluminum sheet with 50um thickness. The vertical and check grooves on the metal surface was 100% improved coupling efficient than that of the horizontal and smooth surfaces. Also, 0.5mm groove period had 100% improved coupling efficient compare with the 1.0mm groove period. Although the amplitude of spectra to the vertical and check grooves was improved, the spectrum bandwidth was reduced compare with the horizontal and smooth surface.Abstract 제 1 장 서 론 1. 1 테라헤르츠파 1. 2 경사진 평행 도파로(TPPWG) 제 2 장 도파로 구조 및 실험 장치도 2. 1 PPWG 및 TPPWG 구조 2. 2 실험장치도 제 3 장 경사진 도파로의 전파특성 3. 1 평행판 도파로 전파 3. 1. 1 TM0(TEM) 단일모드 3. 1. 2 평행판 도파로 전파손실 3. 2 경사각에 따른 one-sided TPPWG 전파특성 3. 3 경계면이 둥근 one-sided TPPWG 3. 4 Two-sided TPPWG 전파특성 3. 4. 1 Two-sided TPPWG 구조 3. 4. 2 입사 방향에 따른 one-sided TPPWG 전파 3. 4. 3 Two-sided TPPWG 전파 제 4 장 THz 표면 플라즈몬 4. 1 표면 플라즈몬(Surface Plasmon) 4. 2 실험장치 및 구조 4. 3 PPWG를 이용한 THz SP의 결합 4. 4 금속 표면 구조에 따른 THz SP의 결합 특징 4. 4. 1 Vertical Groove 4. 4. 2 Horizontal Groove 4. 4. 3 Check Groove 제 5 장 결 론 참 고 문

SEPARATION CONTROL USING SYNTHETIC JET ON NACA23012 AT HIGH ANGLE OF ATTACK

Flow control has been performed using synthetic jet on NACA23012. In order to improve aerodynamic performance, synthetic jet is located near separation point on airfoil with leading edge droop and plain flap. The flow control using synthetic jet shows that stall characteristics and control surface performance can be improved through resizing separation vortices. Stall is delayed and stall characteristics are improved when synthetic jet is applied from separation region of leading edge droop. Control surface effectiveness is increased and lift is increased when synthetic jet applied at the flap leading edge region. The results show that aerodynamic characteristics can be improved through leading edge droop with synthetic jet at near separation and plain flap with synthetic jet at the flap leading edge. The combination of synthetic jet and simple high lift device is as good as fowler flap system.OAIID:oai:osos.snu.ac.kr:snu2005-01/104/0000004648/21SEQ:21PERF_CD:SNU2005-01EVAL_ITEM_CD:104USER_ID:0000004648ADJUST_YN:NEMP_ID:A001138DEPT_CD:446CITE_RATE:0FILENAME:고받음각의_NACA23012익형에서_synthetic_jet을_이용한_박리_제어_연구.pdfDEPT_NM:기계항공공학부EMAIL:[email protected]:

Flow Control of Smart UAV Airfoil Using Synthetic Jet Part 2 : Flow control in Transition Mode Using Synthetic Jet

In order to reduce the download around the Smart UAV(SUAV) at Transition mode, flow control using synthetic jet has been performed. Many of the complex tilt rotor flow features are captured including the leading and trailing edge separation, and the large region of separated flow beneath the wing. Based on the results of part 1 of the present work, synthetic jet is located at 0.01c, 0.95cflap and it is operated with the non-dimensional frequency of 0.5, 5 to control the leading edge and trailing edge separation. Consequently, download is substantially reduced compared to with no control case at transition mode using leading edge jet only. The present results show that the overall flight performance and stability of the SUAV can be remarkably improved by applying the active flow control strategy based on synthetic jet.스마트 무인기 익형 주위의 유동 구조를 파악하고 이를 바탕으로 synthetic jet을 이용하여 천이 비행 모드에서의 수익하중 감소 여부를 파악하였다. 스마트 무인기의 실제 비행 모드에서의 유동 구조를 분석하여 앞전 및 뒷전에서 발생하는 와류에 의해서 수익하중이 크게 증가함을 밝혔다. 이에 앞전과 뒷전에서 발생하는 유동의 박리를 효과적으로 제어하기 위하여 Part 1의 결과를 바탕으로 0.01c, 0.95cflap 지점에 jet을 위치시키고 각각 무차원 주파수(F+)를 0.5, 5로 작동시켜 그에 따른 유동구조 변화와 항력 감소율을 알아보았다. 그 결과 천이 비행 모드에서의 유동 제어를 위해서는 앞전에 위치한 jet만을 작동시킬 경우 가장 효과적으로 수익하중을 감소시킬 수 있음을 밝혔다. 이에 정지 비행 모드에서 뿐만 아니라 천이 비행 모드에서 synthetic jet을 이용하여 유동을 제어한다면 스마트전 비행 모드에서의 비행성능과 안정성을 동시에 향상시킬 수 있을 것이다.본 연구는 지식경제부 지원으로 수행하는 21세기 프론티어 기술개발사업(스마트무인기기술개발) 및 방위사업청과 국방과학연구소의 지원 (계약번호 UD0700 41AD)과 한국과학기술정보연구원 슈퍼컴퓨팅센터 (KSC-2007- S00-1016), BK 21사업의 지원을 통해 수행되었습니다.OAIID:oai:osos.snu.ac.kr:snu2009-01/102/0000004648/11SEQ:11PERF_CD:SNU2009-01EVAL_ITEM_CD:102USER_ID:0000004648ADJUST_YN:NEMP_ID:A001138DEPT_CD:446CITE_RATE:0FILENAME:Synthetic jet을 이용한 스마트 무인기(SUAV) 유동제어 Part 2.pdfDEPT_NM:기계항공공학부EMAIL:[email protected]_YN:NCONFIRM: