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PRODUÇÃO RECOMBINANTE DA ENZIMA LIGNINA PEROXIDASE DE Lentinus tigrinus EM CÉLULAS DE Escherichia coli.
O Brasil é o maior produtor mundial de açúcar e etanol; de acordo com dados de 2017 da União da Indústria de Cana-de-açúcar (UNICA), entre 2016 e 2017, aproximadamente 652 mil toneladas de cana de açúcar foram comprimidas e 27,2 milhões de metros cúbicos de etanol foram produzidos, gerando uma grande quantidade de bagaço de cana.A acumulação de resíduos agroindustriais devido às altas taxas de produção, muitas vezes, pode causar vários problemas de gerenciamento e eliminação. Existem muitos casos em que os resíduos agroindustriais têm sido indevidamente descartados, ou depositados em aterros, acarretando danos ambientais (Pellera, 2016).Materiais lignocélulosicos são fontes abundantes de compostos orgânicos, apresentando grande potencial de uso como matéria prima em processos industriais para produção de alimentos, combustíveis, insumos químicos, enzimas e bens de consumo diversos (Latif; Rajoca, 2001). Uma grande variedade de fungos e bactérias consegue degradar esse material lignocelulósico usando uma bateria de enzinas hidrolíticas e oxidativas (Vitti, 1988).Desse modo, o presente trabalho propõe avaliar a expressão da enzima Lignina peroxidase (LiP) do fungo Lentinus tigrinus e sua clonagem em células de E. coli objetivando-se uma futura aplicação na deslignificação no bagaço de cana
CLONAGEM E EXPRESSÃO HETERÓLOGA DE UMA MANGANÊS PEROXIDASE DE Trametes villosa (Sw.) Kreisel, A PARTIR DE CÉLULAS DE Escherichia coli.
A indústria de açúcar e etanol tem um importante papel no processo dedesenvolvimento do Brasil, assim há a geração de uma quantidade elevada de resíduosagroindustriais. As matérias-primas lignocelulósicas são as fontes renováveis maisabundantemente encontradas na natureza, sendo compreendidas, pelos resíduosagroindustriais, pelos resíduos urbanos e madeiras. Dentre essas, os resíduosagroindustriais ganham destaque por serem derivados do processamento de matériasprimas com maior valor agregado (CASTRO E PEREIRA JR., 2010).Os fungos são um dos mais importantes decompositores na cadeia alimentarsendo capazes de degradar de forma eficiente uma vasta quantidade de resíduos. Adegradação da lignina, por exemplo, ocorre por meio de fungos que produzem enzimasligninolíticas extracelulares. O uso de enzimas é considerado na atualidade, um dosmaiores setores da indústria biotecnológica. A exploração vem sendo feita da formabruta, a partir de origem animal e vegetal, ou pelo aproveitamento da expressãoenzimática decorrente do crescimento microbiano sobre determinados substratos(COLEN, 2006).O sistema de degradação de materiais ligninocelulósicos envolve uma série dereações. As espécies de basidiomicetos, incluindo as do gênero Trametes, são capazesde realizarem a degradação, devido ao complexo enzimático ligninocelulolíticoespecífico (ALVES, 2010). Dessas enzimas, as que estão em um maior nível de estudosão as Lignina peroxidases (LiPs), Manganês peroxidases (MnPs) e Lacases (Lacs)(GUILLÉN et al., 2000; CONESA et al., 2002; SIGOILLOT, 2012; JANUSZ G, 2013).Desse modo, o presente trabalho propõe obter e caracterizar na formarecombinante a enzima Manganês peroxidase (MnP) do fungo Trametes villosa,objetivando-se uma futura aplicação na deslignificação no bagaço de cana
Recombinant Fungal Cellulases for the Saccharification of Sugarcane Bagasse
Cellulases are important enzymes in cellulose degradation that occurs in nature, this degradation involves a system of extracellular multienzymes and have wide application. The construction of a high-quality system for the production of these enzymes is important for its application in the process of saccharification of biomass involved in the biofuel production process. Several species of fungi are capable of synthesizing and secreting high amounts of cellulase, most studies with fungal species use linearized plasmid, since these are encompassed to chromosomal DNA, improving its stability and expression efficiency. Advances in the production of recombinant enzymes focus on the search for industrially viable microorganisms capable of producing enzymes under various conditions, expressing them in a highly efficient manner, aiming at the synthesis of several copies of genes and a strong promoter. To resay these restrictions, molecular biology combined with recombinant DNA technology is a viable tool in enzymatic production. In subsequent topics, the production of endoglucanases, exoglucanases and β-glucosidase of fungi cloned in Escherichia coli, Pichia pastoris and other different expression systems will be addressed