The ovarian germinal reserve and apoptosis-related proteins in the infant and adolescent human ovary

Background: Normal pubertal ovary displays all stages of follicular development and a biased BAX/BCL2 protein ratio in favor of pro-apoptotic BAX protein comparable to the adult ovary. However, adolescents suffering malignant extragonadal disease show a limited follicle development after cytotoxic drug treatment and a reduced capacity of in vitro follicle growth. We evaluated the expression of pro- and anti-apoptotic members of the BCL2 gene family, the FAS/ FAS-L proteins from the extrinsic apoptosis pathway, the germ-cell-specific marker VASA, the pluripotency marker OCT3/4, and markers of early and late apoptosis in the ovary of pubertal patients with malignant extra-gonadal disease, which received or not pre-surgery chemotherapy, entering a cryopreservation program. Results: Ovarian biopsies from 12 adolescent girls were screened for follicle count and expression of VASA, OCT3/4, BAX, BCL2, MCL1L and S, cleaved-BID, FAS/FAS-L and CASPASE 3 through immunohistochemistry, western blot and RTPCR. All stages of folliculogenesis, from primordial to antral follicle, were present in all 12 patients analyzed. VASA and most of the screened apoptosis-related genes showed a pattern of immune-expression comparable to that previously reported. OCT3/4 showed a cytoplasmic localization in the great majority of the primordial follicles; however, in some cases the localization was nuclear. In addition, OCT3/4B showed a significant reduction compared to OCT3/4A. Unexpectedly, BCL2 was detected at all stages of folliculogenesis, associated to the Balbiani’s body in the primordial follicles, regardless of whether patients had or had not received chemotherapy, ruling out the possibility that its expression is a protective response to chemotherapy. Conclusions: These findings reveal new information on the morphological status of the follicular reserve and the expression of apoptosis-related genes in histologically normal adolescent ovary from patients undergoing extragonadal cancer. The unexpected expression of apoptosis-inhibiting BCL2 protein, both in patients that had or had not received chemotherapy, opens a new avenue for thorough investigations. Moreover, the nuclear localization of OCT3/4 protein in primordial follicle-enclosed oocytes suggests a possible increased activity of ovarian stem cells in response to chemotherapy and/or extragonadal cancer. This new information can be essential for a better managing of in vitro culture of follicles that can be removed by filtration from preserved ovarian tissue, especially in girls that entered a cryopreservation program.Fil: Albamonte, María Itatí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Albamonte, Mirta Susana. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Bou Khair, Ricardo M.. Hospital de Niños “Dr. Ricardo Gutiérrez”. Servicio de Ginecología Infantil; ArgentinaFil: Zuccardi, Luis. Hospital de Niños “Dr. Ricardo Gutiérrez”. Servicio de Ginecología Infantil; ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

PTEN and FOXO3 expression in the prenatal and postnatal human ovary

Purpose: The objective of this study was to analyse the expression and cellular localization of FOXO3, pFOXO3 and PTEN throughout human ovary development both before and after birth. Methods: Foetal, pubertal and adult paraffin-embedded ovarian samples were analysed by immunohistochemistry for cellular localization of FOXO3, pFOXO3 and PTEN proteins. Protein and mRNA expression were analysed by western blot and real time PCR, respectively, from fresh biopsies. Results: PTEN was not detected by immunohistochemistry in germ cells and follicles of foetal, pubertal and adult ovaries. Occasional PTEN immunoreactive granulosa cells were found in atretic antral follicles in the adult ovary. Western blot analysis showed low levels of PTEN protein. Nuclear FOXO3-expressing primordial follicles represented a variable proportion of the ovarian reserve. The presence of FOXO3-expressing primordial follicles was very low in foetal ovary; although always represented in a low proportion, prevalence increased during pubertal and adult life. Conclusion: Our results seem to indicate that two subpopulations of primordial follicles, i.e. nuclear FOXO3-expressing and no FOXO3-expressing primordial follicles are found in the postnatal human ovary. This scenario suggests that FOXO3 could be acting as in the mouse model, preventing primordial follicle activation. However, the strategy would not be an “all or nothing” system as in mouse ovary but rather a selected subpopulation of primordial follicles preserved to ensure long-term fertility.Fil: Albamonte, María Itatí. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Calabró, Lara Y.. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Albamonte, Mirta S.. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Zuccardi, Luis. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Niños "Ricardo Gutiérrez"; ArgentinaFil: Stella, Inés. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Halperin, Julia. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Herramienta virtual para el aprendizaje de la anatomía y anatomía radiológica en los estudiante de medicina de la Universidad del Norte

Las tendencias educativas modernas se basan en un aprendizaje integral dejando de lado el uso exclusivo de clases magistrales y los métodos de estudio convencional, haciendo necesario la utilización de sistemas y prácticas simuladas para el desarrollo de competencias clínicas para el manejo adecuado y seguro de pacientes. Se plantea la investigación, integración e implementación de nuevas tecnologías como los son la utilización de equipos de simulación y modelos anatómicos, herramientas virtuales tales como la realidad aumentada e introduciendo además una tecnología que en los últimos años ha revolucionado las técnicas quirúrgicas como lo es la cirugía guiada por imágenes que hasta el presente solo se ha empleado en  la capacitación para estudiantes de postgrado en diferentes especialidades como la neurocirugía y ortopedia, entre otros. Existe además la posibilidad de utilizar hoy en día herramientas como escáneres e impresoras 3D que facilitan la adquisición y posterior fabricación de especímenes, estructuras y piezas que ayudarán en el análisis morfológico y pruebas de concepto de soluciones planteadas en infinidad de posibles líneas de investigación, además de darle solución a la problemática ética que surge al usar cadáveres con el mismo fin. Partiendo de esto se plantea el uso de un neuronavegador empleado clásicamente para la resección de tumores cerebrales como base para una nueva forma de enseñar anatomía en los estudiantes de medicina acercándolos de forma sencilla a un escenario prácticamente real, creando una base de datos de todas las estructuras del cuerpo humano a través de modelos anatómicos que simulan casi a la perfección toda la anatomía humana proporcionando al estudiante una herramienta novedosa y práctica para el aprendizaje autodidacta obteniendo como resultado una herramienta de enseñanza de anatomía integrando la tecnología de la neuronavegación en un modelo de columna vertebral obtenido por impresión 3D brindando un nuevo apoyo para el aprendizaje de estudiantes de medicina.PregradoMedic

Recommendations for treatment with recombinant human growth hormone in pediatric patients in Colombia

En Colombia, actualmente no existen parámetros claros para el diagnóstico de pacientes con talla baja, ni sobre el tratamiento de esta población con hormona de crecimiento recombinante humana (somatropina), lo cual se ve favorecido por la diversidad de programas de formación de profesionales en endocrinología pediátrica. En respuesta a esta problemática se realizó el primer acuerdo colombiano de expertos en talla baja liderado por la Asociación Colegio Colombiana de Endocrinología Pediátrica (ACCEP); este trabajo contó con la participación y el aval de expertos clínicos de importantes instituciones de salud públicas y privadas del país, además de expertos metodológicos del instituto Keralty, quienes garantizaron la estandarización del uso de la somatropina. Después de realizar una minuciosa revisión de la literatura, se propone la unificación de definiciones, un algoritmo diagnóstico, los parámetros de referencia de las pruebas bioquímicas y dinámicas, una descripción de las consideraciones de uso de la somatropina para el tratamiento de las patologías con aprobación por la entidad regulatoria de medicamentos y alimentos en Colombia y, por último, un formato de consentimiento informado y de ficha técnica del medicamento.In Colombia there are no guidelines for diagnosis and management of patients with short stature and for the use of recombinanthuman growth hormone, mainly caused by the diversity of training centers in pediatric endocrinology. In response to this situation,the Asociación Colegio Colombiana de Endocrinología Pediátrica leds the first colombian short stature expert committee in order tostandardize the use of human recombinant growth hormone. This work had the participation and endorsement of a consortium ofclinical experts representing the Sociedad Colombiana de Pediatría, Secretaría Distrital de Salud de Bogotá- Subred Integrada deServicios de Salud Suroccidente, Fundación Universitaria Sanitas, Universidad de los Andes and some public and private healthinstitutions in the country, in addition to the participation of methodological experts from the Instituto Global de Excelencia ClínicaKeralty. By reviewing the literature and with the best available evidence, we proposed to unify definitions, a diagnostic algorithm,biochemical and dynamic tests with their reference parameters, a description of the considerations about growth hormone use amongthe indications approved by regulatory agency for medications and food in Colombia and finally a proposal for an informed consentand a medication fact sheet available for parents and patients.https://orcid.org/0000-0002-7856-7213https://orcid.org/0000-0003-2241-7854Revista Nacional - Indexad

Macroeconomía y regiones en Colombia

En este libro se incluyen ocho trabajos en los cuales se aprecian claramente las interrelaciones entre la evolución macroeconómica de Colombia y las regiones que la componen. En varios casos coinciden, en buena medida, ciclos, inflación y política monetaria, y los movimientos nacionales y regionales. Por esta razón resulta tan importante el estudio de esas relaciones

The infant and pubertal human ovary: Balbiani's body-associated VASA expression, immunohistochemical detection of apoptosis-related BCL2 and BAX proteins, and DNA fragmentation

STUDY QUESTION: How do apoptosis-related BCL2 and BAX genes, known to regulate death or survival of germ cells in fetal and adult life, and germ-cell-specific VASA protein behave from birth to puberty in the human ovary? SUMMARY ANSWER: In resting primordial follicles in both infant and pubertal ovaries, BCL2 family members and germ-cell-specific VASA behave as in fetal life. After birth, once follicles leave the resting reserve to enter the growing follicular pool, detection of apoptosis-related genes moves from the germ cell to granulosa cells and VASA expression is lost. WHAT IS KNOWN ALREADY: In the human ovary, around 85% of the 7 × 106 potential oocytes produced at mid-gestation are lost before birth, an extra 10% before puberty, and loss continues throughout reproductive life until germinal exhaustion of the ovary. Oocyte loss is mainly driven through a balanced expression of BCL2 gene family members. Apoptosis-inducing BAX gene shows a sustained expression throughout fetal and adult life, whereas apoptosis-inhibiting BCL2 is detectable during the proliferative stage of primordial germ cells and oogonia in the fetal ovary and proliferation of granulosa cells in growing follicles in the adult ovary. The germ-cell marker VASA is detectable in the fetal ovary from early oogenesis and is conspicuously expressed in primordial follicles, where in late pregnancy it is associated with the Balbiani's vitelline space. VASA expression is not detectable in the adult ovary. STUDY DESIGN, SIZE, DURATION: This is a qualitative analysis involving infant/pubertal paraffin-embedded human ovaries screened for apoptosis-related proteins, DNA fragmentation and germ-cell identity. PARTICIPANTS/MATERIALS, SETTING, METHODS: Ovaries from 13 patients ranging in age from 4 to 16 years, undergoing gynaecological surgical procedures due to benign pathology, were studied. Tissues were fixed in 10% formalin, paraffin-embedded and processed for immunohistochemistry to screen the temporal and cellular localization of germ-cell-specific VASA protein and BCL2 and BAX apoptosis-related proteins. In addition, a terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxiuridinetriphosphate nick-end labelling (TUNEL) assay was performed to detect DNA fragmentation. General histology and tissue integrity were assessed by haematoxylin–eosin staining. MAIN RESULTS AND THE ROLE OF CHANCE: VASA showed a differential pattern of expression; in the resting primordial follicle reserve in infant and pubertal ovaries, it was associated with the Balbiani's body space in the germ cell. VASA remained detectable in primary follicles leaving the resting reserve, but once follicles entered the growing pool it became undetectable. This pattern of VASA expression is the same as in the fetal ovary. BAX was expressed both in the resting primordial reserve and in the pool of growing follicles, whereas BCL2 was detected only in granulosa cells in antral follicles in the growing pool. Apoptosis-related protein expression moved from the germ cell to the somatic stratum when primordial follicles left the resting reserve to enter the pool of growing follicles, irrespective of female age. Most TUNEL-positive cells were detected in the granulosa cells of antral follicles. No TUNEL-positive cells were found in resting primordial follicles. LIMITATIONS, REASONS FOR CAUTION: The study was limited by the qualitative nature of the immuno-histochemical analysis and the TUNEL assay. The results neither quantify the levels of germ-cell death nor exclude other concurrent cell death mechanisms that could act in the regulation of female germ-cell number. WIDER IMPLICATIONS OF THE FINDING: This study provides missing knowledge about apoptosis and germ-cell-specific VASA expression in the human ovary between birth and puberty and the participation of BCL2 and BAX genes in the balance between death and survival throughout female germ-line development. Intracellular localization of VASA in resting follicles emerges as a possible marker with prognostic value that needs further investigation, especially in infant patients entering ovarian cryo-preservation programmes. This knowledge will be valuable in optimizing the rescue and clinical use of germ cells to restore fertility in women. STUDY FUNDING/COMPETING INTEREST(S): No external funding was obtained for this study. The authors have no conflicts of interest to declare. TRIAL REGISTRATION NUMBER: Not applicable.Fil: Albamonte, María Itatí. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Albamonte, Mirta S.. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Stella, Inés. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Zuccardi, Luis. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Niños "Ricardo Gutiérrez"; ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

La ruta hacia el crecimiento sostenible en la República Dominicana: Fiscalidad, competitividad, institucionalidad y electricidad

Esta obra es una publicación elaborada por el Banco Interamericano de Desarrollo para el diálogo de políticas con las autoridades de la República Dominicana. El objetivo de este trabajo consiste en contribuir a la profundización del análisis de algunos de los temas que integran la agenda de desarrollo, con miras a promover el diálogo y la búsqueda de soluciones a los principales retos que actualmente enfrenta el país. En la fiscalidad, competitividad, electricidad e institucionalidad se concentran las acciones de política económica prioritarias, de allí que constituyan los ejes integradores del análisis presentado en esta obra. En esencia, se plantea que realizar reformas en estas áreas permitirá al país mantener la estabilidad macroeconómica, acelerar la reducción de la pobreza, profundizar su inserción competitiva al mundo globalizado y mejorar el funcionamiento de sus instituciones