Ralstonia spp.,: TÉCNICAS DE ISOLAMENTO, CULTIVO E INOCULAÇÃO

Presente naturalmente no solo ou algumas bactérias do gênero Ralstonia são causadoras da doença murcha-bacteriana em culturas de importância econômica, em especial as participantes da família das Solanaceae e Musaceae. Esta revisão objetivou abordar de modo preliminar, os métodos de isolamento, cultivo, inoculação e de avaliação, que são mais utilizados para a identificação da murcha-bacteriana em plantas infectadas. O método de isolamento indicado para Ralstonia spp., inicia com a obtenção de uma suspensão bacteriana, a partir da exsudação leitosa de caules contaminados, em água destilada e esterilizada, para posterior semeadura em meio de Kelman, com adição de cloreto de tetrazólio a 28ºC. As técnicas de inoculação devem considerar às relações patógeno-hospedeiro, adaptadas de acordo com o objetivo da pesquisa a ser realizada. Essas técnicas podem variar, destacando-se à via pulverização, via injeção da suspensão bacteriana no organismo vegetal, ou via cortes prévios em mudas e raízes para posterior imersão em suspensão bacteriana. Para avaliar a presença da bactéria em plantas contaminadas, a principal metodologia se baseia no teste de exsudação em gota d’água, onde fragmentos do material contaminado são colocados em gotas de água para observação em microscópio, buscando verificar se há ou não exsudação de pus bacteriano. Contudo, a identificação de plantas infectadas por Ralstonia spp., não pode ser fundamentada em um parâmetro específico, como, por exemplo, a exsudação bacteriana, pois alguns outros patógenos podem fazê-lo. Assim, deve-se analisar outros fatores, antes de ser emitido o diagnóstico definitivo