Upregulation of human autophagy-initiation kinase ULK1 by tumor suppressor p53 contributes to DNA-damage-induced cell death

In yeast, activation of ATG1/ATG13 kinase complex initiates autophagy. This mechanism of autophagy initiation is conserved, as unc-51-like kinase 1 (ULK1) and unc-51-like kinase 2 (ULK2) are two mammalian functional homologues of ATG1 and form similar complex with mammalian ATG13. Here, we report that both ULK1 and ULK2 are transcriptional targets of tumor suppressor p53. In response to DNA damage, ULK1 and ULK2 are upregulated by p53. The upregulation of ULK1 (ULK2)/ATG13 complex by p53 is necessary for the sustained autophagy activity induced by DNA damage. In this context, elevated autophagy contributes to subsequent cell death. These findings suggest that ULK1 and ULK2 may mediate part of tumor suppression activity in mammalian cells and contribute to the efficacy of genotoxic chemotherapeutic drugs

Two Chromatin Remodeling Activities Cooperate during Activation of Hormone Responsive Promoters

Steroid hormones regulate gene expression by interaction of their receptors with hormone responsive elements (HREs) and recruitment of kinases, chromatin remodeling complexes, and coregulators to their target promoters. Here we show that in breast cancer cells the BAF, but not the closely related PBAF complex, is required for progesterone induction of several target genes including MMTV, where it catalyzes localized displacement of histones H2A and H2B and subsequent NF1 binding. PCAF is also needed for induction of progesterone target genes and acetylates histone H3 at K14, an epigenetic mark that interacts with the BAF subunits by anchoring the complex to chromatin. In the absence of PCAF, full loading of target promoters with hormone receptors and BAF is precluded, and induction is compromised. Thus, activation of hormone-responsive promoters requires cooperation of at least two chromatin remodeling activities, BAF and PCAF

Global Mapping of Cell Type–Specific Open Chromatin by FAIRE-seq Reveals the Regulatory Role of the NFI Family in Adipocyte Differentiation

Identification of regulatory elements within the genome is crucial for understanding the mechanisms that govern cell type–specific gene expression. We generated genome-wide maps of open chromatin sites in 3T3-L1 adipocytes (on day 0 and day 8 of differentiation) and NIH-3T3 fibroblasts using formaldehyde-assisted isolation of regulatory elements coupled with high-throughput sequencing (FAIRE-seq). FAIRE peaks at the promoter were associated with active transcription and histone modifications of H3K4me3 and H3K27ac. Non-promoter FAIRE peaks were characterized by H3K4me1+/me3-, the signature of enhancers, and were largely located in distal regions. The non-promoter FAIRE peaks showed dynamic change during differentiation, while the promoter FAIRE peaks were relatively constant. Functionally, the adipocyte- and preadipocyte-specific non-promoter FAIRE peaks were, respectively, associated with genes up-regulated and down-regulated by differentiation. Genes highly up-regulated during differentiation were associated with multiple clustered adipocyte-specific FAIRE peaks. Among the adipocyte-specific FAIRE peaks, 45.3% and 11.7% overlapped binding sites for, respectively, PPARγ and C/EBPα, the master regulators of adipocyte differentiation. Computational motif analyses of the adipocyte-specific FAIRE peaks revealed enrichment of a binding motif for nuclear family I (NFI) transcription factors. Indeed, ChIP assay showed that NFI occupy the adipocyte-specific FAIRE peaks and/or the PPARγ binding sites near PPARγ, C/EBPα, and aP2 genes. Overexpression of NFIA in 3T3-L1 cells resulted in robust induction of these genes and lipid droplet formation without differentiation stimulus. Overexpression of dominant-negative NFIA or siRNA–mediated knockdown of NFIA or NFIB significantly suppressed both induction of genes and lipid accumulation during differentiation, suggesting a physiological function of these factors in the adipogenic program. Together, our study demonstrates the utility of FAIRE-seq in providing a global view of cell type–specific regulatory elements in the genome and in identifying transcriptional regulators of adipocyte differentiation

Low-cycle thermal fatigue of hot-work tool steel H13

W artykule przedstawiono wyniki badań odporności na pękanie stali narzędziowej WCLV w warunkach zmęczenia cieplnego. Przyjęta metodyka pracy łączy badania eksperymentalne oraz symulacje komputerowe. Opisano także wyniki badań jakościowych i ilościowych z przeprowadzonych prób eksperymentalnych w zależności od warunków temperaturowych oraz przedstawiono wyniki spadku twardości warstwy wierzchniej. Otrzymane wyniki badań oraz symulacja komputerowa stanowiska badawczego pozwolą na wyznaczenie charakterystyki zmęczenia cieplnego stali WCLV.This paper presents the results of crack resistance tests carried out on hot-work tool steel H13 in thermal fatigue conditions. The adopted research methodology combines experiments and computer simulations. Also the results of qualitative and quantitative tests for different temperature conditions, showing the cycle temperature to be a factor contributing to a decrease in surface layer hardness, are reported. The experimental results and computer simulations will be used to determine the thermal fatigue characteristic of steel H13

Deformation of Aluminium Bronze by HPT and ECAP Methods

Aluminium bronzes BA1032 having a multiphase microstructure, is low-deformable materials with strength close to that of high-strength steels. The influence of high-pressure torsion (HPT) and equal channel angular pressing (ECAP) on aluminium bronze structure was presented. The HPT method was found to be unsuitable for the processing of the investigated aluminium bronzes. The studies have indicated that it is possible to deform multiphase aluminium bronzes BA1032 in the ECAP process at a temperature of 400-500°C. The deformation of the bronzes at lower temperatures encounters some difficulties cracks appear which make repeated ECAP impossible

Systemy nadzoru i analizy przemysłowych procesów kucia

The work presents the concept of a multifunctional automatized forging station with a supervisory system of the process and the production management, with the option of application mainly at forging shops (with somewhat outdated machines) equipped with older-generation devices and forging units. The concept of such a station, which applies the, already partially, implemented construction and technological solutions, is a result of an extensive analysis of the current needs of forging plants and it has been supported by the acquired knowledge and experience of the authors, who specialize in the construction of measurement systems and other devices for the forging industry. The systems built by the authors makes it possible to measure and archive as well as fully monitor the most important technological parameters of the process, such as: the course of the forging forces in the function of time/shift, correlated with a measurement of the temperature of the preforms and dies as well as the number of the produced forgings. The elaborated systems, owing to their inclusion in the general production management system (which plays a supervisory role over the whole process), also allow for an analysis of the occurring changes during the process, including the proceeding wear of the forging tools as well as an analysis of the parameters determined throughout a long period of time, management of the machines and equipment (the work of the machines, their breakdowns, repairs etc.), and the human resources, as well as adaptation of the production organization to the increasing market demands. The presented concept of a complex approach to the issue of automatization of the forging line is a reply to the constantly developing forging technology, caused by market competitiveness, which requires automatization of the production, with the purpose to produce forgings of a higher quality, and, at the same time, reduce the costs.W pracy przedstawiono koncepcję wielofunkcyjnego, zrobotyzowanego stanowiska kuźniczego wraz z systemem nadzoru procesu i zarządzania produkcją, z możliwością jego aplikacji przede wszystkim dla kuźni (z nie najnowszym parkiem maszynowym) wyposażonych w starsze urządzenia i agregaty kuźnicze. Koncepcja takiego stanowiska, wykorzystująca częściowo wdrożone już autorskie rozwiązania konstrukcyjno-technologiczne, jest wynikiem szerokiej analizy aktualnych potrzeb zakładów kuźniczych oraz poparta została zdobytą wiedzą i doświadczeniem autorów zajmujących się budową systemów pomiarowych i innych urządzeń dla przemysłu kuźniczego. Budowane przez autorów systemy pozwalają na pomiar i archiwizację oraz pełny monitoring najważniejszych parametrów technologicznych procesu, m.in.: przebiegów sił kucia w funkcji czasu/przemieszczenia, skorelowanych z pomiarem temperatury wstępniaków i matryc oraz ilości wyprodukowanych odkuwek. Opracowane systemy, dzięki ich włączeniu w nadrzędny system zarządzania produkcją (pełniący funkcję nadzoru nad całym procesem), pozwalają również na analizę zachodzących zmian podczas procesu, w tym postępującego zużycia narzędzi kuźniczych oraz analizę rejestrowanych parametrów w długim okresie czasu, zarządzania parkiem maszynowym i zasobami sprzętowymi (pracą maszyn, ich awariami, naprawami, itp.), zasobami ludzkimi oraz dostosowaniem organizacji produkcji do rosnących wymagań rynkowych. Przedstawiona przez autorów koncepcja kompleksowego podejścia do zagadnienia robotyzacji linii kuźniczej jest odpowiedzią na nieustanny rozwój technologii kucia, spowodowany konkurencyjnością rynku, wymuszający na kuźniach zautomatyzowanie swojej produkcji, w celu wytwarzania odkuwek o lepszej jakości przy jednoczesnym obniżeniu jej kosztów

Modelowanie numeryczne zmęczenia cieplnego stali WCLV stosowanej na matryce w procesie kucia na gorąco

The paper presents an analysis of a numerical simulation of the low-cycle thermal fatigue of steel WCLV (X40CrMoV511) used in hot forging. As part of experimental studies a special test rig based on the rotating disc method was built and tests were carried out. Their results showed that the method can be used to reproduce the thermal fatigue conditions prevailing in the industrial forging process. For the given experimental conditions the instant when fatigue cracks appear was determined. A numerical model was built and the obtained finite element analysis results were compared with the laboratory test results in order to determine the amplitude of plastic strains at which a crack appears. As part of further research in the future the Coffin-Manson low-cycle fatigue model will be verified for other conditions and a low-cycle fatigue curve for steel WCLV will be determined.W pracy przedstawiono analizę symulacji numerycznej niskocyklowego zmęczenia cieplnego stali WCLV stosowanej podczas kucia na gorąco. W ramach badań doświadczalnych zostało zbudowane specjalne stanowisko bazujące na metodzie "wirującego krążka" [13], przeprowadzone zostały próby, które potwierdziły możliwość stosowania tej metody do odwzorowania warunków zmęczenia cieplnego panujących w przemysłowym procesie kucia. Dla danych warunków eksperymentu określono moment pojawienia się pęknięć zmęczeniowych. Następnie zbudowano model numeryczny, po czym porównano uzyskane wyniki z MES i prób laboratoryjnych w celu określenia amplitudy odkształceń plastycznych, przy których pojawia się pęknięcie. Dalsze prace pozwolą w przyszłości na weryfikację niskocyklowego modelu zmęczenia Coffina-Mansona dla innych warunków oraz pozwolą stworzyć krzywą niskocyklowego zmęczenia stali WClV