共焦点レーザー顕微鏡(CLSM)を用いた下垂体腺腫の免疫組織化学的検討

下垂体腺腫のうち成長ホルモンとプロラクチン産生腫瘍は一般的にはpure growth hormone secreting adenoma(PGA), pure prolactin secreting adenoma(PPA)とmixed growth hormoneprolactin secreting adenoma(MGPA)に分類されている.更に詳細に分類するとMGPAはacidophil stem cell adenoma(ASCA), mammosomatotroph adenoma(MSA),およびmixed somatotroph-lactotroph adenoma(MSLA)に分けられている。ASCAとMSAは両ホルモンを持っている細胞からなる腫瘍で,MSLAは両ホルモンをそれぞれ別々の細胞が産生している腫瘍といわれている.今回30例の下垂体腺腫の手術例についてこのような詳細な検討をするため,両ホルモンの細胞内分布について二重標識蛍光抗体法を行い共焦点レーザー顕微鏡(CLSM)で観察し検討した.プロラクチン産生腫瘍とされた10例ではPPAが8例,MSLAが2例であった.成長ホルモン産生腫瘍の10例ではMSLAは3例,MSAは4例,PGAが3例であった.非機能性腫瘍の10例では両ホルモンとも認められぬもの5例,PGAが2例,PPA,MSA,MSLAが1例ずつであった.これらの結果よりプロラクチン産生腫瘍ではPPAが多いが,成長ホルモン産生腫瘍ではMGPAが多く,そのうちでもMSAが大部分を占めていることがわかった.CLSMによる下垂体腺腫の観察の報告は今までなく,分泌穎粒の細胞内分布などもよく見え,二重染色による観察も簡便であり,下垂体腺腫の詳細な分類に役立つことがわかった.We retrospectively studied 30 pituitary adenomas to determine the intracellular distributions of prolactin (PRL) and growth hormone (GH) on the same section by double immunofluorescence staining and subsequent observation by confocal laser scanning microscopy (CLSM). The clinical presentations of these tumors were hyperprolactinemia (10 cases), acromegaly (10 cases), and nonfunctioning (10 cases). Of the 10 cases of hyperprolactinemia, 8 were pure PRL- secreting adenomas and 2 were mixed somatotroph-lactotroph adenomas (MSLA). Of the 10 cases of acromegaly, 3 were MSLA, 4 were mammosomatotroph adenomas (MSA), and 3 were pure GH-secreting adenomas. Among the 10 nonfunctioning tumors, there were 2 pure GH-secreting adenomas, one pure PRL-secreting adenoma, one MSA, one MSLA, and 5 negative cases for both PRL and GH. We conclude that pituitary adenomas with clinical hyperprolactinemia are mostly pure PRL-secreting adenomas, whereas those with acromegaly are mostly mixed PRL-GH-secreting adenoma. In addition, pituitary adenomas without clinical endo-crinopathy have diverse hormonal expressions. The method we used in this study by CLSM is technically easy and thus can be performed on a routine basis for more definite classifications of pituitary adenomas

共焦点レーザー顕微鏡(CLSM)を用いた下垂体腺腫の免疫組織化学的検討

下垂体腺腫のうち成長ホルモンとプロラクチン産生腫瘍は一般的にはpure growth hormone secreting adenoma(PGA), pure prolactin secreting adenoma(PPA)とmixed growth hormoneprolactin secreting adenoma(MGPA)に分類されている.更に詳細に分類するとMGPAはacidophil stem cell adenoma(ASCA), mammosomatotroph adenoma(MSA),およびmixed somatotroph-lactotroph adenoma(MSLA)に分けられている。ASCAとMSAは両ホルモンを持っている細胞からなる腫瘍で,MSLAは両ホルモンをそれぞれ別々の細胞が産生している腫瘍といわれている.今回30例の下垂体腺腫の手術例についてこのような詳細な検討をするため,両ホルモンの細胞内分布について二重標識蛍光抗体法を行い共焦点レーザー顕微鏡(CLSM)で観察し検討した.プロラクチン産生腫瘍とされた10例ではPPAが8例,MSLAが2例であった.成長ホルモン産生腫瘍の10例ではMSLAは3例,MSAは4例,PGAが3例であった.非機能性腫瘍の10例では両ホルモンとも認められぬもの5例,PGAが2例,PPA,MSA,MSLAが1例ずつであった.これらの結果よりプロラクチン産生腫瘍ではPPAが多いが,成長ホルモン産生腫瘍ではMGPAが多く,そのうちでもMSAが大部分を占めていることがわかった.CLSMによる下垂体腺腫の観察の報告は今までなく,分泌穎粒の細胞内分布などもよく見え,二重染色による観察も簡便であり,下垂体腺腫の詳細な分類に役立つことがわかった.We retrospectively studied 30 pituitary adenomas to determine the intracellular distributions of prolactin (PRL) and growth hormone (GH) on the same section by double immunofluorescence staining and subsequent observation by confocal laser scanning microscopy (CLSM). The clinical presentations of these tumors were hyperprolactinemia (10 cases), acromegaly (10 cases), and nonfunctioning (10 cases). Of the 10 cases of hyperprolactinemia, 8 were pure PRL- secreting adenomas and 2 were mixed somatotroph-lactotroph adenomas (MSLA). Of the 10 cases of acromegaly, 3 were MSLA, 4 were mammosomatotroph adenomas (MSA), and 3 were pure GH-secreting adenomas. Among the 10 nonfunctioning tumors, there were 2 pure GH-secreting adenomas, one pure PRL-secreting adenoma, one MSA, one MSLA, and 5 negative cases for both PRL and GH. We conclude that pituitary adenomas with clinical hyperprolactinemia are mostly pure PRL-secreting adenomas, whereas those with acromegaly are mostly mixed PRL-GH-secreting adenoma. In addition, pituitary adenomas without clinical endo-crinopathy have diverse hormonal expressions. The method we used in this study by CLSM is technically easy and thus can be performed on a routine basis for more definite classifications of pituitary adenomas

成人低悪性度星細胞腫の再発・悪性転化の予測に関する組織学的研究 : 再発時にMIB-1とp53遺伝子産物発現について

悪性度の低い星細胞腫が,悪性に転化して,きわめて不良な予後を示すことがあることは臨床的にしばしば経験することである.初回手術時に低悪性度の星細胞腫と判断された腫瘍が悪性化するか否かを予測することは臨床上きわめて重要である.本研究では,この予測を可能にすることができるか否かを明らかにするために,再発なしに良好な経過をたどっている症例と悪性転化して再発した症例について,初回手術,ならびに再発時に得られた腫瘍標本について病理組織学的検討を行った.WHO分類で診断が確定したastrocytoma grade II (low grade astrocytoma)30例のうち,再発20例,非再発10例を検討した.再発例と非再発例の低悪性度星細胞腫(low grade astrocytoma)の手術時に得られた組織を用い,HE染色,MIB-1とp53免疫染色を行った.初発時(手術),再発時(再発手術の行われた例のみ),再再発時の手術で摘出した腫瘍組織切片について,それぞれの組織切片で細胞密度の高い部位5カ所を選んで検鏡し,1mm^2あたりのHE染色による腫瘍細胞数NTC(numbers of tumor cells),およびMIB-1とp53の免疫染色陽性細胞指数SI(staining index)を測定した.HE染色のNTC,MIB-1とp53のSIおよび悪性度G(grade),再発までに要した時聞t(recurrence time)の相互の関連性について検討した.初発時および再発時のHE染色による細胞数と腫瘍の悪性度,再発までの時間には有意差は認められなかった.再発例(π=20)ではMIB-1のSIと再発について分析するとMIB-1 SIの高いほど悪性化して再発しやすく(SI 5.75～21.56%),p53 SIの低いほど再発しやすい(SI 6.20～44.53%).非再発例(π=10)ではMIB-1のSIが似値で(SI 0.98 ± 0.90%,p<0.05),p53のSIが高値であった(SI 28.47 ± 7.14%,p<0.05).腫瘍の悪性化,再発を予知する指標としては,細胞密度,MIB-1およびp53のSI値が重要な指数と考えられた.腫瘍再発を予知するためには,増殖と抑制双方の因子のバランスを検討することが必要である.Low grade astrocytomas generally have a good prognosis and the patients can survive a long time without recurrence. It is, however, well known that some low grade astrocytomas can show malignant transformation and they recur in a rather short period. These tumors demonstrate the characteristics of anaplastic astrocytoma or glioblastoma at the time of recurrence. As it is important to predict whether malignant transformation or recurrence will occur after the first operation, we have studied the histopathological characteristics of nonrecurrent and recurrent adult low grade astrocytomas. The population density of hematoxylin-eosin stained tumor cells and MIB-1 and the p53 immuno-stained index (SI) of parafin embedded surgical samples taken from 20 recurrent and 10 non-recurrent cases of low grade astrocytoma (grade II) were histopathologically studied. The numbers of stained tumor cells per 1 mm^2 (SI) were counted from the average population density per 1 mm^2 in 5 quadratic grids of the microscopic field. Formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections were immunohistochemically stained for MIB-1 and p53. No correlation was noted between the age of the patients, the recurrence and the recurrence time. Male patients seemed to be more susceptible to recurrence than females. In the majority of recurrent cases, the SI of MIB-1 was higher and the SI of p53 was lower than that observed in the non-recurrent cases at the time of the initial operation. As a statistically significant difference in the SI of MIB-1 and SI of p53 was found between the non-recurrent and recurrent astrocytomas at the time of the first operation, such analysis might be valuable for prediction of the recurrence of low grade astrocytoma

成人低悪性度星細胞腫の再発・悪性転化の予測に関する組織学的研究 : 再発時にMIB-1とp53遺伝子産物発現について

悪性度の低い星細胞腫が,悪性に転化して,きわめて不良な予後を示すことがあることは臨床的にしばしば経験することである.初回手術時に低悪性度の星細胞腫と判断された腫瘍が悪性化するか否かを予測することは臨床上きわめて重要である.本研究では,この予測を可能にすることができるか否かを明らかにするために,再発なしに良好な経過をたどっている症例と悪性転化して再発した症例について,初回手術,ならびに再発時に得られた腫瘍標本について病理組織学的検討を行った.WHO分類で診断が確定したastrocytoma grade II (low grade astrocytoma)30例のうち,再発20例,非再発10例を検討した.再発例と非再発例の低悪性度星細胞腫(low grade astrocytoma)の手術時に得られた組織を用い,HE染色,MIB-1とp53免疫染色を行った.初発時(手術),再発時(再発手術の行われた例のみ),再再発時の手術で摘出した腫瘍組織切片について,それぞれの組織切片で細胞密度の高い部位5カ所を選んで検鏡し,1mm^2あたりのHE染色による腫瘍細胞数NTC(numbers of tumor cells),およびMIB-1とp53の免疫染色陽性細胞指数SI(staining index)を測定した.HE染色のNTC,MIB-1とp53のSIおよび悪性度G(grade),再発までに要した時聞t(recurrence time)の相互の関連性について検討した.初発時および再発時のHE染色による細胞数と腫瘍の悪性度,再発までの時間には有意差は認められなかった.再発例(π=20)ではMIB-1のSIと再発について分析するとMIB-1 SIの高いほど悪性化して再発しやすく(SI 5.75～21.56%),p53 SIの低いほど再発しやすい(SI 6.20～44.53%).非再発例(π=10)ではMIB-1のSIが似値で(SI 0.98 ± 0.90%,p<0.05),p53のSIが高値であった(SI 28.47 ± 7.14%,p<0.05).腫瘍の悪性化,再発を予知する指標としては,細胞密度,MIB-1およびp53のSI値が重要な指数と考えられた.腫瘍再発を予知するためには,増殖と抑制双方の因子のバランスを検討することが必要である.Low grade astrocytomas generally have a good prognosis and the patients can survive a long time without recurrence. It is, however, well known that some low grade astrocytomas can show malignant transformation and they recur in a rather short period. These tumors demonstrate the characteristics of anaplastic astrocytoma or glioblastoma at the time of recurrence. As it is important to predict whether malignant transformation or recurrence will occur after the first operation, we have studied the histopathological characteristics of nonrecurrent and recurrent adult low grade astrocytomas. The population density of hematoxylin-eosin stained tumor cells and MIB-1 and the p53 immuno-stained index (SI) of parafin embedded surgical samples taken from 20 recurrent and 10 non-recurrent cases of low grade astrocytoma (grade II) were histopathologically studied. The numbers of stained tumor cells per 1 mm^2 (SI) were counted from the average population density per 1 mm^2 in 5 quadratic grids of the microscopic field. Formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections were immunohistochemically stained for MIB-1 and p53. No correlation was noted between the age of the patients, the recurrence and the recurrence time. Male patients seemed to be more susceptible to recurrence than females. In the majority of recurrent cases, the SI of MIB-1 was higher and the SI of p53 was lower than that observed in the non-recurrent cases at the time of the initial operation. As a statistically significant difference in the SI of MIB-1 and SI of p53 was found between the non-recurrent and recurrent astrocytomas at the time of the first operation, such analysis might be valuable for prediction of the recurrence of low grade astrocytoma