Investigating the stability of the Properties of Vibrio cholerae strains – Producers of Active Components of the Chemical Cholera Vaccine

One of the key requirements to producer strains used in the manufacturing of immunobiological preparations is their stability, which consists in maintaining the main cultural, morphological, physiological, and productive properties in a series of generations. This paper describes a comprehensive methodological approach to testing strain stability using in vitro techniques.The purpose of this study was to conduct an integrated analysis of the stability in the strains that produce active components of the chemical cholera vaccine when preparing seed material and at the stage of cultivation.Materials and methods. Toxigenic strains of Vibrio сholerae 569B of the classical biovar, serovar Inaba and V. сholerae M-41 of the classical biovar, serovar Ogawa were used in the work. Cell morphology was monitored through light and transmission electron microscopy. Atomic force microscopy was applied to measure the main parameters of the bacterial cell. The strains were tested for the presence of ctxA gene in the chromosome using the “GenChol” test system with electrophoretic registration of results. Whole genome sequencing of the strains was performed on the Ion Torrent PGM platform using the Ion 318 Chip Kit and the Ion PGM Hi-Q View Chef 400 Kit. To determine the specific activity of cholera toxin and O-antigen, a DOT immunoassay with a conjugate based on staphylococcal protein A and colloidal gold nanoparticles was applied.Results and discussion. The stability of the main properties of industrial V. сholerae strains – producers of the active components of the chemical cholera vaccine has been confirmed using microbiological, immunochemical, molecular-genetic methods and microscopic analysis at all stages of cultivation, and the prospects for using the integrated methodological approach experimentally substantiated. Tailoring of these methods will make it possible to control the stability of producer strains, optimize cultivation conditions and, as a result, increase the yield of the necessary antigenic component of the vaccine

ИНВАЗИВНЫЙ МОНИТОРИНГ СЕРДЕЧНОГО ВЫБРОСА ПО ВРЕМЕНИ ТРАНЗИТА ПУЛЬСОВОЙ ВОЛНЫ ПОСЛЕ АОРТОКОРОНАРНОГО ШУНТИРОВАНИЯ НА РАБОТАЮЩЕМ СЕРДЦЕ

Goal of the study: to evaluate the accuracy of invasive measurement of cardiac output (CO) by pulse wave transit time (PWTT) (esCCO, Japan) compared to transpulmonary thermodilution (TPTD) (PiCCO2 , Germany) after aortocoronary bypass (ACB) without cardiopulmonary bypass (ACB without CPB). Methods. 21 patients with ACB without CPB were enrolled into the study. During early post-operative period CO was simultaneously registered at eight stages basing on PWTT (COPWTT) and TPTD (COTPTD). Statistic analysis included evaluation of congruence of CO absolute values and capability to follow-up changes in CO. Results. In accordance with Bland-Altman analysis the average difference between two methods made 0.3 l/min. with consistency limits of ± 2.1 l/min. and percent error of 40%. Polar chart analysis showed the angular difference of 2.6°, radial consistency limits ± 53.3° and polar concordance of 69%. Conclusion: Lower repeatability of CO measurement by PWTT and insufficient capability to follow the changes in CO after ACB without CPB don not allow recommending this method in its invasive variant for routine practice as an alternative to thermodilution methods.  Цель исследования: оценка точности инвазивного измерения сердечного выброса (СВ) по времени транзита пульсовой волны (ВТПВ) (esCCO, Япония) в сравнении с методом транспульмональной термодилюции (ТПТД) (PiCCO2 , Германия) после аортокоронарного шунтирования (АКШ) без искусственного кровообращения (АКШ без ИК). Методы. В исследование включен 21 пациент после АКШ без ИК. В раннем послеоперационном периоде на восьми этапах выполняли параллельную регистрацию СВ, определенного на основе оценки ВТПВ (СВВТПВ) и ТПТД (СВТПТД). Статистический анализ включал оценку согласованности абсолютных значений СВ и способности отслеживать динамику СВ. Результаты. Согласно анализу Бланда – Альтмана, средняя разница между методами составила 0,3 л/мин с границами согласованности ± 2,1 л/мин и процентной ошибкой 40%. Анализ полярной диаграммы показал угловую разницу 2,6°, радиальные границы согласованности ± 53,3° и полярную конкордантность 69%. Вывод. Низкая воспроизводимость измерения СВ на основе оценки ВТПВ и недостаточная способность отслеживать динамику СВ после АКШ без ИК не позволяют рекомендовать рутинное использование данного метода в его инвазивном варианте в качестве альтернативы термодилюционным методикам.

Экспериментальные способы изучения нейрофизиологических особенностей киберспортсменов (обзор)

Электронные виды спорта, имеющие соревновательный характер, объединены в направление, называемое киберспортом. Соревновательная деятельность в киберспорте способствует формированию когнитивных навыков, развитию абстрактного мышления, памяти, пространственного мышления и способности ориентироваться в условиях дефицита времени в виртуальном пространстве. В связи с этим перспективным является изучение нейрофизиологических механизмов, обеспечивающих реализацию и регуляцию физиологических процессов в ходе занятий электронными видами спорта. Согласно классификации Л.П. Матвеева (2017), киберспорт относится к пятой группе видов спортивной деятельности, которая характеризуется абстрактно-логическим обыгрыванием при сниженной двигательной активности. Компьютерные игры стимулируют развитие когнитивных функций, таких как время реакции, скорость принятия решений, внимание, координация рук и др., что невольно наводит исследователей на мысль о сходстве психоэмоциональных и психофизиологических параметров киберспортсменов и спортсменов, занимающихся другими видами спорта. Однако следует отметить, что нейрофизиологические механизмы этих процессов у киберспортсменов практически не исследовались. Поскольку основой данных механизмов является деятельность центральной нервной системы, представляется интересным рассмотреть особенности биоэлектрической активности больших полушарий мозга киберспортсменов во взаимосвязи с особенностями их когнитивного стиля. Представленная обзорная статья составлялась при использовании электронных библиотек PubMed, Scopus, Google Scholar и ряда отечественных научных баз данных путем введения следующих поисковых запросов: «видеоигры», «игровая зависимость», «киберспорт», «когнитивные функции», «нейрофизиологические особенности киберспортсменов», «методы нейрофизиологического исследования в киберспорте», «неинвазивные методы исследования». На основе проведенного анализа литературных источников были выделены методы, позволяющие оценить функциональное состояние головного мозга в процессе обработки сенсорных сигналов, физиологические изменения функционирования высшей нервной деятельности, установить пиковую амплитуду мышечного усилия посредством интеграции сигнала. Перечислены методы, которые демонстрируют спорные результаты, поскольку не дают возможности установить механизмы функционирования нервной системы. Также отмечены перспективные методы, позволяющие считывать активность мозга путем применения инфракрасного света

Application of Zymographic and Proteomic Analysis for Identification of Intracellular and Extracellular Proteases of <em>Vibrio cholerae</em> Production Strains

The aim of this work was to study the composition and functions of intracellular and extracellular proteases of the production Vibrio cholerae strains 569B serovar Inaba and M41 serovar Ogawa using zymographic and proteomic analysis.Materials and methods. Samples of intracellular proteases were obtained from cell lysates by ultrasonication of bacterial cells in a 9 M urea solution. The extracellular protease fraction was precipitated from the culture liquid by adding 50 % trichloroacetic acid to a final concentration of 10 % and incubating on ice. Lyophilized preparations of proteinase K and proteovibrin enzyme complex were used as a control of proteolytic activity. Proteases were detected by substrate gel electrophoresis in 12.5 % polyacrylamide gel impregnated with 0.1 % gelatin, followed by identification of the composition of protein fractions of lysates and exoproteins of both strains using molecular mass spectrometric scanning.Results and discussion. A comparative study of the production strains of V. cholerae 569B serovar Inaba and M41 serovar Ogawa using zymographic and proteomic analysis showed that the greatest enzymatic activity was detected in the fraction of extracellular proteases sample of V. cholerae M41 strain, where five major and four minor zones of gelatin hydrolysis were identified, and high-intensity zones with MW 20–23 and 37–40 kDa were also found in the preparation of proteovibrin isolated from the culture fluid of that strain. As a result of proteomic analysis of the studied strains, 66 enzymes of V. cholerae with different functional activity were reliably identified, among which 15 enzymes had protease activity. The high information content of the complex of modern methods provided for the possibility of identifying qualitative and quantitative differences in the composition of intracellular and extracellular proteases in production strains of V. cholerae, which offers an effective means of screening inter-strain differences in the protease spectrum in production strains

EFFICIENCY OF PREVENTION AND MANAGEMENT OF VITAMIN D DEFICIENCY IN YOUNG CHILDREN IN RUSSIA DEPENDING ON THE REGION OF RESIDENCE (BASED ON THE RESULTS OF RODNICHOK-2 STUDY)

Medical examination of 360 children from four regions of Russia (Moscow, Astrakhan, Stavropol, Kazan) showed significant regional differences in the sufficiency and compensation of vitamin D deficiency at the baseline (Day 0) and established factors associated with vitamin D sufficiency on Day 0. The established interregional differences in vitamin D levels were not due to insolation, but primarily to adequate vitamin D supplementation received at the baseline. Vitamin D supplementation (an average of 894 ± 632.6 IU/day) significantly reduced the risk of vitamin D deficiency (RR 0.15, 95% CI 0.09–0.26, P = 5.7 x 10–14). The study included the analysis of factors associated with the increase in 25(OH)D levels during the administration of Aquadetrim, identification of predictors of patient’s response and the analysis of identified predictors. The most important factor determining the patient’s response was the dose of vitamin D taken by the patient: 25(OH)D levels increased by 1 ng/ml with an increase in the dose of vitamin D by 90 IU per day. As can be seen from the above, the study results indicate that the vitamin D deficiency requires a long-term preventive therapy (for at least several months) with adequate doses of vitamin D (1000–2000 IU/day)