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Produção de anticorpos monoclonais anti-cisticercos de Taenia crassiceps com reatividade cruzada com antígenos de Taenia solium
We describe the production of the potential monoclonal antibodies (MoAbs) using BALB/c mice immunized with vesicular fluid (VF)-Tcra (T. crassiceps) antigen. Immune sera presented anti-VF-Tcra (É descrita a produção de potenciais anticorpos monoclonais (MoAbs) usando camundongos BALB/c imunizados com antígenos de líquido vesicular de T. crassiceps (VF-Tcra). O soro imune apresentou anticorpos IgM e IgG anti-VF-Tcra para os peptídeo
Sorodiagnóstico da neurocisticercose em pacientes com crises epiléticas, por meio de ELISA e immunoblot
Sera from 88 patients from Santa Catarina and São Paulo states of Brazil, with epileptic seizures who underwent cerebral computed tomography (CT) were analyzed for the detection of antibodies to T. solium cysticercus by ELISA and Immunoblot (IB) with the following antigens: Taenia solium cysticercus total saline (Tso), Taenia crassiceps cysticercus vesicular fluid (Tcra-vf) and T. crassiceps cysticercus glycoproteins (Tcra-gp). ELISA carried out with Tso, Tcra-vf and Tcra-gp antigens showed 95%, 90% and 80% sensitivities, respectively, and 68%, 85% and 93% specificities, respectively. In the epileptic patients group, ELISA positivity was 30%, 51% and 35% with Tso, Tcra-vf and Tcra-gp antigens respectively. Considering the IB as the confirmatory test, the positivity was 16% (14/88) in the epileptic patients total group and 22% (12/54) in the epileptic patients with positive CT and signals of cysticercosis. We found a significant statistical correlation among ELISA or IB results and the phase of the disease when any antigens were used (p < 0.05). We emphasize the need to introduce in the laboratory routine the search for neurocysticercosis (NC) in patients presenting with epileptic seizures because of the high risk of acquiring NC in our region and its potential cause of epilepsy.Amostras de soro de 88 pacientes dos Estados de Santa Catarina e São Paulo, Brasil, com crises epilépticas e que se submeteram a exame de Tomografia Computadorizada (TC), foram examinadas para detecção de anticorpos anti-cisticercos de Taenia solium por meio de ELISA e Immunoblot (IB) utilizando-se os seguintes antígenos: extrato salino total de cisticercos de T. solium (Tso); líquido vesicular de Taenia crassiceps (Tcra-vf) e glicoproteínas purificadas de cisticercos de T. crassiceps (Tcra-gp). Os resultados de ELISA com os antígenos Tso, Tcra-vf e Tcra-gp mostraram 95%, 90% e 80% de sensibilidade, respectivamente, e 68%, 85% e 93% de especificidade, respectivamente. No grupo de pacientes epilépticos, a positividade do ELISA foi 30%, 51% e 35% com os antígenos Tso, Tcra-vf e Tcra-gp, respectivamente. Considerando o IB como teste confirmatório, a positividade foi de 16% (14/88) no grupo total de pacientes epilépticos e 22% (12/54) no grupo de pacientes epilépticos com TC positiva e sinais clínicos compatíveis com neurocisticercose. Foi encontrada correlação estatística significativa entre os resultados de ELISA ou IB e a fase da doença com quaisquer dos antígenos utilizados (p < 0,05). Os resultados indicam a necessidade de introduzir na rotina dos laboratórios o diagnóstico de neurocisticercose nos pacientes com convulsões epilépticas devido ao elevado risco de aquisição da cisticercose em nossa região e sua participação na etiologia da epilepsia
Passive haemagglutination test for human neurocysticercosis immunodiagnosis: II - Comparison of two standardized procedures for the passive haemagglutination reagent in the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluids
A comparison of two different standardized reagent procedures for the passive haemagglutination test (PHA) in the detection of specific antibody to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF) was carried out. The formaldehyde-treated group O Rh-human red blood cells (HuRBC) and glutaraldehyde-treated sheep red blood cells (SRBC) were the supplies for the reagents preparation and, in the tests, they were designated as PHA-1 and PHA-2, respectively. For both reagents the cells were coated with the cysticerci total saline extract (TS) antigen. PHA-1 and PHA-2 were assessed in a total of 204 CSF from patients with neurocysticercosis, from non-related infections and from healthy individuals. The positivity and specificity indices obtained were respectively 81.7% and 94.4% for PHA-1 and for PHA-2, 88.7% and 96.6%. Since no significant differences were observed between the results provided by two reagents, at level of significance of 0.05, either processes of cell sensitization can alternatively be used according to the own laboratory convenience
Imunodiagnóstico da neurocisticercose: teste imunoenzimático com antígenos quimicamente ligados a suportes para pesquisa de anticorpos em soro e líquido cefalorraquiano
Foi padronizado o teste imunoenzimático, ELISA, utilizando-se componentes antigênicos de Cysticercus cellulosae quimicamente ligados a suportes sólidos constituídos de discos de tecido-resina (ELISA-d), para pesquisa de anticorpos em soro líquido cefalorraquiano (LCR), ensaiando-se uma única diluição do espécime clínico. O suporte tecido-resina foi composto de tecido de poliéster impregnado com resina polimerizada de N-metilol-acrilamida, apresentando grupos N-metilol livres, capazes de reagir covalentemente com grupos funcionais de proteínas e polissacarídeos presentes no extrato antigênico salino total obtido de cisticercos. Foram ensaiados 38 soros e 74 LCR de pacientes com neurocisticercose comprovada e 50 soros e 107 LCR do grupo controle (pacientes com quadros clínicos neurológicos diversos e indivíduos supostamente normais). Obtivemos os seguintes índices de sensibilidade e especificidade: 94,7% e 92,0% para o teste realizado no soro e 98,6% e 100% para o teste realizado no LCR. O teste ELISA-d mostrou-se eficiente para o diagnóstico da neurocisticercose, principalmente quando realizado no LCR, com vantagens de estabilidade, facilidade de execução e baixo custo