Immunosuppressive activity of tumor-infiltrating myeloid cells in patients with meningioma

Meningiomas WHO grade I and II are common intracranial tumors in adults that normally display a benign outcome, but are characterized by a great clinical heterogeneity and frequent recurrence of the disease. Although the presence of an immune cell infiltrate has been documented in these tumors, a clear phenotypical and functional characterization of the immune web is missing. Here, we performed an extensive immunophenotyping of peripheral blood and fresh tumor tissue at surgery by multiparametric flow cytometry in 34 meningioma patients, along with immunosuppressive activity of sorted cells of myeloid origin. Four subsets of myeloid cells, phenotypically corresponding to myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) are detectable in the blood and in the tumor tissue of patients and three of them are significantly expanded in the blood of patients, but show no evidence of suppressive activity. At the tumor site, a large leukocyte infiltrate is present, predominantly constituted by CD33 myeloid cells, largely composed of macrophages endowed with suppressive activity and significantly expanded in grade II meningioma patients as compared to grade I

The immunological landscape of primary brain tumors: a comparative study of the immunosuppressive myeloid cell populations in benign and malignant tumors.

The immune system plays a dual role in cancer progression, either preventing or promoting tumor progression and the fine regulation of the complex interaction between immune system and tumor determines patient outcome. It has been demonstrated that also in brain tumors a combination of signals and soluble factors secreted by tumor, immune and stromal cells are able to potentiate tumor progression. Therefore, the interest towards the characterization of tumor microenvironment in these tumors is growing and the presence of tumor infiltrating immune cells of myeloid origin has already been reported, but a clear phenotypic and functional characterization in human brain tumors still lacking. For this reason, in this research project we performed a deep analysis of both circulating and tumor-infiltrating leukocytes present in meningioma (MNG) and glioblastoma (GBM) patients in order to dissect their properties, with the ultimate goal of finding new immunological therapeutic strategies. We thus performed an extensive immunophenotyping of peripheral blood and fresh tumor tissue at surgery by multiparametric flow cytometry in 34 patients affected by MNG (WHO grade I-II) and in 76 patients affected by GBM (WHO grade IV glioma), along with immunosuppressive activity of sorted cells of myeloid origin. In the peripheral blood, we observed a number of significant alterations in myeloid cell subsets indicating a specific monocyte subsets as the main cell subset actively recruited to the tumor. Moreover, four subsets of myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) are detectable in the blood and in the tumor tissue of patients affected by MNG and GBM. Three of these subsets are significantly expanded in the blood of patients, whereas two of them are significantly expanded in the tumor tissue. In addition, we assayed ARG-1 (arginase 1) levels and activity in plasma samples from patients affected by MNG and GBM, and observed both a significantly increased level and a boost of its functional activity, compared to the control group. At the tumor site, we observed a large leukocyte infiltrate, predominantly constituted by CD33+ myeloid cells, largely composed of macrophages endowed with suppressive activity and significantly expanded in both types of tumor. Based on the expression of different markers, in GBM patients, we were able to discriminate bone marrow-derived (BMDM) macrophages from resident microglia (MG). These populations showed a different suppressive activity, since BMDMs displayed a higher immunosuppressive activity compared to MG cells that showed low or no suppressive immune regulatory ability. Taken together the results of this study shed light on the complex interaction between immune system and the main tumors of the brain.Il sistema immunitario svolge un duplice ruolo nella progressione del cancro, è in grado sia di prevenire che di promuovere la progressione tumorale e la regolazione della complessa interazione tra sistema immunitario ed il tumore è in grado di determinare la prognosi del paziente. Inoltre, è stato dimostrato che, anche nei tumori cerebrali, una combinazione di segnali e di fattori solubili secreti dal tumore, dalle cellule immunitarie e dalle cellule stromali, è in grado di potenziare la progressione tumorale. Pertanto, in questi tumori sta crescendo l'interesse verso la caratterizzazione del microambiente tumorale ed è già stata dimostrata la presenza di cellule immunitarie di origine mieloide infiltranti il tumore, ma una chiara caratterizzazione fenotipica e funzionale di queste popolazioni non è ancora stata documentata. Pertanto, in questo progetto di ricerca abbiamo eseguito un'analisi approfondita sia dei leucociti circolanti che dei leucociti infiltranti il tumore nei pazienti affetti da meningioma (MNG) e glioblastoma (GBM), al fine di studiarne le caratteristiche, con l'obiettivo finale di trovare nuove strategie terapeutiche. Abbiamo pertanto eseguito un’accurata immunofenotipizzazione del sangue periferico e del tessuto tumorale, analizzato subito dopo la resezione chirurgica, mediante citofluorimetria a flusso multi-parametrica in 34 pazienti con MNG (grado I-II OMS) e in 76 pazienti con GBM (glioma di grado IV OMS). Abbiamo inoltre testato l’attività immunosoppressiva delle popolazioni di origine mieloide isolate da biopsia. Nel sangue periferico abbiamo osservato delle alterazioni significative nelle sottopopolazioni di cellule di origine mieloide, rivelando che un particolare sottogruppo di monociti viene attivamente reclutato al sito tumorale. Inoltre, quattro sottopopolazioni di cellule soppressorie di derivazione mieloide (MDSC) sono rilevabili nel sangue e nel tessuto tumorale dei pazienti affetti da MNG e GBM. Tre di queste popolazioni sono significativamente espanse nel sangue dei pazienti, mentre due di esse sono significativamente espanse nel tessuto tumorale. In questo studio, abbiamo analizzato anche i livelli plasmatici di arginasi 1 (ARG-1) e la sua attività funzionale in campioni di plasma di pazienti con MNG o GBM ed abbiamo osservato sia un aumento significativo della sua concentrazione plasmatica che della sua attività funzionale, rispetto al gruppo di controllo. Analizzando il tessuto tumorale, abbiamo osservato la presenza di un importante infiltrato leucocitario, costituito prevalentemente da cellule mieloidi CD33+ ed in particolare da macrofagi dotati di attività soppressiva e la cui percentuale è notevolmente elevata in entrambi i tipi di tumore. Nei pazienti con GBM, sulla base dell'espressione di diversi marcatori, abbiamo potuto discriminare i macrofagi derivati dal midollo osseo (BMDM) dalla microglia (MG). Queste popolazioni macrofagiche hanno dimostrato avere una diversa attività soppressoria, infatti, i BMDM risultano essere più immunosoppressivi rispetto alla MG che invece ha una bassa o irrilevante capacità soppressoria. I risultati di questo studio sottolineano quindi l’esistenza di una complessa interazione tra sistema immunitario ed i principali tumori cerebrali

Immunosuppressive activity of tumor-infiltrating myeloid cells in patients with meningioma

Meningiomas WHO grade I and II are common intracranial tumors in adults that normally display a benign outcome, but are characterized by a great clinical heterogeneity and frequent recurrence of the disease. Although the presence of an immune cell infiltrate has been documented in these tumors, a clear phenotypical and functional characterization of the immune web is missing. Here, we performed an extensive immunophenotyping of peripheral blood and fresh tumor tissue at surgery by multiparametric flow cytometry in 34 meningioma patients, along with immunosuppressive activity of sorted cells of myeloid origin. Four subsets of myeloid cells, phenotypically corresponding to myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) are detectable in the blood and in the tumor tissue of patients and three of them are significantly expanded in the blood of patients, but show no evidence of suppressive activity. At the tumor site, a large leukocyte infiltrate is present, predominantly constituted by CD33+ myeloid cells, largely composed of macrophages endowed with suppressive activity and significantly expanded in grade II meningioma patients as compared to grade I

Albumin and fibrinogen synthesis and insulin effect in type 2 diabetic patients with normoalbuminuria

OBJECTIVE - Insulin stimulates albumin synthesis but inhibits that of fibrinogen in both type 1 diabetic and healthy subjects. In type 2 diabetes, fibrinogen production is increased both in the postabsorptive state and in response to hyperinsulinemia. No data exist on the rate of albumin synthesis and its response to insulin in type 2 diabetes. RESEARCH DESIGN AND METHODS - We measured fractional synthesis rates (FSRs) and absolute synthesis rates (ASRs) of both albumin and fibrinogen in postabsorptive normoalbuminuric type 2 diabetic patients at their spontaneous glucose levels (study A), as well as albumin FSR and ASR before and after a hyperinsulinemic-euglycemic euaminoacidemic clamp (study B), using leucine isotope methods. RESULTS - In postabsorptive type 2 diabetes (study A), albumin FSR (11.2 \ub1 0.9%/day) and albumin ASR (15.4 \ub1 1.2 g/day) were not different from control values (albumin FSR: 9.4 \ub1 0.7%/day; albumin ASR: 13.8 \ub1 1.2 g/day, P > 0.1 for both). In contrast, in the type 2 diabetic subjects, both fibrinogen FSR (24.9 \ub1 2.1%/day) and ASR (2.4 \ub1 0.2 g/day) were greater (P < 0.025 and P < 0.007, respectively) compared with the control subjects (FSR: 18.6 \ub1 1.51%/day; ASR: 1.6 \ub1 0.2 g/day). Worse metabolic control in the type 2 diabetic patients was associated with hyperfibrinogenemia and increased leucine rate of appearance, whereas neither the (increased) fibrinogen ASR nor the (normal) albumin production was affected. In study B, after hyperinsulinemia (raised to 3c860 nmol/l), albumin FSR and ASR increased by 3c25% versus basal (P < 0.04) and to the same extent in both type 2 diabetic and control subjects. CONCLUSIONS - In normoalbuminuric type 2 diabetic patients, postabsorptive albumin synthesis and its response to insulin were normal, whereas fibrinogen synthesis was increased, irrespective of metabolic control. Furthermore, in normoalbuminuric type 2 diabetic patients, a normal insulin sensitivity with respect to albumin production but a selective hepatic dysregulation of fibrinogen metabolism were present

The immune suppressive microenvironment of human gliomas depends on the accumulation of bone marrow-derived macrophages in the center of the lesion.

Background. Systemic and local immune suppression plays a significant role in glioma progression. Glioma microenvironment contains both brain-resident microglial cells (MG) and bone marrow-derived macrophages (BMDM), but the study of their functional and immune regulatory activity requires accurate identification and isolation to collect pure populations. Methods. Myeloid and lymphoid infiltrate were characterized in grade II, III and IV gliomas by multicolor flow cytometry, along with the composition of the cell subsets of circulating myeloid cells. Macrophages were sorted and tested for their immunosuppressive ability. Moreover, following preoperative administration of 5-aminolevulinic acid to patients, distinct areas of tumor lesion were surgically removed and analyzed, based on protoporphyrin IX fluorescence emission. Results. The immune microenvironment of grade II to grade IV gliomas contains a large proportion of macrophages and a small proportion of lymphocytes expressing markers of dysfunctional activity. BMDM and resident MG cells were identified through a combination of markers, thus permitting their geographical identification in the lesions, their sorting and subsequent characterization of the functional characteristics. The infiltration of BMDM has the highest percentages in grade IV gliomas, and it increases from the periphery to the center of the lesion, where it exerts a strong immunosuppression that is, instead, absent in the marginal area. By contrast, MG shows little or no suppression. Functional differences, such as iron metabolism and phagocytosis, characterize resident versus blood-derived macrophages. Significant alterations of circulating monocytes are present in grade IV patients, correlating with accumulation of tumor macrophages. Conclusions. Grade IV gliomas have an alteration of both circulating and tumor-associated myeloid cells and, differently from grade II and III gliomas, show a significant presence of blood-derived immune suppressive macrophages. BMDM and MG show different functional properties

I medici veronesi e le problematiche deontologiche della professione

Viene presentato l'esito di un'indagine rivolta a tutti i medici della provincia di Verona iscritti all'ordine professionale e muniti di indirizzo di posta elettronica e disponibili a rispondere a delle interviste. Si tratta di oltre un migliaio di medici a cui è stata chiesta la reatiività personale relativamente a problematiche che li coinvolgono attualmente: invecchiamento della popolazione, immigrazione e multiculturalità, rifiuto della sofferenza e della morte, medicalizzazione impropria di problemi esistenziali, rischio professionale, riduzione delle risorse economiche, burocratizzazione dell'assistenza sanitaria, difficoltà di aggiornamento, difficoltà di comunicazione con i pazienti, implicazioni etiche del medico, carenza di supporti

Additional file 1: of The immune suppressive microenvironment of human gliomas depends on the accumulation of bone marrow-derived macrophages in the center of the lesion

Table S1. Cell populations analyzed in tumor tissues of glioma patients. Supplementary materials and methods. Description of patient characteristics, multiparametric flow cytometry, functional assay, t-SNE analysis and experiments with nanoparticles. (DOCX 22 kb

Medici a Verona 2: Indagine sui fattori di benessere/malessere dei professionisti veronesi (parte seconda)

Questo secondo articolo presenta altri dati relativi alla pratica professionale, emersi dall\u2019elaborazione delle risposte a un questionario sulle cause di malessere e benessere dei medici ed odontoiatri veronesi. Tra i molti risultati quelli pi\uf9 significativi indicano un minore interesse per la comunicazione-relazione con i pazienti nei professionisti che maggiormente avvertono il peso della responsabilit\ue0 nei confronti dei loro pazienti e in quelli che maggiormente si preoccupano per le possibili denunce di questi ultimi.Viceversa, due fattori di malessere come la preoccupazione per la sofferenza dei pazienti e la solitudine professionale si accompagnano a una maggiore propensione alla relazione e quindi a una maggiore attenzione a comportamenti eticamente rilevanti, con un ricorso minore alla medicina difensiva. Esiste inoltre una relazione tra fattori di malessere del medico e ricorso alla medicina difensiva, intesa sia come eccesso che come difetto di prestazioni.In sintesi, \ue8 stato rilevato un nesso stretto tra modalit\ue0 di comunicazione con i pazienti, livello di soddisfazione dei professionisti della cura e ricorso alla medicina difensiva.In letteratura esistono gi\ue0 dati che dimostrano il rapporto tra modalit\ue0 di comunicazione e soddisfazione del paziente, e rispettivamente tra comunicazione ed efficacia delle cure (dati recenti stimano una riduzione degli errori di circa il 50% per il miglioramento della comunicazione interna ai reparti e una riduzione dei ricoveri di circa il 30% per il miglioramento della comunicazione tra strutture specialistiche e del territorio). Altri dati della letteratura evidenziano l\u2019esistenza di correlazioni molto strette tra modalit\ue0 di comunicazione e contenzioso da parte di pazienti (\ue8 noto che circa il 70% dei casi di contenzioso in medicina sono dovuti a cattiva comunicazione).Anche i risultati di questo studio confermano la necessit\ue0 e l\u2019urgenza di un forte impegno nella formazione pre- e post-laurea per il miglioramento delle competenze comunicative e relazionali dei professionisti sanitari, questo al fine di migliorare efficacia ed efficienza delle cure e soddisfazione sia dei pazienti che dei medici