ВЛИЯНИЕ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ ПЕРСУЛЬФАТА КАЛИЯ, ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА, ГЛУТАРАЛЬДЕГИДА И ЧЕТВЕРТИЧНЫХ АММОНИЙНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПАТОГЕНОВ, СПЕЦИФИЧНЫХ ДЛЯ МЯСОПЕРЕРАБАТЫВАЮЩЕЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ

Abstract The changes in bacterial genetic material under the action of different biocidal products have been investigated. It was confirmed by PCR and genetic engineering that biocidal product Ecocid was able to remove both chromosomal and plasmid DNA, either isolated or contained within the bacterial cells. Using a disinfectant that destroys DNA on the surfaces of meat production equipment is a promising measure to prevent horizontal transfer of unwanted genetic material, such as bacterial genes associated with the resistance to antibiotics, or genes of toxin production.Аннотация Изучались изменения в генетическом материале бактерий, возникающие под действием дезинфицирующих средств различных химических классов. Методами молекулярной биологии и генной инженерии установлено, что дезинфицирующее средство Экоцид разрушает как изолированный генетический материал, так и находящиеся в составе бактериальных клеток хромосомную и плазмидную ДНК. Разрушение генетического материала бактерий при дезинфекции оборудования мясоперерабатывающих предприятий необходимо для предотвращения горизонтального переноса нежелательной генетической информации, например генов антибиотикоустойчивости или токсинообразования

Изучение источников заражения цыплят-бройлеров сальмонеллами с использованием ERIC-ПЦР и реакции агглютинации с флюоресцентно-мечеными антигенами (ИРА)

The study aims to develop diagnostic algorithms for using ERIC-PCR and IRA, which make it possible to identify the routes of Salmonella introduction into a poultry farm. The authors studied the genetic differences of 15 isolates of Salmonella spp., isolated from pathological material, feed raw materials and swabs from poultry houses of broiler poultry farms (parent stock and replacement young animals) in the West Siberian region. The species of Salmonella cultures were confirmed by sequencing and using biochemical tests and agglutination sera. Bacterial DNA was isolated using the standard silicosorption method. Analysis of the genomic DNA of the studied collection of Salmonella using the ERIC-PCR method allowed us to group the resulting strains and isolates into three genotypes that differ in amplicon patterns on polyacrylamide gel electrophoresis. Comparison of IRA results with blood sera of birds from the parent flock and replacement young animals of poultry farm No. 1 made it possible to identify antibodies to both Salmonella genotype one and Salmonella genotype 2 in most of the examined poultry flocks. Analysis of the correlation of antibody titers to Salmonella antigens of the 1st and 2nd genotypes made it possible to exclude a cross-reaction in some poultry houses. The correlation was negative. It was positive in two poultry houses, and there was no correlation in one. The immunofluorescence agglutination reaction system makes it possible to precisely distinguish the seroprevalence of different Salmonella strains at individual agricultural enterprises. The totality of data from serological analysis suggests that some birds have an increased susceptibility to infection with Salmonella of both genotypes, which means that these individuals have genetic characteristics or characteristics of the intestinal microbiota associated with exposure to infection with Salmonella.Цель исследования — разработать диагностические алгоритмы использования ERIC-ПЦР и ИРА, которые позволят выявлять пути заноса сальмонелл на птицефабрику. Изучали генетические различия 15 изолятов Salmonella spp., выделенных из патологического материала, кормового сырья и смывов из птичников птицефабрик бройлерного направления (родительское стадо и ремонтный молодняк) Западно- Сибирского региона. Видовую принадлежность культур сальмонелл подтверждали методом секвенирования и/или с использованием биохимических тестов и агглютинационных сывороток. ДНК бактерий выделяли стандартным силико - сорбционным методом. Анализ геномной ДНК изучаемой коллекции сальмонелл методом ERIC-ПЦР позволил сгруппировать полученные штаммы и изоляты в три генотипа, отличающиеся друг от друга паттернами ампликонов на электрофорезе в полиакриламидном геле. Сопоставление результатов ИРА с сыворотками крови птицы родительского стада и ремонтного молодняка птицефабрики №1 позволило выявить антитела как к сальмонеллам генотипа 1, так и к сальмонеллам генотипа 2 в большинстве обследованных стад птицы. Анализ корреляции титров антител к антигенам сальмонелл 1-го и 2-го генотипов позволил исключить перекрестную реакцию, так как в отдельных птичниках корреляционная зависимость была отрицательной, в двух птичниках положительной и в одном птичнике отсутствовала. Система реакции иммунофлуоресцентной агглютинации позволяет достаточно специфично различать серопревалентность к разным штаммам сальмонелл на отдельно взятых сельскохозяйственных предприятиях. Совокупность данных серологического анализа позволяет говорить о том, что у части птицы наблюдается повышенная восприимчивость к заражению сальмонеллами обоих генотипов, что позволяет предполагать у данных особей наличие генетических особенностей или особенностей кишечной микробиоты, связанных с восприимчивостью к заражению сальмонеллами

ЗАВИСИМОСТЬ УРОВНЯ ИНФИЦИРОВАННОСТИ САЛЬМОНЕЛЛАМИ В ПОПУЛЯЦИЯХ КУР ОТ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ LACTOBACILLACEAE И ENTEROCOCCACEAE В ОТНОШЕНИИ SALMONELLA ENTERICA

The antagonistic activity of lactobacilli in the intestine in relation to various enteropathogenic microorganisms can vary within wide limits, including depending on the species composition of the lactobiota of the intestine. The purpose of this work was to determine the antagonistic activity of representatives of the order Lactobacillales isolated from chickens in poultry farms with different levels of Salmonella infection. The test object was the chickens of the parent herd and broiler chickens of crosses Ross 308 and Hubbard F - 15 from five poultry farms. Three poultry farms were characterized by a low level of salmonella infection in birds (less than 5% for cloacal swabs in PCR and the absence of salmonella isolation from food products). Two poultry farms were characterized by a high level of Salmonella infection (poultry infection by cloacal swabs of more than 10% and official salmonellosis disadvantage due to isolation of Salmonella cultures in food products). The level of infection was evaluated by real-time PCR after preliminary subculture of cloacal swabs on Shadler’s broth. The antagonistic activity of lactobacilli and related bacterial species isolated from the same chickens was carried out in co-cultivation tests on the Shadler broth with subsequent identification of salmonella on the RVS broth. Poultry farms with low Salmonella infection were characterized by the presence of L. reuteri as a major component of intestinal lactobiota and had a higher antagonistic activity against more Salmonella cultures (odds ratio (OR) 17.33 (CI 95 = 5.99-50.07776))Антагонистическая активность лактобактерий в кишечнике в отношении различных энтеропатогенных микроорганизмов может варьировать в широких пределах, в т. ч. в зависимости от видового состава лактобиоты кишечника. Цель настоящей работы заключалась в определении антагонистической активности представителей отряда Lactobacillales, выделенных от кур на птицефабриках с разными уровнями инфицированности сальмонеллами. Тест-объектом являлись куры родительского стада и цыплята-бройлеры кроссов Ross 308 и Hubbard F-15 с пяти птицефабрик. Три птицефабрики характеризовались низким уровнем инфицированности птицы сальмонеллами (менее 5 % по клоакальным смывам в ПЦР и отсутствие выделения сальмонелл из пищевой продукции). Две птицефабрики отличались высоким уровнем инфицированности сальмонеллами (инфицированность птицы по клоакальным смывам более 10 % и официальное неблагополучие по сальмонеллезу ввиду выделения культур сальмонелл в пищевой продукции). Уровень инфицированности оценивали методом ПЦР в режиме реального времени после предварительного субкультивирования клоакальных смывов на бульоне Шэдлера. Антагонистическую активность лактобактерий и родственных видов бактерий, выделенных от этих же кур, проводили в тестах по сокультивировнию на бульоне Шэдлера с последующим выявлением сальмонелл на RVS-бульоне. Птицефабрики с низким уровнем инфицированности сальмонеллами характеризовались наличием L. reuteri в качестве мажорного компонента лактобиоты кишечника и обладали более высокой антагонистической активностью в отношении большего числа культур сальмонелл (отношение шансов (OR) 17,33 (СI 95= 5,990–50,077))

EFFECT OF DISINFECTANTS BASED ON POTASSIUM PERSULFATE, HYDROGEN PEROXIDE, GLUTARALDEHYDE AND QUATERNARY AMMONIUM COMPOUNDS ON THE GENETIC MATERIAL OF THE PATHOGEN BACTERIA SPECIFIC TO MEAT PROCESSING INDUSTRY

Abstract The changes in bacterial genetic material under the action of different biocidal products have been investigated. It was confirmed by PCR and genetic engineering that biocidal product Ecocid was able to remove both chromosomal and plasmid DNA, either isolated or contained within the bacterial cells. Using a disinfectant that destroys DNA on the surfaces of meat production equipment is a promising measure to prevent horizontal transfer of unwanted genetic material, such as bacterial genes associated with the resistance to antibiotics, or genes of toxin production