Therapeutic use of canine (Canis familiaris) adipose-derived mesenchymal stem cells

Prikazan je pomen uporabe mezenhimskih matičnih celic v terapiji različnih bolezni in poškodb kjer zaradi njihovega imunomodulatornega, antiapoptotičnega delovanja in diferenciacijskega potenciala pripomorejo k hitrejši regeneraciji. Za njihovo uspešno uporabo je potrebno znanje o postopkih izolacije, karakterizacije, diferenciacije in shranjevanja celic, ter o različnih dostavnih sistemih, ki se razlikujejo med različnimi terapijami. Diplomsko delo prav tako vsebuje prednosti in slabosti uporabe biomaterialov kot nosilcev pri različnih načinih aplikacije celic, ki lahko zaradi odprtega sistema pripomorejo k njihovemu boljšemu nadzoru in diferenciaciji. Na koncu je delovanje mezenhimskih matičnih celic pri psu prikazano na primeru osteoartritisa, periodontalnih bolezni, regeneracije kože, kroničnih poškodb, kroničnega vnetja črevesja in tumorja.The importance of therapeutic use of mesenchymal stem cells is outlined through their immunomodulatory and antiapoptotic effects as well as differentiation potential, which all contribute to faster regeneration. For successful therapeutic use the knowledge about isolation of mesenchymal stem cells, their characterization, differentiation and preservation is needed. Due to their specific effects different application systems which are adapted to different therapies play an important role. Strengths and weaknesses of biomaterials for different applications are discussed as they can be beneficial because of better control over the cells and their differentiation in an open system. At the end the therapeutic effect of mesenchymal stem cells are presented in the case of osteoarthritis, periodontal disease, skin regeneration, chronical wounds, chronic bowel disease and tumor

Effect of ionization on glioblastoma stem cells and mesenchymal stem cells in coculture

Glioblastom je najpogostejši in najagresivnejši možganski tumor. Za visoko odpornost na standardno zdravljenje so odgovorne glioblastomske matične celice (GMC) in njihova interakcija s tumorskim mikrookoljem, katerega del so tudi mezenhimske matične celice (MMC). Raziskave imajo nasprotujoče rezultate glede vpliva MMC na rast in invazijo tumorja, vendar imajo velik potencial kot vektorji pri dostavljanju terapevtikov v tumor. Vpliv ionizirajočega sevanja, ki se rutinsko uporablja za zdravljenje glioblastoma, na GMC in MMC smo določali v tridimenzionalnem (3D) modelu sferoidov monokultur in kokultur obeh vrst celic. Izvedli smo test klonogenosti, invazije in proliferacije z imunobarvanjem s protitelesi proti Ki-67 in spremljali celični cikel s Hoechst barvilom. Rezultati testa klonogenosti so pokazali, da so GMC odporne na sevanje za razliko od MMC. Rast sferoidov v obsevani kokulturi GMC z MMC se je zmanjšala v primerjavi z obsevano monokulturo GMC. Invazija MMC v monokulturi se je povišala po obsevanju, v kokulturi z GMC pa sevanje ni imelo vpliva na invazijo MMC. Ionizirajoče sevanje in prisotnost MMC v kulturi nista imela vpliva na invazijo GMC. V monokulturi so se GMC hitreje delile kot MMC, v kokulturi pa so MMC svojo proliferacijo pospešile. Obsevanje je znižalo proliferacijo MMC in GMC v kokulturi. Prisotnost GMC in ionizirajoče sevanje ni imelo vpliva na celični cikel MMC. Celični cikel obsevanih GMC se je v monokulturi ustavil v G2 fazi, v kokulturi z MMC pa v G1 fazi. Naši rezultati so pripomogli k boljšem razumevanju odziva GMC na ionizirajoče sevanje in vpliv MMC na odpornost GMC na ionizirajoče sevanje. Rezultati so dobra iztočnica za nadaljne raziskave mehanizmov odpornosti glioblastoma na standardno zdravljenje.Glioblastoma is the most aggressive brain tumour. Its resistance to standard therapy is due to glioblastoma stem cells (GSC) and their interaction with tumour microenvironment, part of which are also mesenchymal stem cells (MSC). Research on MSC effects on tumour growth and invasion shows seemingly contradictory results. Still, MSC have great potential as vectors for drug delivery to the tumour. Here, we studied how ionizing radiation affects GSC and MSC in monocultures and cocultures, both in tridimensional (3D) spheroid model. We used clonogenic assay, invasion assay, proliferation assay with antibodies for Ki-67 protein and we also analysed cell cycle with Hoechst dye. GSC were more clonogenic then MSC, when irradiated. When in coculture with MSC, GSC spheroid growth slowed down compared to GSC monocultures. When irradiated, MSC were more invasive in monoculture than in coculture. Irradiation and MSC didn\u27t influence invasion of GSC. GSC were more proliferative then MSC in monoculture. Proliferation of MSC increased in coculture but decreased when they were exposed to radiation. Proliferation of GSC decreased in irradiated coculture with MSC compared to radiated monoculture of GSC. GSC and radiation didn\u27t affect cell cycle of MSC. When we radiated GSC in monoculture cell cycle stopped in G2 phase, but not when they were irradiated in the presence of MSC. Our results contribute to understanding of effect of irradiation on GSC and effect of MMC on GSC radioresistance. Results of this study are useful for future research of mechanisms that are responsible for glioblastoma resistance to standard therapy

The liability of the European Union for bail-in measures: analysis of cases Kotnik and Ledra Advertising

Magistrska diplomska naloga »Odškodninska odgovornost Evropske unije za ukrepe bail-in: analiza primerov Kotnik in Ledra Advertising« uvodoma predstavi razvoj instituta odškodninske odgovornosti institucij Evropske unije za kršitve prava Evropske unije skozi sodno prakso Sodišča Evropske unije. V nadaljevanju se posveti razlagi ukrepa za reševanje bank bail-in. Na tem mestu razloži, kako je prišlo do njegovega razvoja na evropski ravni ter kakšne so njegove dejanske posledice za delničarje in upnike bank. V tem sklopu je tudi podrobneje predstavljena problematika konflikta ukrepa bail-in s temeljno pravico do lastnine. Preostanek naloge je posvečen analizi izvedbe ukrepa bail-in na primeru reševanja bank v Sloveniji in na Cipru. V ta namen je najprej predstavljena pravna podlaga, ki je vodila do izvedbe tega ukrepa v vsaki od držav ter razlike med primeroma. Osrednji del naloge predstavlja peto poglavje, v katerem sta razčlenjeni sodbi Sodišča EU Kotnik in Ledra Advertising, izdani v zadevnih konkretnih primerih. Zaključni del naloge je namenjen odgovarjanju na osrednje vprašanje naloge, tj. »kakšne so možnosti posameznikov, prizadetih z ukrepom bail-in, da uspejo z odškodninsko tožbo proti Evropski uniji?« Pri tem se osredotoči na možnosti prizadetih posameznikov v primeru Kotnik v luči sodbe Ledra Advertising.Master thesis “The liability of the European Union for bail-in measures: analysis of cases Kotnik and Ledra Advertising” firstly presents the development of the non-contractual liability of European Union institutions for breaches of European Union law through the case-law of the Court of Justice of the European Union. It further aims to explain the bail-in measure. To this end, it presents how the bail-in measure developed on the European level and what are its actual consequences for shareholders and creditors of failing banks. This section additionally deals with the question of the conflict between the bail-in measure and the fundamental right to property. The rest of the thesis focuses on the analysis of the implementation of the bail-in measure in Slovenian and Cypriot cases of bank resolution. For this purpose, it firstly presents the legal basis for the implementation of the bail-in measure in each of the two countries. The central part of the thesis is its fifth chapter, which consists of the breakdown of judgements of the Court of Justice of the European Union Kotnik and Ledra Advertising that were issued in the cases concerned. The concluding chapter tries to answer the main research question of the thesis “what are the prospects of individuals, which suffered losses by means of implementation of the bail-in measure, to succeed with an action for damages against European Union?” In this regard, it concentrates on the prospects of individuals affected in Kotnik case in the light of the judgement in Ledra Advertising

Vpliv listnih ekstraktov dresnikov na rast endofitskih gliv

Namen: Želele smo ugotoviti vpliv etanolnih ekstraktov posameznih dresnikov (japonski, češki in sahalinski dresnik) na rast endofitskih gliv Botrytis cinerea, Fusarium oxysporum in Alternaria alternata. Pričakovale smo inhibicijo rasti, saj so rastline rodu Fallopia znane kot invazivne vrste. Kot take bi namreč lahko z zaviranjem rasti endofitskih gliv avtohtonih rastlin vplivale na njihovo rast in si tako zagotovile prednost. Metode: V vsako petrijevko, ki je vsebovala 2,5 % etanolni ekstrakt posameznega dresnika, smo nacepile glivo Botrytis cinerea, Fusarium oxysporum ali Alternaria alternata. Po enem in po dveh tednih inkubacije smo petrijevke fotografirale, izmerile njihovo preraščenost ter rezultate statistično obdelale. Rezultati: Prisotnost etanolnega ekstrakta vseh treh vrst dresnikov je rast gliv povečala. Največji vpliv je viden pri kombinaciji glive Alternaria alternata in japonskega dresnika (Fallopia japonica). Pri glivi Botrytis cinerea pa vpliva dresnika na rast glive ni bilo

Odpornost glioblastoma na radioterapijo : vpliv rakavih matičnih celic in mikroo[ko]lja tumorja

Glioblastom je najpogostejši možganski tumor pri odraslih z zelo slabo prognozo preživetja bolnikov. Ta je posledica odpornosti glioblastoma na standardno zdravljenje, ki vključuje radioterapijo in kemoterapijo. Z namenom načrtovanja učinkovitejših pristopov zdravljenja preučujemo biološke mehanizme odpornosti glioblastoma na radioterapijo s poudarkom na mikrookolju tumorja in rakavih matičnih celicah. V predkliničnih raziskavah uporabljamo napredne in personalizirane celične modele, ki posnemajo mikrookolje tumorja v bolnikih in z večjo natančnostjo napovedo odziv bolnika na zdravljenje. Hkrati so takšni modeli pomembni za testiranje novih pristopov za zdravljenje kot je imunoterapija