Ventricular androgenic-anabolic steroid-related remodeling: an immunohistochemical study

Background: Several fatal cases of bodybuilders, following a myocardial infarction after long exposure to androgenicanabolic steroids (AAS), are reported. In recent years, evidence has emerged of cases of heart failure related to AAS consumption, with no signs of coronary or aorta atherosclerosis. This study aims to further investigate the pathogenesis of the ventricular AAS-related remodeling performing immunohistochemistry (IHC). Method: In order to examine innate immunity activity and myocytes and endothelial cell apoptosis, IHC analyses were performed on heart tissue of two cases of bodybuilders who died after years of supratherapeutic use of metelonone and nandrolone and where no atherosclerosis or thrombosis were found, using the following antibodies: anti-CD68, anti-iNOS, anti-CD163, anti-CD 15, anti-CD8, anti-CD4, anti-HIF1 α, and in situ TUNEL staining. Results: Results confirm the experimental findings of recent research that, in the absence of other pathological factors, if intensive training is combined with AAS abuse, myocytes and endothelial cells undergo apoptotic alterations. The absence of inflammatory reactions and the presence of an increased number of M2 macrophages in the areas of fibrotic remodeling confirm that the fibrotic changes in the heart are apoptosisrelated and not necrosis-related. Conclusions In conclusion, the study indicates that, in very young subjects with chronic hypoxia-related alterations of the heart, signs of a heart failure in the other organs and a history of AAS abuse, death can be ascribed to progressive heart failure due to the direct apoptotic cardiac and endothelial changes produced by AAS

皮膚損傷治癒過程におけるアポトーシス関連因子の動態解析

金沢大学医薬保健研究域医学系皮膚の創傷治癒過程におけるアポトーシス関連因子の動態について検索して,以下のような成果を得た.1.マウス皮膚損傷とFas抗原(Fas)及びFasリガンド(Fas L)Fas及びFas Lは,両者とも好中球には局在せず,マクロファージや線維芽細胞の細胞膜や細胞質にFas及びFas L陽性所見が認められた.特に,マクロファージや線維芽細胞では,Fas又はFas L単独で陽性を示すものと,両者ともに陽性を示すものとが混在していた.また,Fas及びFas Lの発現量は,受傷後6日目で最大となることから,Fas-Fas L系を介したアポトーシスが,創傷治癒過程の増殖期に重要な役割を果たしている可能性が示唆された.2.ヒト皮膚損傷とc-Jun及びc-Fosヒト皮膚損傷を試料として,c-Jun及びc-Fosの組織・細胞レベルでの局在を免疫組織化学的に検討した.受傷後1日未満では,一部の好中球の核にc-Jun及びc-Fos陽性所見が認められた.受傷後1日以上では,マクロファージや線維芽細胞の核に陽性所見が認められた.c-Jun及びc-Fos陽性率は受傷後1日未満の損傷では低く,受傷後1日から顕著に増加し,受傷7日で最高に達した.これらの結果はc-Jun及びc-Fosが皮膚創傷治癒,特に細胞増殖と密接な関係のあることを示唆している.3.ヒト皮膚損傷とPCNA及びLewis-Y抗原(Le^y)ヒト皮膚損傷を試料としてPCNA及びLeyの組織・細胞レベルでの局在を免疫組織化学的に検討した.PCNAについてはc-Jun及びc-Fosと同様の結果を得た.Le^yについては,好中球の細胞表面に陽性所見が認められ,マクロファージや線維芽細胞に明らかな陽性所見は認められなかった.研究課題/領域番号:10770187, 研究期間(年度):1998 – 1999出典：「皮膚損傷治癒過程におけるアポトーシス関連因子の動態解析」研究成果報告書　課題番号10770187（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-10770187/)を加工して作

細胞増殖因子及び接着因子の動態を指標とする損傷の微視的・系統的解析

金沢大学医学部法医学実務上,損傷検査の重要性は周知のとおりであり,特に,生前の損傷か死後のものかの鑑別を含めた受傷後経過時間の判定は極めて重要である.陳旧度の異なる損傷を実験的に作成し,コラーゲンやフィブロネクチン等の細胞外マトリックス,並びに炎症性サイトカインの一種であるインターロイキン1(Interleukin1,IL-1),特にLI-1αの損傷治癒過程における動態を免疫組織化学的に検索し,受傷後経過時間判定ための有用な指標となることを報告してきた.そこで,LI-1α以外の炎症性サイトカインである腫瘍壊死因子(Tumor Necrosis Factor α,TNFα)並びにLI-1βについても同様に免疫組織化学的に検索し,損傷の受傷後経過時間判定における有用性を検討した.TNFαは受傷後3,6及び12時間の切創では,創部に侵潤してきた好中球の細胞質に陽性所見が認められた.受傷後1及び3日の切創では,好中球に代わり単球やマクロファージの貧食細胞の侵潤が主体となり,これらの細胞質に陽性所見が認められた.受傷後5及び7日間ではマクロファージ等の貧食細胞のみならず線維芽細胞の細胞質にもTNFαは陽性所見を示した.したがって,TNFαの発現様式は,LI-1αと同様の経時的推移を示しており,受傷後極めて早期の経過時間判定のための有用な指標となり得るものと考えられた.LI-1βは受傷後1時間の切創の両側創縁において,帯状に限局性の陽性所見が認められた.同様の所見が受傷後3及び6時間の創縁にも認められた.しかしながら,全ての試料について,LI-1βが陽性となった好中球,マクロファージ及び線維芽細胞等の有核細胞はわずかであり,LI-1αやTNFαの反応よりも弱いものであった.したがって,LI-1βの損傷の生前・死後の鑑別に有用な指標となる可能性が示唆された.以上,LI-1αのみならずLI-1β及びTNFαもまた,生前・死後の鑑別を含めた受傷後経過時間の判定上,有用な指標となりうるものと考えられた.研究課題/領域番号:06857031, 研究期間(年度):1994出典：研究課題「細胞増殖因子及び接着因子の動態を指標とする損傷の微視的・系統的解析」課題番号06857031（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-06857031/）を加工して作

サイトカインの法医診断学への応用: ショック及び薬物中毒を中心に

和歌山県立医科大学 / 金沢大学医薬保健研究域医学系1.外傷性ショックモデルにおけるサイトカイン及びケモカインの遺伝子発現マウスの両側後肢を90分間圧迫後、開放するいわゆる緊縛性ショックによる外傷性ショックモデルを作成したところ、48時間以内に約90%以上のマウスが死亡した。血清中の肝臓逸脱酵素(ALT)及び尿素窒素(BUN)は、緊縛解放後2時間から著明に上昇した。病理組織学的には、肺、肝臓及び腎臓で好中球の著明な浸潤を確認した。さらに、肝臓及び肺におけるサイトカイン(IL-1α、TNFα)、ケモカイン(MCP-1,MIP-1α、MIP-2、KC)及び接着因子(VCAM-1)遺伝子発現を検索したところ、いずれの物質も、緊縛解放後2時間で最も強い遺伝子発現が観察された。以上のことから、外傷性ショックでは、これらサイトカイン、ケモカイン及び接着因子が重要な役割を果たしていることが明らかとなり、法医実務的にこれらの遺伝子発現を検索することが外傷性ショックを診断する際に、有用となる可能性が示された。2.アセトアミノフェン肝障害とサイトカイン野生型マウスとI型TNFレセプター欠損(KO)マウスにアセトアミノフェン(600mg/kg)を腹腔内投与し、急性肝障害モデルを作成した。Aアセトアミノフェン投与後、各マウスの血清ALT値を測定したところ、KOマウスでは、野生型マウスに比べて、肝障害の程度が軽減していた。さらに、病理組織学的に、肝細胞の壊死の程度、白血球浸潤の提訴(好中球、マクロファージ、Tリンパ球)が、KOマウスでは減弱していた。さらに、肝臓におけるサイトカイン、ケモカイン及び接着因子の遺伝子発現も同様に、KOマウスで減弱していた。以上のことから、アセトアミノフェン肝障害ではTNF-I型TNFレセプターを介したシグナルが重要であることが判明した。研究課題/領域番号:14770199, 研究期間(年度):2002-2003出典：「サイトカインの法医診断学への応用: ショック及び薬物中毒を中心に」研究成果報告書　課題番号14770199（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14770199/)を加工して作

Revised trauma scoring system to predict in-hospital mortality in the emergency department: Glasgow Coma Scale, Age, and Systolic Blood Pressure score

Introduction: Our aim in this study was to assess whether the new Glasgow Coma Scale, Age, and Systolic Blood Pressure (GAP) scoring system, which is a modification of the Mechanism, Glasgow Coma Scale, Age, and Arterial Pressure (MGAP) scoring system, better predicts in-hospital mortality and can be applied more easily than previous trauma scores among trauma patients in the emergency department (ED). Methods: This multicenter, prospective, observational study was conducted to analyze readily available variables in the ED, which are associated with mortality rates among trauma patients. The data used in this study were derived from the Japan Trauma Data Bank (JTDB), which consists of 114 major emergency hospitals in Japan. A total of 35,732 trauma patients in the JTDB from 2004 to 2009 who were 15 years of age or older were eligible for inclusion in the study. Of these patients, 27,154 (76%) with complete sets of important data (patient age, Glasgow Coma Scale (GCS) score, systolic blood pressure (SBP), respiratory rate and Injury Severity Score (ISS)) were included in our analysis. We calculated weight for the predictors of the GAP scores on the basis of the records of 13,463 trauma patients in a derivation data set determined by using logistic regression. Scores derived from four existing scoring systems (Revised Trauma Score, Triage Revised Trauma Score, Trauma and Injury Severity Score and MGAP score) were calibrated using logistic regression models that fit in the derivation set. The GAP scoring system was compared to the calibrated scoring systems with data from a total of 13,691 patients in a validation data set using c-statistics and reclassification tables with three defined risk groups based on a previous publication: low risk (mortality 50%). Results: Calculated GAP scores involved GCS score (from three to fifteen points), patient age 120 mmHg, six points; 60 to 120 mmHg, four points). The c-statistics for the GAP scores (0.933 for long-term mortality and 0.965 for short-term mortality) were better than or comparable to the trauma scores calculated using other scales. Compared with existing instruments, our reclassification tables show that the GAP scoring system reclassified all patients except one in the correct direction. In most cases, the observed incidence of death in patients who were reclassified matched what would have been predicted by the GAP scoring system. Conclusions: The GAP scoring system can predict in-hospital mortality more accurately than the previously developed trauma scoring systems

Immunohistochemical Analysis of CXCR4 Expression in Fibrohistiocytic Tumors

Functional chemokine receptors are expressed in many malignant tumors. These receptors promote tumor growth and metastasis in response to endogenous chemokines. We analyzed the expression of CXCR4, CCR6 and CCR7 in fibrohistiocytic tumors, including dermatofibrosarcoma protuberance (DFSP), malignant fibrous histiocytoma (MFH), dermatofibroma (DF) using immunohistochemistry. We also investigated the relationship between CXCR4 and CD34, the latter of which is an immunohistochemical marker for DFSP. We observed a higher expression of CXCR4 in DFSP and MFH as compared with DF. Interestingly, a significantly higher expression of CXCR4 was detected in relapsed DFSP than in non-relapsed DFSP, but no significant differences were detected between non-relapsed DFSP and DFSP with CD34 immunostaining. Moreover, MFH had strong immunoreactivity for CXCR4, CCR6 and CCR7. These findings suggest that the assessment of CXCR4 immunoreactivity in fibrohistiocytic tumors is a useful tool for predicting tumor aggressiveness

737–1 Heart Fatty Acid-binding Protein and Myoglobin can Accurately Detect Successful Reperfusion as Early as 15 Minutes After Reperfuslon

Human heart fatty acid-binding protein (FABP) is an abundant low molecular weight protein in cytoplasm of myocardial cell similar to myoglobin (Mb). To evaluate whether FABP can also detect successful reperfusion very early like Mb, we examined serum FABP and Mb levels in 45 patients (pts) undergoing PTCR or PTCA within 6 hours after the onset of acute myocardial infarction. Coronary angiography was performed every 5minutes (min) during reperfusion therapy to determine the exact time of reperfusion. In 30 pts with reperfusion (reperfused group: TIMI grade 3 [23 pts] and grade 2 [7 pts]), serum samples were taken just before and at 15, 30 and 60min after initial angiographic confirmation of reperfusion. In 15 pts without reperfusion (nonreperfused group), serum samples were taken just before and at 15, 30 and 60min after the initiation of therapy. FABP was measured by competitive enzyme immunoassay and Mb by latex agglutination turbidimetry. The FABP ratio (FABP after/FABP before) and Mb ratio (Mb after/Mb before) were calculated. FABP and Mb levels increased rapidly, peaked within 60min after reperfusion. The FABP and Mb ratios in the reperfused group significantly (p<0.01) exceeded those in the nonreperfused group at 15, 30 and 60 min. The sensitivity (Sen) and specificity (Spe) of these markers for reperfusion were as follows:Criteria15 min30 min60 minSenSpeSenSpeSenSpeFABP ratio>1.6*93%100%97%100%100%100%Mb ratio>2.4**90%100%93%100%100%100%*mean +2SD at 60 min in the nonreperfused group**published criteriaConclusionFABP, like Mb could accurately detect successful reperfusion as early as 15min after reperfusion and could provide a high level of accuracy within 60min after reperfusion

サイトカインの動態を指標とする皮膚損傷の受傷後経過時間判定に関する研究

金沢大学医学部マウス皮膚損傷の治癒過程におけるサイトカインの動態を免疫化学及び免疫組織化学的に検索し,損傷の受傷後経過時間判定におけるサイトカインの有用性を検討した.受傷後0から1日:受傷後1時間よりTNFα及びIL-1βが急激に上昇し,受傷後3時間でいずれも最高レベルに達した.IL-1αとIL-6はやや遅れて上昇し,受傷後6時間でピークとなった.したがって、これら炎症性サイトカインのなかで,TNFα及びIL-1βが炎症反応開始のための重要なメディエーターと考えられた.一方,IL-10の動態は炎症性サイトカインであるIL-1βやTNFαの動態とほぼ同様であった.IL-10はIL-1βやTNFαの産生を抑制することから,IL-10は炎症反応が遷延化したり、過剰になったりすることを抑制していると考えられた.これらサイトカインの局在について,受傷後3及び6時間目までの炎症早期では,主に好中球に陽性所見が認められ,受傷後1日目ではマクロファージと思われる単核の大型炎症細胞に陽性所見が観察された.受傷後3から10日:受傷後3日目にはこれら全てのサイトカインについて,リバウンド現象が認められ,この時期は創傷治癒の増殖期に相当する時期であり,組織学的に損傷部位での肉芽組織形成が盛んとなり,マクロファージや線維芽細胞にこれらサイトカインの陽性所見が認められた.このことはサイトカインが創傷治癒局所のリモデリングにも関与していることを示唆するものと考えられた.まとめ:炎症性サイトカインが創傷治癒過程の炎症期のみならず増殖期においても重要な役割を担う可能性が示された.また,抑制性サイトカインも同様に正常な創傷治癒のための重要な因子であることが判明した.また,これらサイトカインの動態は皮膚損傷の受傷後経過時間判定のための有用な指標となることが判明した.研究課題/領域番号:07857033, 研究期間(年度):1995出典：研究課題「サイトカインの動態を指標とする皮膚損傷の受傷後経過時間判定に関する研究」課題番号07857033（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-07857033/）を加工して作