2 research outputs found
ΠΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠΈΠΊΠ° Π½ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΡΡΠ°Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ»ΠΎΠ³Π° Ρ Π΅ΠΌΠΎΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° CheY ΠΈΠ· Π³ΠΈΠΏΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠΌΠΎΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°ΡΡΠΎΠ±Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° Thermotoga naphthophila
Using genetic engineering methods the expression vectors structures have been designed to produce recombinant proteins TnaCheY and Tna CheY-mut, the homologues of the chemotaxis protein CheY from the hyperthermophilic organism Thermotoga naphthophila in Escherichia coli BL21(DE3) cells. The cultivation conditions of transformed strains were optimized. The influence of episomal expression of the heterologous chemotaxis protein CheY on growth kinetics parameters of the culture of mesophilic bacteria E. coli was studied. The optimal purification flowchart of the obtained proteins using thermolysis is proposed. Using the E. coli BL21(DE3) laboratory strain as an example, the possibility of employment the episomal expression of such proteins to control the cultivation and production time of pharmaceutically and industrially valuable metabolites due to the impact on some stages of the bacterial chemotaxis is experimentally proved.Π‘ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π³Π΅Π½Π½ΠΎ-ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠ½ΡΡ
ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΡΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠ΅ Π²Π΅ΠΊΡΠΎΡΠ½ΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ, ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠ΅ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΈΡ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΡΡ
Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² TnaCheY ΠΈ TnaCheY-mut β Π³ΠΎΠΌΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΎΠ² Ρ
Π΅ΠΌΠΎΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° CheY Π³ΠΈΠΏΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠΌΠΎΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° Thermotoga naphthophila β Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ
Escherichia coli BL21(DE3). ΠΠΏΡΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΎΡΠΌΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ
ΡΡΠ°ΠΌΠΌΠΎΠ². ΠΠ·ΡΡΠ΅Π½ΠΎ Π²Π»ΠΈΡΠ½ΠΈΠ΅ ΡΠΏΠΈΡΠΎΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ Π³Π΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ
Π΅ΠΌΠΎΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° CheY Π½Π° ΠΏΠ°ΡΠ°ΠΌΠ΅ΡΡΡ ΠΊΠΈΠ½Π΅ΡΠΈΠΊΠΈ ΡΠΎΡΡΠ° ΠΊΡΠ»ΡΡΡΡΡ ΠΌΠ΅Π·ΠΎΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° E. coli. ΠΡΠ΅Π΄Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π° ΠΎΠΏΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½Π°Ρ ΡΡ
Π΅ΠΌΠ° ΠΎΡΠΈΡΡΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΡ
Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ΅ΡΠΌΠΎΠ»ΠΈΠ·ΠΈΡΠ°. ΠΠ° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΡ
Π΄Π°Π½Π½ΡΡ
Π² ΡΡΠ°ΡΡΠ΅ ΡΠ°ΡΡΠΌΠΎΡΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΠΎΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΡΡ
Π²Π°ΡΠΈΠ°Π½ΡΠΎΠ² ΡΠ΅ΡΠΌΠΎΡΡΠ°Π±ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ
Π΅ΠΌΠΎΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° CheY. ΠΠ° ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅ΡΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ Π»Π°Π±ΠΎΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ°ΠΌΠΌΠ° E. coli BL21(DE3), ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½Π° Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠΏΠΈΡΠΎΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½ΡΡ
Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π΄Π»Ρ ΡΠΏΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π΅ΠΌ ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΈΠΈ ΡΠ°ΡΠΌΠ°ΡΠ΅Π²ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΌΡΡΠ»Π΅Π½Π½ΠΎ ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ
ΠΌΠ΅ΡΠ°Π±ΠΎΠ»ΠΈΡΠΎΠ² Π·Π° ΡΡΡΡ Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Π½Π° ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠ°ΠΏΡ Ρ
Π΅ΠΌΠΎΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ° Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠΉ