One-year experience of nucleic acid technology testing for human immunodeficiency virus Type 1, hepatitis C virus, and hepatitis B virus in Thai blood donations

Wstęp: Krew pobrana w 2007 roku w Narodowym Centrum Krwi Tajlandzkiego Stowarzyszenia Czerwonego Krzyża została zbadana metodami biologii molekularnej (NAT) za pomocą systemów: TIGRIS/Procleix Ultrio firmy Chiron oraz cobas s 201/cobas TaqScreen MPX firmy Roche. Materiał i metody: Oceny czułości, specyficzności oraz dokładności systemów dokonano przez zbadanie 486 676 seronegatywnych próbek krwi. W każdym dniu pobierania krwi próbki były dzielone na dwie części. Próbki oznaczone numerami nieparzystymi były badane pojedynczo (TIGRIS), podczas gdy próbki oznaczone parzystymi numerami badano w pulach 6 na aparacie cobas s 201. W celu potwierdzenia wyników reaktywnych badano w duplikacie próbki pobrane z pojemnika z osoczem i w ten sposób oceniano specyficzność testu. Reaktywne próbki były testowane na alternatywnym systemie NAT, a następnie badaniom poddano kolejne próbki pobrane od tych dawców. Wyniki: Czułość analityczna obu systemów osiągnęła 95-procentowy limit wykrywania, zgodnie z informacją załączoną przez producenta. Nie zaobserwowano krzyżowej kontaminacji w żadnym z testowanych systemów. Specyficzność wyniosła odpowiednio 99,93% dla testu Procleix Ultrio i 99,90% dla testu cobas TaqScreen. W wyniku zastosowania technik NAT, ludzki wirus niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) został wykryty statystycznie u 1 na 97 000 przebadanych dawców, wirus zapalenia wątroby typu C - u 1 na 490 000 przebadanych dawców, a wirus zapalenia wątroby typu B (HBV) - u 1 na 2800 przebadanych dawców krwi. Zidentyfikowano również kilku utajonych nosicieli HBV, z których większość została wykryta za pomocą obu testów. Przypadki okienka serologicznego dla HIV-1 i HCV zostały wykryte przez oba testy. Wnioski: Wyniki przeprowadzonych badań wykazały, że obydwa systemy i testy nadają się do prowadzenia rutynowych badań NAT przez Narodowe Centrum Krwi Tajlandzkiego Stowarzyszenia Czerwonego Krzyża, chociaż test Procleix Ultrio okazał się mniej czuły w przypadku wykrywania HBV, w porównaniu z testem TaqScreen.Background: Blood donations collected at the National Blood Center, the Thai Red Cross Society, Bangkok, in 2007 were tested by nucleic acid amplification technology (NAT) using the Chiron TIGRIS/Procleix Ultrio test and the Roche cobas s 201/cobas TaqScreen multiplex test. Material and methods: The sensitivity, specificity, and robustness were determined by testing 486 676 seronegative blood donations. Samples from each day of collection were divided into two sets; the odd-numbered samples were tested individually on the TIGRIS and the evennumbered samples were tested in pools of 6 on the cobas s 201. The status of reactive samples was confirmed by duplicate testing of samples from the plasma bag to calculate the test specificity. Reactive samples were tested on the alternate system and followed up. Results: The analytical sensitivity of both systems met the 95% limits of detection claimed by the respective package inserts. No cross contamination was seen with either system. Test specificity was 99.93 and 99.90% for the Procleix Ultrio and cobas TaqScreen tests, respectively. The NAT yield rates for human immunodeficiency virus Type 1 (HIV-1), hepatitis C virus (HCV), and hepatitis B virus (HBV) were 1:97 000, 1:490 000, and 1:2800, respectively. Several occult HBV donors, the majority of whom were detected by both tests, were also identified. The HIV-1 and HCV window cases were detected with both tests. Conclusion: The performances of the systems and tests indicated that both were acceptable for routine NAT by the National Blood Center, the Thai Red Cross Society. However, the Procleix Ultrio test appeared to be less sensitive than the cobas TaqScreen test for HBV

Occult hepatitis B virus infection in Thai blood donors

Wstęp: Narodowe Centrum Krwi Tajlandzkiego Stowarzyszenia Czerwonego Krzyża przeprowadziło badania oceniające przydatność dwóch komercyjnych testów (TIGRIS/PROCLEIX Ultrio firmy Chiron oraz Cobas s 201/Cobas TaqScreen MPX firmy Roche) do badań przesiewowych na obecność ludzkiego wirusa niedoboru odporności typu 1, wirusa zapalenia wątroby typu C i wirusa zapalenia wątroby typu B u krwiodawców w Tajlandii. W wyniku tego badania zidentyfikowano 175 dawców reaktywnych w badaniach NAT bez antygenu HBs. Status zakażenia HBV potwierdzono w badaniach kolejnych próbek pochodzących od tych dawców (follow-up studies). Materiał i metody: Pierwsze próbki, w których wykryto DNA HBV (index samples) badano na obecność markerów serologicznych HBV i oznaczano w nich poziom wiremii. Kolejne próbki pobierane przez okres do 13 miesięcy od tych dawców badano obydwoma testami NAT, jak również na obecność wszystkich serologicznych markerów HBV. Wyniki: W kolejnych badaniach uczestniczyło 72 dawców (41%) spośród 175 dawców DNA HBV-dodatnich. U większości z nich stwierdzono ukryte zakażenie HBV (66,7%), u 26,4% stwierdzono wczesną ostrą fazę zakażenia HBV, z czego 20,8% znajdowało się w okienku serologicznym. U 3 dawców z przeciwciałami anty-HBs (4,2%) stwierdzono reaktywację zakażenia HBV lub wystąpienie kolejnego zakażenia przełamującego obecne przeciwciało (breakthrough infection). Wniosek: U większości dawców, których w badaniach rutynowych zidentyfikowano jako HBsAg ujemnych/NAT-dodatnich, stwierdzono ukryte zakażenie HBV, co stanowi wystarczające uzasadnienie dla wprowadzenia badań NAT w celu kwalifikacji krwiodawców w Tajlandii. J. Transf. Med. 2011; 3: 143–154Background: An evaluation by the National Blood Center, the Thai Red Cross Society, of two commercial multiplex nucleic acid tests (NATs; the Chiron PROCLEIX ULTRIO test and the Roche Cobas TaqScreen MPX test) for screening Thai blood donors for hepatitis B virus (HBV), hepatitis C virus, and human immunodeficiency virus Type 1 identified 175 HBV NAT–reactive/hepatitis B surface antigen (HBsAg)-negative donors. The classification of the HBV infection of these donors was confirmed by follow-up testing. Study design and methods: Index samples were tested for HBV serologic markers and HBV viral loads were determined. Donors were followed for up to 13 months and samples were tested with both NAT assays and for all HBV serological markers. Results: Of 175 HBV NAT-yield donors, 72 (41%) were followed. Based on the follow-up results, the majority of donors who were followed had an occult HBV infection (66.7%), followed by donors with a primary, acute infection (26.4%). The majority of donors in this latter group (20.8%) were in the window period. Three donors (4.2%), who were anti-HBs positive, had a reinfection or breakthrough infection. Conclusion: The majority of donors detected during routine screening, who were HBsAg negative and NAT reactive, had an occult HBV infection, thus validating the decision to introduce NAT for blood donations in Thailand. J. Transf. Med. 2011; 3: 143–15

Multicenter Evaluation of a New Automated Fourth-Generation Human Immunodeficiency Virus Screening Assay with a Sensitive Antigen Detection Module and High Specificity

Fourth-generation assays for the simultaneous detection of human immunodeficiency virus (HIV) antigen and antibody that were available on the international market until now have antigen detection modules with relatively poor sensitivity and produce a higher rate of false-positive results than third-generation enzyme immunoassays (EIAs). The new Cobas Core HIV Combi EIA with an improved sensitivity for HIV p24 antigen was compared to alternative fourth- and third-generation assays, the p24 antigen test, and HIV type 1 (HIV-1) RNA reverse transcriptase PCR (RT-PCR). A total of 94 seroconversion panels (n = 709 sera), samples from the acute phase of infection after seroconversion (n = 32), anti-HIV-1-positive specimens (n = 730) from patients in different stages of the disease, 462 subtyped samples from different geographical locations, anti-HIV-2-positive sera (n = 302), dilutions of cell culture supernatants (n = 62) from cells infected with different HIV-1 subtypes, selected performance panels from Boston Biomedica Inc., 7,579 unselected samples from blood donors, 303 unselected daily routine samples, 997 specimens from hospitalized patients, and potentially interfering samples (n = 1,222) were tested with Cobas Core HIV Combi EIA. The new assay showed a sensitivity comparable to that of the Abbott HIV-1 AG Monoclonal A for early detection of HIV infection in seroconversion panels. The mean time delay of Cobas Core HIV Combi EIA (last negative sample plus 1 day) in comparison to that for HIV-1 RT-PCR for 87 panels tested with both methods was 2.75 days. The diagnostic window was reduced with Cobas Core HIV Combi EIA by between 3.6 and 5.7 days from that for third-generation assays. The specificities of Cobas Core HIV Combi EIA in blood donors were 99.84 and 99.85% (after repeated testing). Overall, 30 repeatedly reactive false-positive results out of 10,031 HIV-negative samples were obtained with Cobas Core HIV Combi EIA. Our results show that a fourth-generation assay with improved specificity such as Cobas Core HIV Combi EIA is suitable for blood donor screening because of its low number of false positives and because it detects HIV p24 antigen with a sensitivity comparable to that of single-antigen assays