Confronto di patogenicità fra otto ceppi di Steinernema feltiae (Filipjev, 1934) (Rhabditida: Steinernematidae) rinvenuti in terreni dell’Italia meridionale

INFECTIVITY COMPARISON AMONG EIGHT STEINERNEMA FELTIAE (FILIPJEV, 1934) (RHABDITIDA: STEINERNEMATIDAE) ISOLATED FROM SOUTHERN ITALIAN SOILS The infectivity of eight strains of Steinernema feltiae (Filipjev, 1934) isolated from Southern Italian soils were compared in two laboratory bioassays against Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Galleriidae) larvae. Infectivity was determined by larval mortality rate and penetration rate assays. The percentage of larval mortality was recorded after 72-h exposure to infective juveniles (IJs) ranging from 37.7 to 71.1%. In the penetration rate assay the percentage and sex ratio of nema- todes invading the insects were determined; the average number of nematodes in cadavers exposed to 100 IJs ranged from 5.23 to 15.80. There were significant differences among the strains and four of them (IS-CL2, IS-GR1, IS-CO1, IS-SA1) were highly virulent to G. mellonella larvae. Bioassays’ results showed a correlation between levels of host mortality and levels of nematode establishment. Key words: Entomopathogenic nematodes, Galleria mellonella, Italian strains, bioassays, pene- tration rate, larval mortality rate.È stato effettuato un confronto di patogenicità tra 8 ceppi di Steinernema feltiae (Filipjev, 1934), isolati da terreni dell’Italia meridionale, utilizzando larve di Galleria mellonella in due biosaggi di laboratorio. La patogenicità è stata valutata mediante il tasso di mortalità larvale ed il tasso di penetrazione. I dati sulla mortalità larvale sono stati rilevati 72 ore dopo aver sottoposto 30 larve all’inoculo di stadi giovanili infestanti (Ijs); le percentuali di mortalità hanno presentato valori compresi tra 37,7% (IS-CE2) e 71,1% (IS-CO1). Nel biosaggio sul tasso di penetrazione, dove 3 larve sono state sottoposte all’infestazione di 100 (Ijs) dei diversi ceppi, sono stati determinati il numero dei nematodi penetrati all’interno dell’ospite (variabile da 5,23% a 15,80%) e la sex ratio. Sono state evidenziate significative differenze tra i diversi isolati e 4 di essi (IS-CL2, IS- GR1, IS-CO1, IS-SA1) hanno mostrato una alta patogenicità nei confronti delle larve di G. mellonella. I dati dei biosaggi hanno evidenziato una correlazione tra la mortalità larvale ed i nematodi riscontrati all’interno delle larve. Parole chiave: nematodi entomopatogeni, Galleria mellonella, isolati italiani, biosaggi, tasso di penetrazione, tasso di mortalità.

Morfologia larvale e biologia di Coelichneumon rudis (Boyer de Fonscolombe) (Hymenoptera: Ichneumonidae), endoparassitoide delle crisalidi della Thaumetopoea pityocampa (Denis et Schiffermüller) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae)

LARVAL MORPHOLOGY AND BIOLOGY OF COELICHNEUMON RUDIS (BOYER DE FONSCOLOMBE) (HYMENOPTERA: ICHNEUMONIDAE), ENDOPARASITOID OF THAUMETOPOEA PITYOCAMPA (DENIS ET SCHIFFERMÜLLER) PUPAEDuring 1992-1994 a morphological and bioethological study on Coelichneumon rudis (Boyer de Fonscolombe) (Hymenoptera: Ichneumonidae), an endophagous parasitoid of Thaumetopoea pityocampa (Denis et Schiffermüller) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae) pupae, was carried out. The egg and the 5 larval instars, with a particular regard to the head sclerotizations, were described and illustrated. Observations effected in pine woods and in laboratory showed that Coelichneumon rudis is a monovoltine species characterized by arrhenotokous parthenogenesis and protandry. At room temperature the eggs hatch after 24-36 hours and the larva reaches the fifth and last instar after 7-10 days. The ichneumonid spends summer and winter as larva in the last instar and emerges in the following spring. Other biological informations are reported about sex ratio, prolificity, longevity, superparasitism, multiparasitism and natural enemies of C. rudis. Ethological observations searched into mating behaviour, without any courtship, and oviposition behaviour, with a particular regard to the host selection. Furthermore, the parasitization percentages of T. pityocampa pupae by C. rudis in the 4 investi- gated biotopes are reporeted. Finally, the results of the research have been compared with the bibliographic available know- ledges about other Ichneumonids. Key words: Ichneumoninae, Pine Processionary, natural enemies, ethology, mating behaviour, host selection, Apulia (Southern Italy).Durante il triennio 1992-1994 è stato eseguito uno studio morfologico e bioetologico dell’Imenottero Icneumonide Coelichneumon rudis (Boyer de Fonscolombe), parassitoide endo- fago delle crisalidi della Thaumetopoea pityocampa (Denis et Schiffermüller) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae). Sono stati descritti ed illustrati l’uovo e le 5 età larvali, con particolare riguardo alle sclerotizzazioni del capo. Coelichneumon rudis è risultato essere una specie monovoltina, a spiccata proterandria e a partenogenesi arrenotoca. A 25 °C le uova schidono in 24-36 ore e le larve raggiungono la maturità (V età) in 7-10 giorni; in tale stadio l’Icneumonide si mantiene in diapausa dall’estate alla primavera successiva. Altre informazioni inedite vengono riportate a riguardo della sex ratio, della prolificità, del superparassitismo, del multiparassitismo, della longevità e dei nemici naturali del C. rudis. Le osservazioni etologiche hanno riguardato le modalità dell’accoppiamento, evidenziando l’assenza di rituali precopula, e della ovideposizione, con particolare riguardo alla ricerca dell’ospite. Vengono riportati, inoltre, i dati relativi alle percentuali di crisalidi di T. pityocampa parassitizzate dal C. rudis nei 4 biotopi indagati. Infine, i risultati ottenuti sono stati confrontati con le conoscenze attualmente disponibili in bibliografia per altre specie di Icneumonidi. Parole chiave: Ichneumoninae, Processionaria del pino, nemici naturali, etologia, modalità di accoppiamento, modalità di ovideposizione, ricerca dell’ospite, Puglia (Italia Meridionale).  

Un caso di Ginandromorfismo in Coelichneumon rudis (Boyer de Fonscolombe, 1847) (Hymenoptera, Ichneumonidae)

A GYNANDROMORPHIC SPECIMEN OF COELICHNEUMON RUDIS (BOYER DE FONSCOLOMBE, 1847) (HYMENOPTERA, ICHNEUMONIDAE) It is described a gynandromorph of Coelichneumon rudis (Fonsc.) emerged from a Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) pupa collected in a Pine Wood of Apulia region (Southern Italy); the specimen, prevalently female, shows some male parts on the head and the torax. Key words: gynandromorphism, ichneumonid L'autore descrive un ginandromorfo di Coelichneumon rudis (Fonsc.) sfarfallato da crisalidi di Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) raccolte in una pineta della Puglia (Italia meridionale); l’esemplare, di aspetto prevalentemente femminile, presenta alcune parti del capo e del torace con caratteri tipicamente maschili

Aspetti di biologia e morfologia del Curculio (Balaninus) propinquus (Desbrochers) (Coleoptera: Curculionidae)

BIOLOGICAL AND MORPHOLOGICAL ASPECTS OF CURCULIO (BALANINUS) PROPINQUUS (DESBROCHERS) (COLEOPTERA: CURCULIONIDAE) At the present there is any information on the biology and morphology of Curculio propinquus (Desbrochers) and incomplete data on the host plants. Observations on this weevil were carried out on different species of Quercus present in Apulia Region (Southern Italy). Adults and larvae of C. propinquus feed on the acorns but the most harmful ones are the larvae which can destroy up to 100% of fruits of some Oak plants. In the woods of Q. trojana and Q. pubescens, the first species is the most damaged and between Q. frainetto and Q. cerris, the acorns of the first one are the most attached. In laboratory they also develop in chestnuts of Castanea sativa Miller. The natural enemis are rare and, so far, only two have been found: Scambus calobatus (Gravenhorst) (Hymenoptera: Ichneumonidae) and the fungus Metarhizium anisopliae Metch. (Deuteromycotina: Hyphomycetes). Formica fusca L. (Hymenoptera: Formicidae) is an active pre- dator of the last instar of the B. propinquus larvae. Key words: male genitalia, last instar larva morphology, biology, ethology

Rilievi sulla presenza e diffusione del nematode Sphaerularia bombi Dufour, 1837 (Nematoda, Tylenchida, Allantonematidae) in Italia meridionale

THE PRESENCE AND DISTRIBUTION OF SPHAERULARIA BOMBI DUFOUR, 1837 (NEMATODA, TYLENCHIDA, ALLANTONEMATIDAE) IN SOUTHERN ITALY Populations of different species of Bombus and of Psithyrus vestalis Geoffr. were studied in six- teen biotopes over a period of seven years. A stable association of Bombus and Psithyrus queens with the nematode Sphaerularia bombi Dufour were pointed out in ten biotopes where the humidity of the soil was constant in: under- brush of pinewoods and oak woods, cultivated and irrigated lands and in the uncultivated ones near the watering pipes. S. bombi was also found, for the first time, in some workers of B. terrestris L. and Pyrobombus sicheli Rad. besides in the queens. B. terrestris was the most common and abundant species in all the biotopes; it was parasitized by the nematode during spring time and successively in autumn in the biotopes which were above sea level from 0 to 431 m, since the Bombus does not overwinter at this altitude but fre- quently spends most of the hot months in the soil. While on the other hand, S. bombi completes one generation a year in the biotopes over 400 m above sea level where the B. terrestris and the other species of Bombus are present only in spring and at the beginning of Summer. Key words: Bombus terrestris L., Megabombus pascuorum Scop., Pyrobombus sicheli Rad., Psithyrus vestalis Geoffr., parassitization, Apidae workers, Apidae queens. La Sphaerularia bombi Dufour, parassita delle regine di Bombus e Psithyrus spp., è stata rinvenuta occasionalmente, per la prima volta, anche in alcune operaie di Bombus terrestris L. e Pyrobombus sicheli Rad. Il nematode è risultato frequente nella stazioni caratterizzate da una costante umidità del terreno come il sottobosco di pinete e querceti, campi coltivati e incolti in prossimità di canali di irrigazione predisposti dall’Ente di bonifica, colture agricole irrigue. Il B. terrestris è stata la specie più frequente e abbondante in tutti i biotopi considerati; in quelli fino a circa 400 m s.l.m. ove è stato rinvenuto per tutto l’anno, con l’eccezione dei mesi estivi più caldi, la S. bombi lo ha parassitizzato sia in primavera che alla sua ricomparsa in autunno. Invece, nei biotopi più elevati ove la la presenza del B. terrestris è circoscritta ai mesi primaverili  inizio estate e anche per le altre specie di Apidi assenti in autunno-inverno la S. bombi ha svolto una sola generazione all’anno. Parole chiave: Bombus terrestris L., Megabombus pascuorum Scop., Pyrobombus sicheli Rad., Psithyrus vestalis Geoffr., parassitizzazione, Apidae, operaie, regine

Biocontrol of Rhytidoderes plicatus Oliv. (Coleoptera, Curculionidae) in potted savoy cabbages with entompathogenic nematodes

Laboratory experiments have been performed to control Rhytidoderes plicatus Oliv. (Coleoptera, Curculionidae) larvae on potted savoy cabbages with entomopathogenic nematodes. Previous tests on last instar grubs of the weevil, in Petri dishes with a filter paper dampened with about 2,000 IJs in 1 ml of H2O, showed the capacity of S. carpocapsae and h. bacteriophora to kill 100% of the insects after 24 h and a slower activity of S. feltiae. The results of the second experiment, spraying 30,000 IJs in 50 ml of H2O on the soil of each potted savoy cabbage, put in evidence that h. bacteriophora was able to control 97% of the grubs after 5 days and 100% after 10 days while S. carpocapsae needed 5 days to kill 73% and 15 days to control 93% of the larvae. A slower activity was performed by S. feltiae that controlled only 30% of the weevil grubs after two weeks. Key words: Steinernema feltiae, S. carpocapsae, heterorhabditis bacteriophora, savoy cabbage. CONTROLLO BIOLOGICO DI Rhytidoderes plicatus OLIV. (COLEOPTERA, CURCULIONIDAE) SU PIANTE DI CAVOLO VERZA IN VASO, CON NEMATODI ENTOMOPAGENI Sono state effettuate prove di controllo su piante di cavolo attaccate alle radici da larve di Rhytidoderes plicatus Oliv. (Coleoptera, Curculionidae) utilizzando ceppi di Steinernema feltiae, S. carpocapsae e heterorhabditis bacteriophora rinvenuti in Italia meridionale. Test di laboratorio su larve mature del coleottero in scatole petri contenenti un disco di carta bibula inumidita con circa 2.000 stadi infettivi (IJs) dei nematodi in 1 ml di H2O avevano messo in evidenza che S. carpocapsae ed h. bacteriophora uccidevano il 100% delle larve del curculionide dopo 24 ore mentre allo S. feltiae ne occorrevano 96. Nelle prove effettuate sulle piante di cavolo verza in vaso furono distribuiti 30.000 IJs in 50 ml di H2O sul terreno. h. bacteriophora controllò il 97% delle larve dopo 5 giorni e il 100% dopo 10, mentre S. carpocapsae ridusse le larve del 73% dopo 5 giorni e dell’ 80% dopo 10 giorni. Dopo due settimane il 93% degli insetti era stato ucciso. S. feltiae evidenziò una azione molto più lenta arrivando a controllare il 30% delle larve dopo 2 settimane

Survey of Steinernema and Heterorhabditis (Rhabditida: Nematoda) in Southern Italian soils

 The occurrence of Steinernematid and Heterorhabditid entomopathogenic nematodes was pointed out in samples of soil collected from cultivated and uncultivated habitats in Southern Italy. Nematodes were isolated from samples of soil by “baiting” with larvae of Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Galleriidae). Entomopathogenic nematodes were obtained from 26 (13.82%) of 188 soil samples collected: Steinernema was located in 16 sites (8.51%), Heterorhabditis in 10 sites (5.32%). The Steinernema strains were identified as S. feltiae (Filipjev, 1934) (50%), S. anomali (Kozodoi, 1984) (25%) and as S. affinis (Bovien, 1937) (25%). The Heterorhabditis strains were identified as H. bacteriophora Poinar, 1976. This is the first report of S. anomali and S. affinis in Italy; the presence of S. anomali in the soil of salt pan borders with 3,550 mg of Cl- /100 g of soil is extremely interesting. Key words: Entomopathogenic nematodes, occurrence, Steinernema feltiae, S. anomali, S. affinis, Heterorhabditis bacteriophora. INDAGINI SU STEINERNEMA E HETERORHABDITIS (RHABDITIDA: NEMATODA) NEI TERRENI DELL’ITALIA MERIDIONALE È stata effettuata una indagine per valutare la presenza e la distribuzione di nematodi entomopatogeni (Steinernema ed Heterorhabditis) in campioni di terreno provenienti da diversi habitat dell’Italia meridionale. I nematodi sono stati estratti dai campioni di terreno utilizzando larve di Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Galleriidae), come insetto esca. La presenza di nematodi entomopatogeni è stata accertata in 26 campioni (13,82%) su 188 esaminati: gli Steinernema sono stati rinvenuti in 16 campioni (8,51%), Heterorhabditis in 10 (5,32%). Tra gli isolati di Steinernema sono state identificate 3 specie: S. feltiae Filipjev, 1934 (=S. bibionis) (Bovien, 1937) (50%), S. anomali (Kozodoi, 1984) (25%) e S. affinis (Bovien, 1937) (25%). I ceppi di Heterorhabditis sono risultati appartenere alla specie H. bacteriophora Poinar, 1976. La presenza di S. anomali e S. affinis viene segnalata per la prima volta in Italia. Di particolare interesse è il ritrovamento di un isolato di S. anomali in un terreno con Cl- /100 g di 3.550 mg. Parole chiave: nematodi entomopatogeni, distribuzione, Steinernema feltiae, S. anomali, S. affi- nis, Heterorhabditis bacteriophora

Preliminary attempts to control overwintering populations of Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae) with Steinernema feltiae (Filipjev, 1934) (Nematoda: Steinernematidae)

The Pine processionary caterpillar Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae) is a very dangerous lepidopterous pest spread in all mediterranean area. A preliminary survey was conducted with 3 different strains of Steinernematid entomopathogenic nematodes in the nests of pine processionary caterpillars in a Pinus halepensis Miller reforestation at “Pulicchie” (Gravina in Puglia, 338 m a.s.l.) of Apulia Region (southern Italy). A suspension of 300,000 IJs in 20 ml of gel (Idrosorb SR 2002 - Nigem®) was employed in each nest and mortality recorded every 10 days, for 30 days. The results of this preliminary experiment pointed out: - a real feasibility to reduce the overwintering larval populations injecting gel suspension of Steinernema feltiae IJs in their nests; - the persistence in the nests of IJs for more than 20 days from treatment; - the possibility of a limited number of nematodes to complete their life cycle in the larvae of T. pityocampa; - very low effects on the parasite Phryxe caudata Rond. (Diptera: Tachinidae). Key words: aqueous suspension, gel suspension, IJs injection, nests, Pinus halepensis, reforestation, Phryxe caudata.PROVE PRELIMINARI PER IL CONTROLLO DI POPOLAZIONI SVERNANTI DI Thaumetopoea pityocampa (DEN. ET SCHIFF.) (LEPIDOPTERA: THAUMETOPOEIDAE) CON Steinernema feltiae (FILIPJEV, 1934) (NEMATODA: STEINERNEMATIDAE) Sono state effettuate preliminari prove di controllo con Steinernema feltiae in un rimboschimento di Pinus halepensis Miller gravemente infestato da Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae). Una sospensione di 300.000 IJs in Idrosorb SR 2002 (Nigem®) è stata iniettata nel gennaio 2000 in ciascun nido contenente larve svernanti del lepidottero. La mortalità è stata verificata ogni 10 giorni, per 30 giorni. I risultati hanno evidenziato: - la capacità di S. feltiae di ridurre le popolazioni larvali svernanti di Thaumetopoea pityocampa tramite iniezioni di gel con IJs nei nidi; - la persistenza di IJs nei nidi per più di 20 giorni dal trattamento; - la abilità da parte dello Steinernematide di completare il ciclo nelle larve di T. pityocampa, anche se in un numero limitato; - basso livello di parassitizzazione nei confronti delle larve di Phryxe caudata Rond. (Diptera: Tachinidae). Parole chiave: sospensione in acqua, sospensione in gel, iniezioni con IJ, nidi, Pinus alepensis, rimboschimento, Phryxe caudata.

Infectivity comparison between “red” and “green” isolates of Heterorhabditis bacteriophora Poinar 1976 (Rhabditida: Nematoda) in relation to temperature

A study was conducted to evaluate the effects of temperature on the infective efficacy of 3 isolates of Heterorhabditis bacteriophora (IH-C3, IH-C6, IH-C13) associated with green strains of Photorhabdus luminescens (infected larvae of Galleria mellonella L. turn green) in comparison with 3 isolates of H. bacteriophora (IH-ME2, IH-LU1, IH-CE1) associated with red strains of Photorhabdus luminescens (infected larvae turn red). The percentage of larval mortality was recorded after a 72-h exposure period to the infective juvenile nematodes (Ijs) at various temperatures between 10°C and 35°C, at intervals of 5°C. For all nematode strains the highest larval mortality was recorded at 25-30°C. The data showed that temperature had a significant influence on host mortality for all H. bacteriophora isolates tested. Strain IH-CE1 showed the highest larval mortality percentage for the range 20-35°C. There were no significant differences among red and green isolates at the same temperatures except for one case: at 20°C the red isolates were more virulent than green ones. Key words: entomopathogenic nematodes, pine forest, olive-grove, maize field, bioassay.CONFRONTO DI PATOGENICITÀ TRA CEPPI “ROSSI” E “VERDI” DI HETERORHABDITIS BACTERIOPHORA POINAR 1976 (RHABDITIDA: NEMATODA) IN RELAZIONE ALLA TEMPERATURA. È stata valutata la patogenicità di 3 isolati Italiani di Heterorhabditis bacteriophora (IH-C3, IH- C6, IH-C13), il cui batterio simbionte Photorhabdus luminescens fa diventare le larve test di colore verde, con 3 isolati di H. bacteriophora (IH-ME2, IH-LU1, IH-CE1) che colorano le larve infe- state di rosso. I dati sulla mortalità sono stati rilevati 72 ore dopo aver sottoposto larve di Galleria mellonella ad una sospensione acquosa di 1000 Ijs/ml. a 10-15-20-25-30-35 °C. Per tutti gli isolati il tasso di mortalità più elevato si è verificato tra i 25 e i 30°C. IH-CE1 ha ucciso un maggior numero di larve di G. mellonella tra i 20 e i 35°C. Alle diverse temperature testate non si sono avute differenze significative tra gli “isolati rossi” e quelli “verdi”; soltanto a 20°C gli “isolati rossi” hanno mostrato una maggiore patogenicità nei confronti con gli ” isolati verdi”. Parole chiave: nematodi entomopatogeni, pineta, oliveto, campo di mais, test di patogenicità.