Epithelial-mesenchymal transition and stem cells in colorectal cancer progression

Introduction. Colorectal cancer (CRC) is the third leading cause of cancer-related death worldwide. Studying invasion and metastasizing mechanisms in colorectal carcinogenesis is gaining momentum. The purpose of the study was to analyze immunohistochemical (IHC) expression levels of epithelial and mesenchymal phenotypic markers, as well as cancer stem cells markers on I-IV (pTNM) stages of CRC. Materials and methods. Histopathological and IHC studies of 53 CRC were conducted. IHC study was carried out using antibodies against E-cadherin, CK-20, α-SMA, vimentin, CD44, and ALDH1. Results. CRC is characterized by low E-cadherin expression level that decreases during the I-IV stages sequence and by medium CK-20 expression level that decreases during the studied sequence. Furthermore, CRC is characterized by medium α-SMA and vimentin expression levels that increase during the studied sequence. These findings indicate parallel epithelial phenotype losing and mesenchymal phenotype acquiring by the cancer cells that happen during colorectal adenocarcinoma progression from the I to the IV stages. CD44 expression by the tumor stromal cells was described in this study. The median of CD44+ cells area equal to 61,26 (42,58; 79,15) % of CRC stromal cells. This index significantly increases from the I to the III stages of the tumor. ALDH1 expression by both cancer cells and stromal cells was described as well. The median of ALDH1+ stromal cells area equal to 40,22 (22,54; 47,77) %, the median of ALDH1+ cancer cells area equal to 42,15 (32,06; 50,42) %. The index of ALDH1+ stromal cells area significantly increases from the I to the III stages of the tumor whereas the index of ALDH1+ cancer cells area significantly increases from the III to the IV stages of the tumor. Moreover, correlations between the studied markers expression were revealed that proves the connection between epithelial-mesenchymal transition and stemness acquisition in CRC progression

Comparative immunohistochemical characteristics of Ki-67, p53, caspase-3 expression in gastric hyperplastic polyps and non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma

Aim. The problem of early diagnostic of gastric cancer has a tight connection with the issue of premalignant lesions, especially gastric polyps. The aim of this research was to compare the expression levels of Ki-67, p53 and caspase-3 in epithelial cells and stromal cells of gastric hyperplastic polyps on the one hand and tumor cells and stromal cells of non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma on the other hand. Materials and methods. For this purpose, pathohistological and immunohistochemical studies were used. The biopsies of 10 patients with hyperplastic polyps (the age of the patients ranged from 52 to 73 years) and surgical material of 10 patients with non-invasive (pTis, pT1) intestinal-type gastric adenocarcinoma (the age of patients ranged from 45 to 83 years) were analyzed. Results. It was established that epithelial cells of gastric hyperplastic polyps are characterized by low expression level of Ki-67, p53 and caspase-3, just as stromal cells of hyperplastic polyps are characterized by low expression level of Ki-67 and the medium expression level of caspase-3. Moreover, it has been established that tumor cells of non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma are characterized by medium expression level of Ki-67, caspase-3 and also low expression level of p53, just as stromal cells of non-invasive adenocarcinoma are characterized by low expression level of Ki-67 and low expression level of caspase-3. The differences between the expression levels of Ki-67, p53 and caspase-3, that were established for hyperplastic polyps on the one hand and non-invasive adenocarcinoma on the other hand, are statistically significant (p<0,05). Conclusion. These data demonstrate, that proliferative activity of non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma tumor cells is higher than proliferative activity of gastric hyperplastic polyps epithelial cells. Moreover, non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma differs by higher activity of p53 accumulation, higher level of tumor cells apoptosis and lower level of stromal cells apoptosis

Порівняльна імуногістохімічна характеристика експресії Ki-67, p53, каспази-3 в гіперпластичних поліпах і неінвазивній аденокарциномі шлунка кишкового типу

Aim. The problem of early diagnostic of gastric cancer has a tight connection with the issue of premalignant lesions, especially gastric polyps. The aim of this research was to compare the expression levels of Ki-67, p53 and caspase-3 in epithelial cells and stromal cells of gastric hyperplastic polyps on the one hand and tumor cells and stromal cells of non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma on the other hand.Materials and methods. For this purpose, pathohistological and immunohistochemical studies were used. The biopsies of 10 patients with hyperplastic polyps (the age of the patients ranged from 52 to 73 years) and surgical material of 10 patients with non-invasive (pTis, pT1) intestinal-type gastric adenocarcinoma (the age of patients ranged from 45 to 83 years) were analyzed.Results. It was established that epithelial cells of gastric hyperplastic polyps are characterized by low expression level of Ki-67, p53 and caspase-3, just as stromal cells of hyperplastic polyps are characterized by low expression level of Ki-67 and the medium expression level of caspase-3. Moreover, it has been established that tumor cells of non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma are characterized by medium expression level of Ki-67, caspase-3 and also low expression level of p53, just as stromal cells of non-invasive adenocarcinoma are characterized by low expression level of Ki-67 and low expression level of caspase-3. The differences between the expression levels of Ki-67, p53 and caspase-3, that were established for hyperplastic polyps on the one hand and non-invasive adenocarcinoma on the other hand, are statistically significant (p&lt;0,05).Conclusion. These data demonstrate, that proliferative activity of non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma tumor cells is higher than proliferative activity of gastric hyperplastic polyps epithelial cells. Moreover, non-invasive intestinal-type gastric adenocarcinoma differs by higher activity of p53 accumulation, higher level of tumor cells apoptosis and lower level of stromal cells apoptosis.Проблема ранней диагностики рака желудка тесно связана с вопросом предопухолевых процессов, к которым относят полипы желудка.Цель работы – сравнение уровней экспрессии маркеров Ki-67, p53, каспазы-3 в клетках эпителия и стромы гиперпластических полипов, а также в опухолевых и стромальных клетках неинвазивной аденокарциномы желудка кишечного типа.Материалы и методы. Проведено комплексное патогистологическое исследование биопсийного материала 10 пациентов в возрасте 52–73 лет с гиперпластическими полипами желудка, а также операционного материала 10 пациентов в возрасте 45–83 лет с неинвазивной (pTis, pT1) аденокарциномой желудка кишечного типа.Результаты. В результате исследования установлено, что эпителиоциты гиперпластических полипов желудка характеризуются низким уровнем экспрессии маркеров Ki-67, p53 и каспазы-3, а клетки стромы гиперпластических полипов – низким уровнем экспрессии Ki-67 и умеренным уровнем экспрессии каспазы-3. Кроме того, установлено, что опухолевые клетки неинвазивной аденокарциномы желудка кишечного типа характеризуются умеренным уровнем экспрессии Ki-67 и каспазы-3, а также низким уровнем экспрессии р53, в то время как клетки стромы неинвазивной аденокарциномы – низким уровнем экспрессии Ki-67 и низким уровнем экспрессии каспазы-3. Разница между полученными показателями уровней экспрессии маркеров Ki-67, p53 и каспазы-3 в клетках гиперпластических полипов желудка и неинвазивной аденокарциномы желудка кишечного типа была статистически значимой (p˂0,05).Выводы. Полученные данные свидетельствуют о том, что пролиферативная активность опухолевых клеток неинвазивной аденокарциномы желудка кишечного типа более чем в два раза превышает пролиферативную активность эпителиоцитов гиперпластических полипов желудка. При этом в сравнении с соответствующими структурными компонентами гиперпластических полипов желудка опухолевые клетки неинвазивной аденокарциномы желудка кишечного типа более активно накапливают мутантный белок р53 и отличаются более высоким уровнем апоптотической деградации опухолевого эпителия, а также меньшим уровнем апоптоза клеток стромы.Проблема ранньої діагностики раку шлунка тісно пов’язана з питанням передпухлинних процесів, до яких належать поліпи шлунка.Мета роботи – порівняння рівнів експресії маркерів Ki-67, p53, каспази-3 у клітинах епітелію та строми гіперпластичних поліпів, а також у пухлинних і стромальних клітинах неінвазивної аденокарциноми шлунка кишкового типу.Матеріали та методи. Здійснили комплексне патогістологічне дослідження біопсійного матеріалу 10 пацієнтів (52–73 років) із гіперпластичними поліпами, а також 10 пацієнтів (45–83 років) із неінвазивною (pTis, pT1) аденокарциномою шлунка кишкового типу.Результати. Встановили, що епітеліоцити гіперпластичних поліпів шлунка характеризуються низьким рівнем експресії маркерів Ki-67, p53 і каспази-3, а клітини строми гіперпластичних поліпів – низьким рівнем експресії Ki-67 і помірним рівнем експресії каспази-3. Крім того, пухлинні клітини неінвазивної аденокарциноми шлунка кишкового типу характеризуються помірним рівнем експресії Ki-67 і каспази-3, а також низьким рівнем експресії р53, водночас як клітини строми неінвазивної аденокарциноми – низьким рівнем експресії Ki-67 і низьким рівнем експресії каспази-3. Різниця між отриманими показниками рівнів експресії маркерів Ki-67, p53 і каспази-3 у клітинах гіперпластичних поліпів шлунка та неінвазивної аденокарциноми шлунка кишкового типу була статистично значущою (p˂0,05).Висновки. Дані, що отримали, свідчать: проліферативна активність пухлинних клітин неінвазивної аденокарциноми шлунка кишкового типу є більш ніж удвічі вищою, аніж проліферативна активність епітеліоцитів гіперпластичних поліпів шлунка. При цьому, порівняно з відповідними структурними компонентами гіперпластичних поліпів шлунка, пухлинні клітини неінвазивної аденокарциноми шлунка кишкового типу активніше акумулюють мутантний білок р53 та відрізняються вищим рівнем апоптотичної деградації пухлинного епітелію, а також меншим рівнем апоптозу клітин строми

Gastric hyperplastic polyps: immunohistochemical characteristic of proliferation and apoptosis

Aim. In order to research proliferation and apoptosis immunohistochemical study of expression of Ki-67 and Caspase-3 inbiopsies of 42 gastric hyperplastic polyps was conducted. Methods and results. It was found that gastric hyperplastic polyps are characterized by middle expression level of Ki-67 (2,4±0,09 points) and extremely low expression level of Casp-3 (13,6±0,392 points) in surface foveolar cells, and also low expression level of Ki-67 (0,7±0,04 points) and middle expression level of Casp-3 (61,4±9,487 points) in cells of lamina propria. In hyperplastic polyps with middle and high epithelial dysplasia expression level of Ki-67 inepithelial cells and cells of lamina propria increases. Conclusion. These results demonstrate the leading role of cell proliferation in progression of gastric hyperplastic polyps

Immunohistochemical study of MMP-2, TIMP-1 in hyperplastic polyps and intestinal-type gastric adenocarcinoma.

Background. The process of extracellular matrix degradation, provided by the matrix metalloproteinases system, plays an important role in cancerogenesis. Objective. To study the features of immunohistochemical expression of MMP-2, TIMP-1 by hyperplastic polyps’ cells and intestinal-type gastric adenocarcinoma cells. Methods. Pathohistological and immunohistochemical studies of hyperplastic polyps from 30 patients (age ranged from 52 to 73 years), intestinal-type gastric adenocarcinoma from 30 patients (age ranged from 49 to 86 years) were investigated. Results. It has been established that hyperplastic polyps’ epitheliocytes and stromal cells are characterized by the low MMP-2 and TIMP-1 expression levels, intestinal-type gastric adenocarcinoma cancer cells – by the low expression levels of these markers, while the cells of the carcinoma microenvironment are characterized by the medium expression levels of the examined markers. The cells of the microenvironment of the non-invasive carcinoma are characterized by the higher TIMP-1 expression level, compared to the cells of microenvironment of the invasive cancer. The direct correlations between the MMP-2 and TIMP-1 expression levels in the cancer cells and the cells of cancer microenvironment, and also the reverse correlation between the TIMP-1 and caspase-3 expression levels in the cancer cells were revealed. Conclusion. This data evidence the leading role of the cancer microenvironment cells in the process of extracellular matrix degradation, and also the close association between the stromolitic activity of the various cellular components of the carcinoma. Moreover, the anti-apoptotic effect of TIMP-1 in intestinal-type gastric adenocarcinoma was revealed

Immunohistochemical study of MUC5AC, MUC1, MUC2, Cdx-2 in hyperplastic polyps and intestinal-type gastric adenocarcinoma

Aim – to study the features of MUC1, MUC2, MUC5AC, Cdx-2 immunohistochemical expression in hyperplastic polyps and intestinal-type gastric adenocarcinoma, and their relationships with the proliferation and apoptosis markers expression levels, EGFR and HER-2/neu growth receptors. Materials and мethods. Pathomorphological and immunohistochemical studies of hyperplastic polyps from 30 patients (the age ranged from 52 to 73 years) and intestinal-type gastric adenocarcinoma from 30 patients (the age ranged from 49 to 86 years) were carried out. Results. It has been established that the gastric hyperplastic polyps are characterized by the high MUC5AC expression level, the moderate MUC1expression level, as well as the low MUC2 and Cdx-2 expression levels. The tumor cells of the intestinal-type gastric adenocarcinoma express gastric mucins less often, and are characterized by the moderate expression levels of the examined markers. In doing so, the carcinoma is characterized by the inverse correlations between gastric and intestinal mucins expression levels, and also by the correlations between the mucins markers expression levels and the histological grade of the tumor. It has been found, that the decrease in the MUC1 expression level by the tumor cells is associated with the increase in their proliferative level, while the decrease in the MUC1 and MUC5AC expression levels – with the decrease in their apoptosis level and also with the increase in the ErbB family growth receptors expression levels by the tumor cells. In addition, the increase in MUC2 expression level is associated with the decrease in apoptosis level, while the increase in the MUC2 and Cdx-2 expression levels – with the increase in EGFR expression level. Conclusions. There are close relationships between MUC1, MUC2, MUC5AC, Cdx-2 immunohistochemical expression levels and the levels of proliferative and apoptotic activity of intestinal-type gastric adenocarcinoma tumor cells, and also their expression of ErbB growth receptors. stomach neoplasms; polyps; adenocarcinoma; mucins; CDX2 transcription facto

Порівняльна характеристика транскрипційної активності генів CDH1, CTNNB1 та експресії кодованих ними білків Е-кадгерину та β-катеніну в аденокарциномі шлунка кишкового типу

Molecular genetics abnormalities, underlying aberrant expression of E-cadherin and β-catenin in malignant tumors, are still unclear.Aim: to compare the mRNA expression levels of CDH1 and CTNNB1 genes and the immunohistochemical expression levels of E-cadherin and β-catenin proteins in intestinal-type gastric adenocarcinoma.Materials and methods. The molecular genetic (real-time PCR) and immunohistochemical studies of the intestinal-type gastric adenocarcinoma (30 patients; I, II and III clinical stages were included) and of the normal stomach mucosa (10 samples) were conducted.Results. In comparison with the normal stomach mucosa, the intestinal-type gastric adenocarcinoma differs by the reduced transcriptional activity of the CDH1 gene [Me of relative normalized ratio of mRNA expression level is 0.14 (0.03; 0.40)], which correlates with the low expression level of E-cadherin in cancer cells [Me is 27,59 CUOD (23,14; 37,19), Spearman's correlation coefficient = 0,73], and also by the heightened transcriptional activity of the CTNNB1 gene [Me of relative normalized ratio of mRNA expression level is 4.32 (2.11; 11.43)], which correlates with the high expression level of β-catenin in cancer cells [Me is 116.65 CUOD (110.34; 151.32), Spearman's correlation coefficient = 0,94]. There is a reverse correlation between the CDH1 mRNA expression level and the degree of histological differentiation of intestinal-type gastric adenocarcinoma (correlation coefficient γ = -0,44); there is a direct correlation between the CTNNB1 and CDH1 mRNA expression levels (only for the I clinical stage cases); there are a direct correlations between the E-cadherin and β-catenin expression levels, and also between the CTNNB1 mRNA expression level and the E-cadherin expression level (only for the I-II clinical stage cases).Conclusion. The data indicate that decrease of transcriptional activity of the CDH1 gene and E-cadherin expression level, and also increase of transcriptional activity of the CTNNB1 gene and β-catenin expression level in the cancer cells play a critical role in the process of progression of intestinal-type gastric adenocarcinoma.Молекулярно-генетические аномалии, которые лежат в основе аберрантной экспрессии Е-кадгерина и β-катенина взлокачественных опухолях, изучены недостаточно.Цель работы – сравнение уровней экспрессии мРНК генов CDH1 и CTNNB1 и экспрессии Е-кадгерина и β-катенинаопухолевыми клетками аденокарциномы желудка кишечного типа (АКЖКТ).Материалы и методы. Проведено молекулярно-генетическое (ПЦР–РВ) и иммуногистохимическое исследованиеАКЖКТ I, II и III клинических стадий у 30 пациентов 49–86 лет, а также 10 образцов нормальной слизистой оболочкижелудка.Результаты. Аденокарцинома желудка кишечного типа в сравнении со слизистой оболочкой желудка обычного ги-стологического строения характеризуется сниженными показателями экспрессии мРНК гена CDH1 [Me = 0,14 (0,03;0,40)], которые коррелируют с низким уровнем экспрессии опухолевыми клетками Е-кадгерина [Me = 27,59 УЕОП(23,14; 37,19)], коэффициент корреляции Спирмена = 0,73], а также повышенными показателями экспрессии мРНК генаCTNNB1 [Me = 4,32 (2,11; 11,43)], которые коррелируют с высоким уровнем экспрессии опухолевыми клетками β-катени-на [Me = 116,65 УЕОП (110,34; 151,32), коэффициент корреляции Спирмена = 0,94]. Установлена обратная корреляциямежду показателями уровня экспрессии мРНК гена CDH1 и снижением степени гистологической дифференцировкиопухоли от G1 до G3 (коэффициент корреляции γ= -0,44); прямая корреляция между сниженными показателями уров-ня экспрессии мРНК гена CDH1 и повышенными показателями уровня экспрессии мРНК гена CTNNB1 в АКЖКТ Iклинической стадии; прямая корреляция между показателями уровней экспрессии Е-кадгерина и β-катенина, а такжемежду показателями уровней экспрессии мРНК гена CTNNB1 и экспрессии Е-кадгерина в АКЖКТ I–II клиническойстадии.Выводы. Снижение транскрипционной активности гена CDH1 и уровня экспрессии Е-кадгерина, а также повышениетранскрипционной активности гена CTNNB1 и уровня экспрессии β-катенина опухолевыми клетками АКЖКТ играютважную роль в прогрессии карциномы желудка.Молекулярно-генетичні аномалії, що є основою аберантної експресії Е-кадгерину та β-катеніну у злоякісних пухлинах, усе ще залишаються невивченими.Мета роботи – порівняння рівнів експресії мРНК генів CDH1 і CTNNB1 із рівнями експресії кодованих ними білків Е-кадгерину та β-катеніну в аденокарциномі шлунка кишкового типу (АКШКТ).Матеріали та методи. Здійснено молекулярно-генетичне (ПЛР–РЧ) та імуногістохімічне дослідження АКШКТ I, II та III клінічних стадій у 30 пацієнтів 49–86 років, а також 10 зразків нормальної слизової оболонки шлунка.Результати. АКШКТ порівняно з нормальною слизовою оболонкою шлунка характеризується зниженими показниками експресії мРНК гена CDH1 [Me = 0,14 (0,03; 0,40)], що корелюють із низьким рівнем експресії Е-кадгерину пухлинними клітинами [Me = 27,59 УЕОП (23,14; 37,19), коефіцієнт кореляції Спірмена = 0,73], а також підвищеними показниками експресії мРНК гена CTNNB1 [Me = 4,32 (2,11; 11,43)], що корелюють із високим рівнем експресії β-катенину пухлинними клітинами [Me = 116,65 УЕОП (110,34; 151,32), коефіцієнт кореляції Спірмена = 0,94]. Виявлена зворотна кореляція між показниками рівня експресії мРНК гена CDH1 і зниженням ступеня гістологічного диференціювання пухлини від G1 до G3 (коефіцієнт кореляції γ = -0,44); пряма кореляція між зниженими показниками рівня експресії мРНК гена CDH1 і підвищеними показниками рівня експресії мРНК гена CTNNB1 в АКШКТ I клінічної стадії; пряма кореляція між показниками рівнів експресії Е-кадгерину та β-катенину, а також між показниками рівнів експресії мРНК гена CTNNB1 та експресії Е-кадгерину в АКШКТ I–II клінічних стадій.Висновки. Зниження транскрипційної активності гена CDH1 і рівня експресії Е-кадгерину, а також підвищення транскрипційної активності гена CTNNB1 і рівня експресії β-катеніну пухлинними клітинами АКШКТ відіграють важливу роль у прогресії карциноми шлунка

Гіперпластичні поліпи шлунка: імуногістохімічна характеристика проліферації та апоптозу

Aim. In order to research proliferation and apoptosis immunohistochemical study of expression of Ki-67 and Caspase-3 inbiopsies of 42 gastric hyperplastic polyps was conducted.Methods and results. It was found that gastric hyperplastic polyps are characterized by middle expression level of Ki-67 (2,4±0,09 points) and extremely low expression level of Casp-3 (13,6±0,392 points) in surface foveolar cells, and also low expression level of Ki-67 (0,7±0,04 points) and middle expression level of Casp-3 (61,4±9,487 points) in cells of lamina propria. In hyperplastic polyps with middle and high epithelial dysplasia expression level of Ki-67 inepithelial cells and cells of lamina propria increases.Conclusion.  These results demonstrate the leading role of cell proliferation in progression of gastric hyperplastic polyps.С целью изучения процессов пролиферации и апоптоза проведено иммуногистохимическое исследование экспрессии Ki-67 и Casp-3 в биоптатах 42 гиперпластических полипов желудка. Установлено, что гиперпластические полипы желудка характеризуются средним уровнем экспрессии Ki-67 (2,4±0,09 балла) и крайне низким уровнем экспрессии Casp-3 (13,6±0,392 балла) в покровно-ямочном эпителии, а также низким уровнем экспрессии Ki-67 (0,7±0,04 балла) и умеренным уровнем экспрессии Casp-3 (61,4±9,487 балла) в клетках собственной пластинки. В гиперпластических полипах с умеренной и тяжелой дисплазией эпителия уровень экспрессии Ki-67 в эпителиоцитах и клетках собственной пластинки возрастает. Это свидетельствует о ведущей роли процессов пролиферации в прогрессировании гиперпластических полипов желудка.З метою дослідження процесів проліферації та апоптозу здійснили імуногістохімічне дослідження експресії Ki-67 та Casp-3 в біоптатах 42 гіперпластичних поліпів шлунка. Встановили, що гіперпластичні поліпи шлунка характеризуються помірним рівнем експресії Ki-67 (2,4±0,09 бала) та вкрай низьким рівнем експресії Casp-3 (13,6±0,392 бала) у покривно-ямковому епітелії, а також низьким рівнем експресії Ki-67 (0,7±0,04 бала) та помірним рівнем експресії Casp-3 (61,4±9,487 бала) у клітинах власної пластинки. У гіперпластичних поліпах із помірною та тяжкою дисплазією епітелію рівень експресії Ki-67 в епітеліоцитах і клітинах власної пластинки зростає. Це свідчить про провідну роль процесів проліферації в прогресуванні гіперпластичних поліпів шлунка

The features of transcriptional activity of K-RAS gene and expression of ErbB family receptors in intestinal-type gastric adenocarcinoma

Aim – to study the features of expression of the K-RAS gene mRNA and the ErbB family growth receptors (EGFR and HER-2/neu) by the tumor cells of the intestinal-type gastric adenocarcinoma, and also their relations to the processes of cell proliferation and apoptosis. Materials and methods. Pathohistological, immunohistochemical and molecular-genetic studies of the intestinal-type gastric adenocarcinoma from 30 patients (the age ranged from 49 to 86 years) and 10 samples of the normal gastric mucosa were performed. Results. It has been established that intestinal-type gastric adenocarcinoma is characterized by the elevated level of expression of the K-RAS gene mRNA [Me = 3.62 (0.57; 5.87)]. There is the inverse weak correlation between the elevated expression level of the K-RAS gene mRNA and the decrease of the histological differentiation degree of the tumor from G3 to G1 (r = -0.36). In 100 % of the intestinal-type gastric adenocarcinomas, that were investigated, membrane expression of the EGFR and HER-2/neu receptors was detected. Herewith the intense expression of the EGFR (++/+++) occurs in 76.66 % of the adenocarcinomas, while the HER2 positive status (+++) occurs in 46.66 % of the adenocarcinomas. There is the direct strong correlation between the expression levels of the EGFR and HER2/neu markers by the tumor cells (r = 0.80), the direct medium correlation between the expression levels of the EGFR and Ki-67 markers (r = 0.53), and the direct medium correlation between the expression levels of the EGFR marker and K-RAS gene mRNA (r = 0.57). There are no correlations between the levels of expression of the apoptosis markers (p53 and caspase-3), EGFR and HER2/neu receptors, as well as the expression level of the K-RAS gene mRNA by the tumor cells of intestinal-type gastric adenocarcinoma. Conclusions. These data suggest that the increasing of the expression levels of EGFR and HER2/neu receptors by the tumor cells of intestinal-type gastric adenocarcinoma leads to the activation of transcription and translation of the K-RAS gene, followed by the activation of the ERK-signaling pathway that realizes the proliferative potential of the tumor cells. The examination of ErbB–state of the intestinal-type gastric adenocarcinoma is expediently for the individual target-treatment selection

Особливості імуногістохімічної експресії CD44 в колоректальній аденокарциномі

Background. Over the last decade, a significant amount of data supporting the cancer stem cell hypothesis has been accumulated. Despite the large number of works devoted to the study of the stem cell marker CD44 in colorectal adenocarcinoma, the question of the prognostic value of this marker is still controversial. Objective. To study CD44 immunohistochemical expression in colorectal adenocarcinoma on the I, II, III, IV stages (pTNM). Methods. Pathohistological and immunohistochemical studies of surgical material from 30 patients that underwent surgical treatment of colorectal adenocarcinoma (I–IV stages) were carried out. Polyclonal antibodies CD44 (CD44 Std. / HCAM Ab-4, Thermo Scientifiс, USA) were used for immunohistochemical study. Results. 16,7% of all the studied cases were stage I colorectal adenocarcinomas, 26,7% – stage II colorectal adenocarcinomas, 33,3% – stage III colorectal adenocarcinomas, and 23,3% – stage IV colorectal adenocarcinomas. It was established that colorectal adenocarcinoma is characterized by the medium membrano-cytoplasmic expression of CD44 with the median 90,49 (62,19; 110,15) CUOD that statistically significantly higher than CD44 expression level in non-changed mucosa of the distal colon. There is a tendency to increasing of expression level of the marker in sequence of the stages of colorectal adenocarcinoma development, wherein median of CD44 expression in stage II carcinomas is significantly higher than the same characteristic in stage I carcinomas (70,32 (55,13; 90,56) CUOD vs. 51,12 (31,14; 60,32) CUOD, р˂0,05), and median of CD44 expression in stage III carcinomas is significantly higher than the same characteristic in stage II carcinomas (104,76 (90,03; 112,26) CUOD vs. 70,32 (55,13; 90,56) CUOD, р˂0,05). Furthermore, correlations between CD44 expression level and depth of tumor’s invasion (r=0,48, p˂0,05), presence of regional metastases (r=0,53, p˂0,05), presence of distant metastases (r=0,38, p˂0,05), histological grade of the tumor (r=0,27, p˂0,05) were revealed. Conclusion. CD44 immunohistochemical expression increases significantly during the progression of colorectal adenocarcinoma from stage I to stage III (pTNM), as well it correlates with depth of the tumor’s invasion, presence of regional and distant metastases, and with histological grade of the tumor.Актуальность. В течение последнего десятилетия накоплено значительное количество данных, подтверждающих гипотезу о раковых стволовых клетках. Несмотря на большое число работ, посвященных изучению маркера стволовых клеток CD44 в колоректальной аденокарциноме, вопрос о прогностической ценности этого маркера все еще остается спорным. Цель. Изучить особенности иммуногистохимической экспрессии CD44 в колоректальной аденокарциноме на I, II, III, IV стадиях (pTNM). Методы. Проведено комплексное патогистологическое и иммуногистохимическое исследование операционного материала 30 пациентов, прооперированных по поводу колоректальной аденокарциномы I–IV стадий. Для проведения иммуногистохимического исследования использовали поликлональные антитела к CD44 (CD44 Std. / HCAM Ab-4, Thermo Scientifiс, USA). Результаты. Случаи I стадии колоректальной аденокарциномы составили 16,7% от общего числа исследованных случаев, II стадия – 26,7% случаев, III стадия – 33,3% случаев и IV стадия – 23,3% случаев. Установлено, что колоректальная аденокарцинома характеризуется средним уровнем мембранно-цитоплазматической экспрессии CD44 с медианой 90,49 (62,19; 110,15) УЕОП, что статистически значимо превышает показатель экспрессии маркера в неизмененной слизистой оболочке дистальной толстой кишки. Имеет место тенденция к возрастанию уровня экспрессии маркера в последовательности стадий развития колоректальной аденокарциномы, при этом медиана экспрессии CD44 в карциномах II стадии статистически значимо больше таковой в карциномах I стадии (70,32 (55,13; 90,56) УЕОП vs. 51,12 (31,14; 60,32) УЕОП, р˂0,05), а в карциномах III стадии статистически значимо больше таковой в карциномах II стадии (104,76 (90,03; 112,26) УЕОП vs. 70,32 (55,13; 90,56) УЕОП, р˂0,05). Кроме того, установлены корреляции между уровнем экспрессии CD44 и глубиной инвазии опухоли (r=0,48, p˂0,05), наличием регионарных метастазов (r=0,53, p˂0,05), наличием отдаленных метастазов (r=0,38, p˂0,05), степенью гистологической дифференцировки опухоли (r=0,27, p˂0,05). Заключение. Иммуногистохимическая экспрессия CD44 значимо возрастает при прогрессии колоректальной аденокарциномы от I до III стадии (pTNM), прямо коррелирует с глубиной инвазии опухоли, наличием регионарных и отдаленных метастазов, а также степенью гистологической дифференцировки опухоли.Актуальність. Протягом останнього десятиліття накопичено значну кількість даних, що підтверджують гіпотезу ракових стовбурових клітин. Незважаючи на велику кількість робіт, присвячених вивченню маркера стовбурових клітин CD44 в колоректальній аденокарциномі, питання прогностичної цінності цього маркера все ще лишається спірним. Мета. Вивчити особливості імуногістохімічної експресії CD44 в колоректальній аденокарциномі на I, II, III, IV стадіях (pTNM). Методи. Проведено комплексне патогістологічне та імуногістохімічне дослідження операційного матеріалу 30 пацієнтів, прооперованих з приводу колоректальної аденокарциноми I–IV стадій. Для проведення імуногістохімічного дослідження було використано поліклональні антитіла CD44 (CD44 Std. / HCAM Ab-4, Thermo Scientifiс, USA). Результати. Випадки I стадії колоректальної аденокарциноми склали 16,7% від загального числа досліджених випадків, II стадії – 26,7% випадків, III – 33,3% випадків і IV стадія – 23,3%. Встановлено, що колоректальна аденокарцинома характеризується середнім рівнем мембранно-цитоплазматичної експресії CD44 з медіаною 90,49 (62,19; 110,15) УООЩ, що статистично значущо перевищує показники експресії маркеру в незміненій слизовій оболонці дистальної товстої кишки. Має місце тенденція до підвищення рівня експресії маркеру в послідовності стадій розвитку колоректальної аденокарциноми, при цьому медіана експресії CD44 в карциномах II стадії статистично значущо більше аналогічного показника в карциномах I стадії (70,32 (55,13; 90,56) УООЩ vs. 51,12 (31,14; 60,32) УООЩ, р˂0,05), а в карциномах III стадії статистично значущо більше аналогічного показника в карциномах II стадії (104,76 (90,03; 112,26) УООЩ vs. 70,32 (55,13; 90,56) УООЩ, р˂0,05). Окрім того, встановлено кореляції між рівнем експресії CD44 і глибиною інвазії пухлини (r=0,48, p˂0,05), наявністю реґіонарних метастазів (r=0,53, p˂0,05), наявністю віддалених метастазів (r=0,38, p˂0,05), ступенем гістологічного диференціювання пухлини (r=0,27, p˂0,05). Підсумок. Імуногістохімічна експресія CD44 значущо збільшується при прогресії колоректальної аденокарциноми від I до III стадії (pTNM), прямо корелює з глибиною інвазії пухлини, наявністю реґіонарних і віддалених метастазів, а також зі ступенем гістологічного диференціювання пухлини