Development and evaluation of novel nanophotosensitizers as photoantimicrobial agents against Staphylococcus aureus

The main aim of the present study was to synthetize polyacrylamide nanoparticles and to use them as photosensitizer carriers. The new monobrominated derivatives (monobrominated neutral red and monobrominated azure B) were the photosensitizers used for antimicrobial photodynamic therapy. They were loaded into the nanocarriers and their antibacterial and oxidative activities were evaluated. The polyacrylamide nanoparticles were evaluated and prepared by inverse microemulsion polymerization. The nanoparticles obtained were characterized by size, polydispersity index, and zeta potential analysis. The Dynamic Light Scattering indicated that the diameter of the particle (z-average) was optimal, with an acceptable polydispersity index. The antibacterial activity of the polyacrylamide nanoparticles loaded with photosensitizers was evaluated against Staphylococcus aureus. Both photosensitizers loaded into the nanoparticles showed great potential as antibacterial agents since they suppressed the bacterial growth. The maximum percentage of growth reduction was 35.5% (>2 Log CFU/mL), with the monobrominated azure B loaded into the nanocarrier with 2 hydroxyethyl methacrylate against methicillin resistant S. aureus. The improved physicochemical and photophysical properties of these photosensitizers were accompanied by a significant increase in the photoantimicrobial action, in conventional-sensitive and-methicillin resistant S. aureus. The results obtained clearly suggest that polyacrylamide nanoparticles loaded with photosensitizers have great potential for further application in antimicrobial photodynamic therapy.Fil: Gualdesi, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Aiassa, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Vara, Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Alvarez Igarzabal, Cecilia Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos y Química Aplicada. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos y Química Aplicada; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentin

Infección por hongos filamentosos en pacientes quemados: estudio retrospectivo.

Antecedentes: Las infecciones son las complicaciones más frecuentes en los pacientes quemados. Los hongos filamentosos ocupan un lugar incierto dentro de las estadísticas nosocomiales; existen escasos datos sobre la prevalencia de las mismas, los agentes causales y el desenlace de los que las padecen. Objetivos: El objetivo fue evaluar  prevalencia de la infección por hongos filamentosos (IHF) en pacientes internados en la unidad terapia intensiva de quemados (UTIQ), revisar algunas características clínicas, epidemiológicas, microbiológicas y evolución de estos pacientes;  conocer  la frecuencia y distribución de las especies fúngicas aisladas.Materiales y métodos: Estudio retrospectivo y descriptivo. Se incluyeron todos los individuos que ingresaron a la terapia intensiva de pacientes quemados (2012-2015), con cultivo positivo para hongos filamentosos en biopsias de piel y escaras.Resultados: Un total de 168 de pacientes ingresaron en la unidad intensiva de quemados  en un período de 3 años. El 17% desarrolló IHF (29/168) y el 90% fueron grandes quemados.  Se recuperaron 29 hongos filamentosos (93% de exámenes microscópicos positivos): Aspergillus spp (24%), Fusarium spp (14%), Mucor spp (3%) y diversos géneros de hongos negros (58%).  El 95% presentó entre 1 y 4 infecciones bacterianas además de la infección fúngica en piel. El 24% de los pacientes con IHF falleció. La causa de la muerte fue shock cardiogénico irreversible con falla multiorgánica.Conclusiones: La infección por hongos filamentosos se presentó en el 17% de los pacientes quemados. Los principales hongos causantes de infección  fúngica fueron dematiáceos. La mortalidad entre los pacientes fue del 24%,  siendo Fusarium el hongo  hallado en el mayor número de muertes (50%)

Evaluation of physicochemical properties and bacterial photoinactivation of phenothiazine photosensitizers

We report herein the physicochemical properties and antimicrobial activity of a new monobrominated derivative of Azure B and its parent compound. These dyes are used as photosensitizers for photodynamic therapy and photodynamic antimicrobial chemotherapy. Relevant pharmaceutical properties (pKa, chemical and photochemical stability, and in vitro antimicrobial activity) were determined. A UV-visible spectrophotometry method was developed and validated according to the International Conference on Harmonization (ICH) guidelines for use in stability indicating studies and determination of the acid dissociation constant of Azure B and its monobrominated derivative. The results showed that both dyes were chemically stable. In addition, bromination of the phenothiazine dye decreased its photochemical stability and pKa value without affecting the ionization rate at physiological pH. The analytical parameters for validation of the method were linearity (r2 > 0.9981), limit of detection (LOD) (0.2-0.9 μM), limit of quantification (LOQ) (0.6-2.7 μM), and intra-day precision (0.76-1.40%) expressed as relative standard deviation (RSD). Recoveries ranging from 99.5 to 100.9% were obtained for the two dyes. Thus, this method provides a simple, sensitive, accurate, and precise assay for the determination of all compounds. The effect of photosensitizer concentration and visible irradiation time on lethal photosensitization against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, and Escherichia coli was investigated. Both photosensitizers were active against the evaluated bacteria. However, the new monobrominated derivative was more effective than its predecessor and managed to eradicate these microorganisms by using different doses of the dye and light. In other words, a lower concentration of AzBBr and irradiation time were required to cause bacterial death equal to or greater than its precursor. The photodynamic efficacy of the two photosensitizers presented the following order: S. aureus > E. coli > P. aeruginosa. These studies indicated that the tested dyes satisfy the conditions of potential photosensitizers in terms of physicochemical and antimicrobial properties.Fil: Vara, Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Gualdesi, María Soledad. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; ArgentinaFil: Aiassa, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentin

Separation, Purification, and Characterization of Analogues Components of a Commercial Sample of New Fuchsin

New Fuchsin (NF), also known as Magenta III, has potential applications in photodynamic therapy. The commercial product labeled NF contains two other dye components in different proportions, Magenta II and Magenta I (Rosaniline). The proportions of NF, Magenta II, and Magenta I determined by reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) in the commercial sample used were 71.6 +/- 0.4%, 25.2 +/- 0.2%, and 2.8 +/- 0.1% (n = 7), respectively. The isolation, purification, and characterization of commercial NF dye components were carried out applying different techniques, such as preparative column liquid chromatography (PCLC), thin layer chromatography (TLC), RP-HPLC, absorption spectrophotometry, nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR), electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS), and tandem electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS-MS). After separation and isolation, the degree of purity obtained for NF compound was higher than 95% and 92% for Magenta II and Magenta I compounds, respectively. Therefore, it is essential to ensure a high degree of purity of these dyes as raw material to obtain new drugs intended for therapeutic treatments.Fil: Montes de Oca, María Noel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Aiassa Martínez, Ivana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba; ArgentinaFil: Urrutia, María Noel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Arguello, Gerardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Thionine in the design of new photosensitizers: Bromination and vehiculization in polymeric nanoparticles

To face the challenges of optimizing the properties of the photosensitizers currently used in the photodynamic inactivation of various microorganisms, we propose the bromination of thionine and the use of polymeric nanoparticles for the entrapment of halogenated derivative. Within this framework, the dibrominated derivative of thionine was synthesized and characterized. This new compound showed a high chemical and photochemical stability. In addition, bromination decreased the ionization constant and increased the aggregation of this photosensitizer in an aqueous medium. For this reason, the new compound showed a lower quantum yield of singlet oxygen production. However, the dibrominated thionine showed greater cell damage after photodynamic treatment. In order to prevent or decrease the aggregation of the photosensitizer in an aqueous medium, it was vehiculized in different polymeric polyacrylamide nanoparticles. In general, the vehiculization of the photosensitizers (PSs) in nanosized systems increased the production of singlet oxygen and enhanced their phototoxic activity against the microorganisms evaluated (methicillin-sensitive Staphylococcus aureus and methicillin resistant Staphylococcus aureus). The nanoparticle formed with the monomer 2 hydroxyethyl methacrylate(HEMA) showed the best photodynamic efficacy. The results obtained clearly suggest that polyacrylamide nanoparticles loaded with photosensitizers of the thiazine family have great potential for further application in antimicrobial photodynamic therapy.Fil: Gualdesi, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Vara, Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Aiassa, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Alvarez Igarzabal, Cecilia Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos y Química Aplicada. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos y Química Aplicada; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

Polymeric micelles as a strategy to enhance the phototoxic efficacy of phenazine photosensitizers

Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) is a promising therapeutic strategy for treating bacterial infections resistant to conventional antibiotics. In the search for ideal photosensitizers (PSs), we became interested in phenazine compounds, such as Neutral Red (NR) and its halogenated derivative (NRBr). Although they have shown good results in the inactivation of Staphylococcus aureus in their free form, they have some undesirable properties that could be overcome by using drug delivery systems. In this work, we propose the use of polymeric micelles for the development of nanophotosensitizers from Pluronic P123 and F108. The micellar systems developed had a size close to 30–40 nm and allowed us to obtain seven nanophotosensitizers. All of them increased the chemical stability of NRBr and did not modify the stability of NR, which was already stable in buffer solution (pH = 7.4). Furthermore, the Pluronic micelles markedly decreased the aggregation of PSs and increased their photochemical reactivity. The nanophotosensitizers prepared from Pluronic P123 micelles (5% wt/vol) gave the best results and optimized the properties of NR and NRBr. In agreement with that, the new nanophotosensitizers of P123-5% showed better photodynamic inactivation of NR and NRBr against methicillin resistant S. aureus than the free photosensitizers and the other micellar systems. Both photosensitizers loaded into the P123-5% eradicated this microorganism using 30 min of irradiation. Therefore, it is concluded that these polymeric micelles are an excellent alternative for the vehiculization of PSs and that their combination with NR and NRBr enhances the photodynamic efficiency for their use in aPDT.Fil: Vara, Jimena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Gualdesi, María Soledad. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Aiassa, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Fernández, Mariana Adela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Orgánica; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

New poly(acrylamide) nanoparticles in the development of third generation photosensitizers

There are promising data on the use of poly(acrylamide) nanoparticles (PAA-NPs) in the development of third generation photosensitizers for application in antimicrobial photodynamic therapy. These nanoparticle delivery systems are suitable for biological applications and have potential for drug delivery due to their biocompatibility, chemical flexibility, easy preparation and low cost. The objective of this work was to obtain new PAA-NPs for the vehiculization of the monobrominated derivatives of Azure B (AzBBr) and Neutral Red (NRBr). These two dyes were found to have promising properties as photosensitizers. However, the use of nanotechnology was required to overcome difficulties in solubility, aggregation and stability in order to optimize their photodynamic efficiency. The combination of different monomers and crosslinkers allowed us to develop two new PAA-NPs. These systems were loaded with AzBBr and NRBr and characterized according to their morphology, size, polydispersity index and zeta potential. The new third generation photosensitizers showed better photochemical reactivity, chemical stability and photodynamic efficacy against Gram-positive and Gram-negative bacteria than the free photosensitizers. The use of this vehiculization strategy improved the properties of the second generation photosensitizers (AzBBr and NRBr) studied. This improvement in their properties makes them good candidates for potential phototherapeutic applications against numerous pathologies.Fil: Gualdesi, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Vara, Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Aiassa, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Alvarez Igarzabal, Cecilia Ines. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos y Química Aplicada. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos y Química Aplicada; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentin

Halogenated phenotiazine as photoantimicrobial agent against Staphylococcus aureus. Evaluation of the vehiculization in polymeric nanoparticles

A thiazine derivative of AzB, the monoiodinated Azure B (AzBI), was designed, characterized, chemical and photochemically evaluated, and screened for antibacterial activity. The monoiodinated derivative showed better chemical and photochemical properties compared to the leading compound Azure B (AzB). Also, AzBI exhibited good antibacterial activity against methicillin-sensitive Staphylococcus aureus (MSSA) ATCC 29213 and methicillin-resistant S. aureus (MRSA) ATCC 43300. The assayed compound represents a promising structure for the development of a new synthetic photosensitizer with improved properties and biological activity. Based on the results obtained for AzBI, this compound was loaded in the polymeric nanoparticles synthesized by our working group in order to improve some of its physicochemical properties. In this way, it was possible to successfully load the monoiodinated derivative and yield a promising drug transport system. The latter presented better characteristics and antimicrobial activity than AzBI against the different strains tested. All these results make AzBI an excellent candidate for application in photodynamic therapy.Fil: Gualdesi, María Soledad. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Vara, Jimena. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Pereyra, Luciana. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Aiassa, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba; ArgentinaFil: Alvarez Igarzabal, Cecilia Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Orgánica; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Universidad Nacional de Córdoba; Argentin

Study on the interaction of Basic Violet 2 with hydroxypropyl-β- cyclodextrin

The formation of the inclusion complexes of Basic Violet 2 (New Fuchsin) with hydroxypropyl-β-cyclodextrin (HP-β-CD) was studied by UV-Vis absorption and fluorescence spectroscopy. The binding constants of the inclusion complexes, KB, were obtained considering the maximum shift of the absorption spectra, the absorption areas deconvoluted as the sum of two gaussian constituents, the relative fluorescence quantum yield and the fluorescence maximum shift. The values achieved were 2.7 × 103 M -1, 0.95 × 103 M-1 and 2.8 × 103 M-1, 2.2 × 103 M-1, respectively. Ab-initio calculations using B3LYP/6-31G level of approach and the natural bond orbital (NBO) analysis were performed to gain a deeper understanding of the inclusion phenomena. The result showed a high complexation in aqueous media. © 2011 Elsevier Ltd. All rights reserved.Fil: Aiassa Martínez, Ivana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba; ArgentinaFil: Montes de Oca, María Noel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; ArgentinaFil: Iriarte, Ana Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba; ArgentinaFil: Ortiz, Cristina Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; ArgentinaFil: Arguello, Gerardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Instituto de Investigaciones en Físico-química de Córdoba; Argentin