Cultivos de células de nervio ciático y de ganglio de la raíz dorsal de ratón adulto

Las células de Schwann (CS) son la glía de sistema nervio periférico. El diseño de prótesis nerviosas se ha centrado en la producción de CS autólogas cultivadas a partir de nervios periféricos (NP) y de ganglios de la raíz dorsal (GRD). Muy poca literatura reporta cultivo de células perineurales (CP) y fibroblastos endoneurales (FE), y no son consideradas como elementos a incluir en una prótesis.En este trabajo, se describe la importancia de la microdisección del nervio ciático y de los GRD para obtener cultivos de CS, FE y CP con 98% de purificación. Las CS crecen sobre diferentes soportes, con y sin mitógenos. Se obtuvo un porcentaje de CS elevado cuando se elimina el epineuro y perinuero de los NC y la cápsula de los GRD antes de la disociación enzimática, comparado a 70% (p≤0,003 N=4 experimentos) sin microdisección u 80% sin epineuro (p≤0,6 N=4 experimentos). Los FE se adhieren preferencialmente en las primeras 24 h y 20% de suero favorece su crecimiento. En el primer pasaje, son 100% CS o FE, siendo confluentes a los 6 y 8 días respectivamente. Las CP o de la cápsula de GRD no se disocian y no crecen en sub-cultivos, únicamente crecen a partir de explantes de perineuro; no forman monocapa sino una lámina de múltiples capas celulares.En conclusión, la microdisección del GRD y del NC es indispensable para obtener en pocos días CS, FE y CP de animales adultos en cultivos altamente purificados.Palabras Claves: Nervio ciático (NC), ganglio de la raíz dorsal (GRD), células de Scwhann (CS), células perineurales (CP), fibroblastos endoneruales (FE)

La onda de calcio en células vegetales

El calcio es un nutriente esencial para las plantas, se encuentra involucrado en procesos de desarrollo y de respuesta a factores bióticos y abióticos. Numerosas señales modifican la concentración de calcio en el citoplasma, núcleo, retículo endoplásmico o plastídios. El incremento del calcio en el citosol es rápidamente disminuido, pero en el lapso de incremento, se forman innumerables y complejas cascadas de señalización que conllevan a la respuesta celular. Este nota expone los mecanismos implicaciones de la entrada del calcio en las células vegetales.Calcium is an essential nutrient for plants; it is involved in developmental processes and in responses to biotic and abiotic factors. Several signals that modify the calcium concentration in the cytoplasm, endoplasmic reticulum, nucleus and/or plastids have been observed. These changes in the calcium concentration in the cell interior are rapidly returned to basal levels, in the meantime, innumerable and complex signaling cascades. This note exposes the mechanisms of calcium transport through the cell membranes of the entrance of calcium in the plant cells

Aislamiento y cultivo de fibroblastos endoneurales

Los fibroblastos son tejido-específicos, normalmente degradan y sintetizan constantemente los diferentes elementos de la matriz extracelular (MEC), pero también remodelan los tejidos en reparación. Los fibroblastos dérmicos son los más estudiados in vitro e in vivo y se emplean para regenerar la MEC dérmica que sirve de apoyo para la regeneración de la epidermis. La confluencia de los fibroblastos dérmicos o periodontales se hace entre los ocho y diez días de cultivo. En la regeneración de nervios periféricos lesionados, las células de Schwann secretan factores de crecimiento neurotróficos y neurotrópicos y algunos elementos de la MEC necesarios para la regeneración, motivo por el cual son las más estudiadas y empleadas. Hasta el momento los fibroblastos endoneurales (FE) no se han tenido en cuenta como elemento importante en la regeneración nerviosa porque en ocasiones forman fibromas que impiden la regeneración del nervio. Pero hay indicios, que pueden jugar un papel importante adicional al remodelar la MEC, secretando metaloproteínas que además convierten el preNGF (Nerve Growth Factor) secretado por las células de Schwann en NGF activo que promueve la regeneración de las neuritas. El objetivo de este trabajo fue aislar y lograr el cultivo de FE purificados de nervios ciáticos de ratón adulto. Se desarrollaron diferentes métodos de disección y digestión para obtener los cultivos primarios de FE puros y estudiarlos como se ha hecho con células de Schwann. Se logró aislar selectivamente FE, alcanzado la confluencia entre el cuarto y el quinto día de cultivo primario en monocapa. La obtención de una población de FE permitirá estudios en cultivos tridimensionales y en prótesis, para desarrollar y determinar nuevas alternativas en la regeneración de nervios periféricos.Fibroblasts which are tissue-specific, constantly degrade and synthesize the different elements of the extra-cellular matrix (ECM), while at the same time remodel tissues that are being repaired. Dermal fibroblasts are well studied both in vitro and in vivo, and are used to regenerate dermal EMC which in turn supports the regeneration of the epidermis. Confluence of dermal or periodontal fibroblasts takes place between 8 and 10 days of culture. In the process of regeneration of damaged peripheral nerves, Schwann's cells secrete neurotrophic and neurotropic growth factors and some of the EMC elements needed for regeneration to take place, which makes them the most studied and used cells in culture. So far, endoneural fibroblasts (EF) have not been considered as important elements in nerve regeneration, mainly because they may occasionally form fibromes that hinder regeneration. But there is evidence that they may play a role in the remodeling of the EMC, through the secretion of metalloproteins that modify the pre-Nerve Growth Factor (preNGF) secreted by Schwann's cells into active NGF, which promotes neurites regeneration. The aim of this study was is to isolate EF from sciatic nerves taken from mature rats, and to obtain them in purified culture. A number of methods of dissection and digestion were developed to obtain primary pure EF cultures as well as to study them in the way Schwann's cells have been studied. Selective isolation of EF was accomplished, reaching confluence between the fourth and the fifth day in monolayer primary culture. Producing a population of EF will make it possible to carry out studies in tridimensional culture and in prosthesis in order to define and develop new alternatives for the regeneration of peripheral nerves

Receptores GABAA (ácido γ-aminobutírico) y su relación con la dependencia al alcohol

Alcohol dependence syndrome is a multifactorial, environmental, cultural, social and genetic disease. There are innumerable investigations that have attempted to elude the possible neurobiological mechanisms of this syndrome to understand the physiological and behavioral changes of the individual, so that pharmacological alternatives can be provided that help control this type of dependence. This review describes the role of neurotransmission involved in alcohol dependence syndrome, mainly related to glutamate, dopamine, opioids and especially γ-aminobutyric acid (GABA), because the activation of the GABAA receptor ( Chlorine channel receptor) triggers an inhibitory effect at the neuronal level, and in alcoholic individuals it presents hypofunction, which does not allow it to modulate the recurrent neuronal excitation resulting in a state of disinhibition / hyperexcitation typical of alcoholics. On the other hand, the genes that code for the GABAA receptor subunits located on chromosomes 4 and 15 have been associated with alcoholism, as there are strong relationships between the binding imbalance between these genes and the phenotype of β waves in electroencephalograms of individuals with alcohol dependence syndrome and their descendants.El síndrome de dependencia al alcohol es una enfermedad multifactorial, ambiental, cultural, social y genética. Son innumerables las investigaciones que han intentado elu- cidar los posibles mecanismos neurobiológicos de este síndrome para entender los cambios fisiológicos y comportamentales del individuo, de tal manera que se puedan brindar alter- nativas farmacológicas que ayuden a controlar este tipo dependencia. Esta revisión describe el papel de la neurotransmisión involucrada en el síndrome de de- pendencia al alcohol, principalmente la relacionada con el glutamato, la dopamina, los opioides y en especial el ácido γ-aminobutírico (GABA), porque la activación del receptor GABAA (receptor canal de cloro) desencadena un efecto inhibitorio a nivel neuronal, y en individuos alcohólicos presenta hipofunción, la cual no le permite modular la recurrente excitación neuronal obteniendo como resultado un estado de desinhibición/hiperexcitación típico de alcohólicos. Por otra parte, los genes que codifican para las subunidades de los receptores GABAA ubicados en los cromosomas 4 y 15 han sido asociados con alcoholismo, al presentarse fuertes relaciones entre el desequilibrio de unión entre estos genes y el fenotipo de las ondas β en los electroencefalogramas de los individuos con el síndrome de dependencia al alcohol y sus descendientes

Receptores GABAA (ácido γ-aminobutírico) y su relación con la dependencia al alcohol

The alcohol dependence syndrome is a multifactorial, enviromental, cultural, social, and genetic dissease. The investigations are countless that have tried to elucidate the possible neurobiologic mechanisms of this syndrome to understand the individual’s physiologic and behavioral changes, in such way that it can be offered pharmacological alternatives that help to control this type of dependence. This revision describes the neurotransmisi´on’s paper involved in the dependence syndrome to the alcohol, mainly the related with the glutamato, the dopamina, the opioides and especially the γ-aminobutyric acid (GABA), because the activation of GABAA receptor (channel of chlorine receptor ) it unchains an inhibitory effect at level neuronal, in alcoholic people the activation causes hypofunction which does not allow to modulate recurrent excitement, getting as result a no-inhibition/hyperexcitation state very common in alcoholics. By other hand, the genes that code for the subunidades of the GABAA receptors located in the chromosomes 4 and 15 has been associated with alcoholism, as finding strong relationships among the disequilibrium of union between these genes and the fenotipo of the waves β in the electroencephalograms of the individuals with the alcohol dependence syndrome and their descendants. According to the investigations in the topic, finally we propose the possible vias and theircontrol mechanisms implied in the alcohol dependence syndrome.PACS: 87.19.L-El síndrome de dependencia al alcohol es una enfermedad multifactorial, ambiental, cultural, social y genética. Son innumerables las investigaciones que han intentado elu- cidar los posibles mecanismos neurobiológicos de este síndrome para entender los cambios fisiológicos y comportamentales del individuo, de tal manera que se puedan brindar alter- nativas farmacológicas que ayuden a controlar este tipo dependencia.Esta revisión describe el papel de la neurotransmisión involucrada en el síndrome de de- pendencia al alcohol, principalmente la relacionada con el glutamato, la dopamina, los opioides y en especial el ácido γ-aminobutírico (GABA), porque la activación del receptor GABAA (receptor canal de cloro) desencadena un efecto inhibitorio a nivel neuronal, y en individuos alcohólicos presenta hipofunción, la cual no le permite modular la recurrente excitación neuronal obteniendo como resultado un estado de desinhibición/hiperexcitación típico de alcohólicos. Por otra parte, los genes que codifican para las subunidades de los receptores GABAA ubicados en los cromosomas 4 y 15 han sido asociados con alcoholismo, al presentarse fuertes relaciones entre el desequilibrio de unión entre estos genes y el fenotipo de las ondas β en los electroencefalogramas de los individuos con el síndrome de dependencia al alcohol y sus descendientes.De acuerdo a las investigaciones en el tema, finalmente proponemos las posibles vías y sus mecanismos de control implicados en el síndrome de dependencia al alcohol.PACS: 87.19.L

Estudio morfológico del cultivo a largo plazo de

La unidad morfológica y funcional de la glándula tiroides es el folículo, estructura ovoide cerrada, constituida por una capa de células cúbicas (tirocitos) que encierran un lumen lleno del coloide secretado por ellas. En cultivo, tanto la estructura como la función del folículo se pierden rápidamente en las primeras 24 horas. Sin embargo, si se cultivan folículos cerrados de tiroides de rata conservan la arquitectura folicular, la morfología del tirocito y la función hasta la síntesis de hormonas tiroides de manera similar a la glándula in vivo. En este trabajo describimos el aislamiento y cultivo de folículos porcinos cerrados y su análisis morfológico. Los folículos se aíslan por digestión enzimática y disociación mecánica del parénquima tiroideo, luego se cultivan sobre agarosa con y sin hormona tirotrópica o tirotropina (1 mU/ml, TSH). El tejido de tiroides porcino obtenido tiene las mismas características de una glándula hipotiroidea in vivo, un epitelio casi plano, retículo endoplásmico rugoso (RER) exiguo, complejo de Golgi (CG), y microvellosidades escasas y cortas. Los folículos cultivados sin TSH conservan la forma ovoide y el coloide en su interior, y la misma ultra-estructura del tejido in vivo, RER y CG muy escasos, pero con el tiempo de cultivo aumenta la longitud de la microvellosidades y el espesor del epitelio. En presencia de TSH el epitelio se hipertrofia desde el primer día y las cavidades foliculares se reducen considerablemente. Se demuestra que folículos cerrados de tiroides durante ocho días (d) de cultivo conservan su morfología con y sin TSH. Además, estos responden al estímulo de TSH disminuyendo su cavidad folicular y aumentando el espesor del epitelio folicular

The Schwann Cell

The neurones are the cells of the nervous system and are surrounded and protected by glials cells. In the peripheral nervous system the Schwann cells (SC) are the glia of the nerves. The prolongations or neurites (axon and dendrite) of the neurones bodies are surrounded by the SC to form nervous fibers. The intimate relationship between the SC and the neurite is determined during embryonic development. The SC is essential for the correct migration of the neurites towards their final destination, but the neurites induce SC maturation as well. This interaction between SC and neurite is determined by paracrine factors and membrane receptors of the two interacting cells, inducing the differentiation of SC in myelinic and non-myelinic, determining the correct number of SC necessary to surround the neurites, the adequate formation of myelin and the correct relationships of the CS with the extracellular matrix. In this way the nervous fiberinnervating or receiving stimuli in peripheral tissues is formed. The SC has also a key role in the regeneration of the neurites after damage of a peripheral nerve