Papel de los haplogrupos mitocondriales en la patología artrósica : influencia de la selección climática/

[Resumen] La artrosis es la enfermedad reumatológica más común y se caracteriza por una degeneración del cartilago articular junto con el resto de estructuras que forman parte de la articulación. Su prevalencia es elevada y se espera que se incremente notablemente en las próximas décadas debido al envejecimiento de la población. Es la principal causa de incapacidad laboral y una de las principales razones de consulta en medicina general. La artrosis conlleva unos elevados costes económicos tanto desde el punto de vista laboral, como médicos y de calidad de vida. Es una enfermedad compleja y multifactorial en la que interactúan tanto factores ambientales como genéticos. En los últimos años se ha puesto de manifiesto la implicación de la mitocondria en la artrosis a través de diferentes estudios. A pesar de que el metabolismo energético del condrocito es fundamentalmente glucolítico, la mitocondria tiene un papel relevante en la artrosis no solo por la aportación energética que hace a través del proceso de fosforilación oxidativa en la producción de Arp, sino que además la mitocondria constituye la principal fuente de generación de especies reactivas de oxígeno, además de regular los mecanismos de apoptosis en el condrocito, único tipo celular presente en el cartilago, entre otras funciones celulares. La mitocondria posee su propio material genético que, debido a la adaptación a las condiciones climáticas y ambientales sufridas a lo largo de las diferentes migraciones de la especie humana desde su origen africano, ha adquirido una serie de mutaciones estables que permiten caracterizar a las poblaciones humanas según su origen geográfico. Los diferentes conjuntos de polimorfismos característicos de cada una de estas poblaciones han dado lugar a los haplogrupos mitocondriales. Debido a su origen adaptativo a las condiciones ambientales, cada haplogrupo presenta unos mecanismos y funciones metabólicas diferentes. Estas diferencias se han relacionado con la predisposición a padecer diferentes enfermedades, entre las que se encuentra la artrosis. El objetivo de esta tesis es replicar los resultados obtenidos por RegoPérez et al. sobre la influencia de los haplogrupos mitocondriales en la prevalencia de la artrosis en diferentes cohortes mundiales, así como evaluar la participación de los haplogrupos en la progresión de la enfermedad. El primer trabajo de esta tesis analiza la implicación de los haplogrupos en la artrosis comparando los porcentajes de prevalencia en una cohorte del norte de España con los de una cohorte del Reino Unido. Los resultados obtenidos mostraron que existía una asociación diferencial entre las frecuencias de los haplogrupos de ambas cohortes con la artrosis. De manera que, en la cohorte española es el haplogrupo J el que actúa como factor protector frente a la artrosis, mientras que en la cohorte británica es el haplogrupo T el que muestra una asociación estadísticamente significativa como factor protector de artrosis. En el segundo trabajo de esta tesis se analizó la relación de los haplogrupos con la progresión en artrosis. Para ello se utilizaron los datos radiográficos de una cohorte de pacientes del hospital Universitario de A Coruña considerando progresión radiográfica como el incremento en el grado KL durante un periodo de seguimiento de al menos 36 meses. Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto la influencia de los haplogrupos sobre la progresión en artrosis, siendo los pacientes pertenecientes al clúster TJ los que presentaban una progresión más lenta de la patología mientras que los portadores del haplogrupo H mostraron una mayor predisposición a alcanzar la prótesis articular .. El tercer trabajo consistió en replicar los resultados obtenidos en el segundo trabajo en una amplia y bien caracterizada cohorte Norteamericana de pacientes artrósicos de rodilla pertenecientes a la Osteoarthritis Initiative. En este estudio se analizó la influencia de los haplogrupos en la progresión de la enfermedad a través de las magnitudes (grado KL, presencia de osteofitos, esclerosis subcondral y la reducción de espacio articular) obtenidas de las imágenes radiográficas de las rodillas de los pacientes incluidos en el estudio. Asimismo, también se estudió la degradación estructural de la articulación mediante las medidas del grosor y el volumen de cartílago en las diferentes zonas que componen la rodilla, obtenidas a partir de imágenes de resonancia magnética. Los resultados mostraron que el haplogrupo T era el que presentaba una progresión radiográfica más lenta que el resto de haplogrupos así como una menor pérdida de grosor y volumen de cartílago en el tiempo en diferentes zonas del compartimento medial de la rodilla. Para finalizar se realizó también un estudio sobre la capacidad de los haplogrupos para distinguir entre diferentes fenotipos de pacientes artrósicos analizando los niveles en suero de algunos de los principales marcadores moleculares de artrosis. Los resultados obtenidos permitieron distinguir claramente dos fenotipos de artrosis; de este modo, los pacientes con mayores niveles séricos de marcadores catabólicos fueron los pacientes portadores del haplogrupo H frente a los pacientes portadores del haplogrupo J. Los resultados de este trabajo mostraron que los haplogrupos mitocondriales son posibles biomarcadores complementarios de artrosis con aplicación en la práctica clínica. En resumen, los resultados de los 4 trabajos que forman parte de esta tesis ponen de manifiesto la influencia de los haplogrupos mitocondriales en la patología artrósica. Las diferentes asociaciones encontradas entre las distintas cohortes analizadas podrían reflejar la adpatación de los haplogrupos a los diferentes patrones climáticos.[Resumo] A artrose é a enfermidade reumatolóxica máis común e caracterízase por unha dexeneración da cartilaxe articular xunto co resto de estruturas que forman parte da articulación. A súa prevalencia é elevada e esperase que se incremente notablemente nas próximas décadas debido o envellecemento da poboación. É a principal causa de incapacidade laboral e unha das principais razóns de consulta na medicina xeral. A artrose leva consigo uns elevados custos económicos tanto dende o punto de vista laboral como médico e de calidade de vida. É unha enfermidade complexa e multifactorial na que interactuan tanto factores ambientais como xenéticos. Nos últimos anos púxose de manifesto a implicación da mitocondria na artrose a través de diferentes estudos. A pesar de que o metabolismo enerxético do condrocito é fundamentalmente glucolítico, a mitocondria ten un papel relevante na amose non só pola achega enerxética que fai a través do proceso de fosforilación oxidativa na produción de ATP, senón que ademais a mitocondria constitúe a principal fonte de xeración de especies reactivas de oslxeno, ademais de regular os mecanismos de apoptose no condrocito, único tipo celular presente na cartilaxe, entre outras funcións celulares. A mitocondria posúe ademais o seu propio material xenético que, debido á adaptación ás condicións climáticas e ambientais sufridas ao longo das diferentes migracións da especie humana dende a súa orixe africana, adquiriu unha serie de mutación s estables que permitiron caracterizar as poboacións humanas segundo a súa orixe xeográfica. Os diferentes conxuntos de polimorfismos característicos de cada unha de stas poboaci6ns de ron lugar aos haplogrupos mitocondriais. Debido á súa orixe adaptativa ás condicións ambientais, cada haplogrupo presenta uns mecanismos e funcións metabólicas diferentes. Estas diferenzas relacionáronse coa predisposición a padecer diferentes enfermidades, entre as que se en contra a artrose. O obxectivo desta tese é replicar os resultados obtidos por Rego-Pérez et al. sobre a influencia dos haplogrupos mitocondriais na prevalencia da artrose en diferentes cohortes mundiais, así como avaliar a participación dos haplogrupos na progresión da enfermidade. O primeiro traballo desta tese analiza a implicación dos haplogrupos na artrose comparando as porcentaxes de prevalencia nunha cohorte do norte de España cos dunha cohorte do Reino Unido. Os resultados obtidos mostraron que existía unha asociación diferencial entre as frecuencias dos haplogrupos de ambas as dúas cohortes coa artrose. De maneira que, na cohorte española é o haplogrupo laque actúa como factor protector fronte á artrose, mentres que na cohorte británica é o haplogrupo T o que mostra unha asociación estatísticamente significativa como factor protector de artrose. No segundo trabaIlo desta tese analizouse a relación dos haplogrupos coa progresión en artrose. Para iso utilizáronse os datos clínicos e radiográficos dunha cohorte de pacientes do hospital Universitario da Coruña avaliando a progresión radiográfica a través do incremento no grao KL durante un período de seguimento de polo menos 36 meses. Os resultados obtidos puxeron de manifesto a influencia dos haplogrupos sobre a progresión en artrose, senda os pacientes pertencentes ao c1úster TI os que presentaban unha progreslOn máis lenta da patoloJÓa, mentres que os portadores do haplogrupo H amos aro n unha maior predisposición a alcanzar a prótese articular. O terceiro traballo desta tese consistiu en replicar os resultados obtidos no segundo traballo nunha ampla e ben caracterizada cohorte norteamericana de pacientes artrósicos de xeonllo pertencentes á Osteoarthritis lnitiative. Neste estudo analizouse a influencia dos haplogrupos na progresión da enfermidade a través das magnitudes (grao KL, presenza de osteofitos, esclerose subcondral e a redución de espazo articular) obtidas das imaxes radiográficas dos xeonllos dos pacientes incluidos no estudo. Asimesmo tamén se estudou a degradación estrutural da articulación mediante as medidas do grosor e o volume de cartilaxe nas diferentes zonas que compoñen o xeonllo, obtidas a partires de imaxes de resonancia magnética. Os resultados mostraron que o haplogrupo T era o que presentaba unha progresión radiográfica máis lenta que o resto de haplogrupos así como unha menor perda de grosor e volume de cartilaxe no tempo en diferentes zonas do compartimento medial do xeonllo. Para finalizar realizo use tamén un estudo sobre a capacidad e dos haplogrupos para distinguir entre diferentes fenotipos de pacientes artrósicos analizando os niveis en soro dalgúns dos principais marcadores moleculares de artrose. Os resultados obtidos permitiron distinguir claramente dous fenotipos de artrose, deste modo, os pacientes con maiores niveis sérico s de marcadores catabólicos foron os pacientes portadores do haplogrupo H fronte aos pacientes portadores do haplogrupo j. Os resultados deste traballo mostraron que os haplogrupos mitocondriais son posibles biomarcadores complementarios de artrose con aplicación na práctica clínica. En resumo, os resultados dos 4 traballos que forman parte desta tese poñen de manifesto a influencia dos haplogrupos mitocondriais na patoloxía artrósica. As diferentes asociacións atopadas entre as distintas poboacións analizadas poderían estar a reflexar a adaptación dos haplogrupos aos diferentes patróns climáticos.[Abstract]Osteoartritis (DA) is the most common rheumatic disease related to ageing and is characterized by the degeneration of articular cartilage together witb the rest of joint structures. Since DA is an age-related disease, its prevalence and burden are expected to increase substantially in the near future due to demographic changes and ageing population. DA is the leading cause ofwork incapacitation and one ofthe most common reasons for visiting primary care physicians. The economic cost of DA is also particularly high, resulting in a decreased quality oflife, hospitalizations and loss ofproductivity. DA is a multifactorial disease in which both enviromental and genetic factors interact. In recent years a growing body of evidence suggests the implication of the mitochondria in the pathogenesis of DA, even though the glycolitic nature of articular chondrocytes. In addition to the energetic contribution, mitocondria is the main source of reactive oxygen species which lead to cause sigRificant oxidative damage to the cell, and one of the major celular pathways of apoptosis in DA chondrocytes, among other cellular functions. Mitochondria also have their own DNA and, as the result of an adaptative process to the new climatic and environmental conditions suffered throughout the different migrations humans from their African origin, it acquired a series of stable mutations that allow nowadays the characterization of human populations according to their geographical origino So, a particular set of single nucleotide polymorphisms defines each of the mtDNA haplogroups, and these haplogroups represent populations of different ancestral origins. As a result of their enviromental adaptation, each haplogroup shows different mechanisms and metabolic functions. Recent studies provided evidence that mtDNA haplogroups inlluence the penetrance and c1inical severity of modern diseases, including DA. The aim ofthis thesis is to reply the results obtained by Rego-Pérez et al. on the inlluence of the mitochondrial haplogroups in the prevalence of DA in different world cohorts, as well as to evaluate the participation of the haplogrupos in the progression ofthe disease. In the first chapter of this thesis we analyze the frecuency distribution of the mtDNA haplogroups in two DA cohorts of populations from different geograpbic locations. The results obtained showed a differential association among the frequencies of the haplogroups of both cohorts with DA. The haplogroup J appeared underrepresented in DA patients from 5pain when compared with the healthy controls whereas the haplogroup T showed a decreased risk of DA in the UK cohort. In the second work of this thesis we analyzed the inlluence of the mtDNA haplogroups on the radiographic progression of DA. We evaluated the radiographic progression in a well-characterized follow-up cohort of 5panish patients, from Hospital Universitario de A Coruña, defining DA progression as any radiographic worsening of the KL score in a follow up period of not less than 36 months between radiographs. The results showed that patients belonging to cluster TJ had a slower DA progression and patients with mtDNA haplogroup H were more apt to require joint replacement surgery than non-H carriers. In the third work we evaluated the occurrence of the mtDNA haplogroups in the progression of knee DA using the longitudinal data obtained from radiographs and magentic resonance images of knee DA patients belonging to the progression subcohort of the Dsteoarthritis Initiative. In this study the progression criteria was defined as an increase of at least one KL grade in either knee; additionally, we also analyzed the progression ofjoint space narrowing, osteophytes and subchondral sclerosis in the medial compartment where the progression criteria was an increase of at least one DARSI atlas grade in either knee. We also analyzed the cartilage integrity by measuring cartilage thickness and volume through magnetic resonance images from knee DA patients. The results revealed that patients carrying mtDNA haplogroup T show a lower cumulative probability of radiographic progression as well as a significant reduced loss of knee cartilage thickness and volume over tiem in the medial compartment of the knee. Finally, the fourth study aims to assess a mitochondrion-related phenotype in DA patients. We analyzed the serum levels of DA-related biomarlers between DA patients and healthy controls in carriers of haplogroups H and ¡. The results showed two different mitochondrion-related DA phenotypes clearly defined, thereby, patients that carry haplogroup H showed higher levels of catabolic markers of DA than DA patients carrying the mtDNA haplogroup ¡. Briefly, the results of the 4 works that form part of this thesis show the influence of the mitochondrial haplogroups in the DA disease. The different association found among cohorts could reflect the adaptation of the mtDNA haplogroups to different climatic patterns

Mitochondrial DNA (mtDNA) haplogroups influence the progression of knee osteoarthritis: data from the Osteoarthritis Initiative (OAI)

[Abstract] OBJECTIVE: To evaluate the influence of the mtDNA haplogroups on knee osteoarthritis progression in Osteoarthritis Initiative (OAI) participants through longitudinal data from radiographs and magnetic resonance imaging (MRI). METHODS: Four-year knee osteoarthritis progression was analyzed as increase in Kellgren and Lawrence (KL) grade, in addition to increase in OARSI atlas grade for joint space narrowing (JSN), osteophytes and subchondral sclerosis in the tibia medial compartment of 891 Caucasian individuals from the progression subcohort. The influence of the haplogroups on the rate of structural progression was also assessed as the four-year change in minimum joint space width (mJSW in millimetres) in both knees of (n = 216) patients with baseline unilateral medial-tibiofemoral JSN. Quantitative cartilage measures from longitudinal MRI data were those related to cartilage thickness and volume with a 24 month follow-up period (n = 381). RESULTS: During the four-year follow-up period, knee OA patients with the haplogroup T showed the lowest increase in KL grade (Hazard Risk [HR] = 0.499; 95% Confidence Interval [CI]: 0.261-0.819; p<0.05) as well as the lowest cumulative probability of progression for JSN (HR = 0.547; 95% CI: 0.280-0.900; p<0.05), osteophytes (HR = 0.573; 95% CI: 0.304-0.893; p<0.05) and subchondral sclerosis (HR = 0.549; 95% CI: 0.295-0.884; p<0.05). They also showed the lowest decline in mJSW (standardized response means (SRM) = -0.39; p = 0.037) in those knees without baseline medial JSN (no-JSN knees). Normalized cartilage volume loss was significantly lower in patients carrying the haplogroup T at medial tibia femoral (SRM = -0.33; p = 0.023) and central medial femoral (SRM = -0.27; p = 0.031) compartments. Cartilage thickness loss was significantly lower in carriers of haplogroup T at central medial tibia-femoral (SRM = -0.42; p = 0.011), medial tibia femoral (SRM = -0.32; p = 0.018), medial tibia anterior (SRM = +0.31; p = 0.013) and central medial femoral (SRM = -0.19; p = 0.013) compartments. CONCLUSIONS: Mitochondrial genome seems to play a role in the progression of knee osteoarthritis. mtDNA variation could improve identification of patients predisposed to faster or severe progression of the disease.Instituto de Salud Carlos III; CIBERCB06/01/0040Instituto de Salud Carlos III; PI 08/2028Ministerio de Ciencia e Innovación (España); PLE2009-014

Mitochondrial DNA haplogroups influence the risk of incident knee osteoarthritis in OAI and CHECK cohorts: a meta-analysis and functional study

Extended report[Abstract] Objective To evaluate the influence of the mitochondrial DNA (mtDNA) haplogroups in the risk of incident knee osteoarthritis (OA) and to explain the functional consequences of this association to identify potential diagnostic biomarkers and therapeutic targets. Methods Two prospective cohorts contributed participants. The osteoarthritis initiative (OAI) included 2579 subjects of the incidence subcohort, and the cohort hip and cohort knee (CHECK) included 635, both with 8-year follow-up. The analysis included the association of mtDNA haplogroups with the rate of incident knee OA in subjects from both cohorts followed by a subsequent meta-analysis. Transmitochondrial cybrids harbouring haplogroup J or H were constructed to detect differences between them in relation to physiological features including specific mitochondrial metabolic parameters, reactive oxygen species production, oxidative stress and apoptosis. Results Compared with H, the haplogroup J associates with decreased risk of incident knee OA in subjects from OAI (HR=0.680; 95% CI 0.470 to 0.968; p<0.05) and CHECK (HR=0.728; 95% CI 0.469 to 0.998; p<0.05). The subsequent meta-analysis including 3214 cases showed that the haplogroup J associates with a lower risk of incident knee OA (HR=0.702; 95% CI 0.541 to 0.912; p=0.008). J cybrids show a lower free radical production, higher cell survival under oxidative stress conditions, lower grade of apoptosis as well as lower expression of the mitochondrially related pro-apoptotic gene BCL2 binding component 3 (BBC3). In addition, J cybrids also show a lower mitochondrial respiration and glycolysis leading to decreased ATP production. Conclusions The physiological effects of the haplogroup J are beneficial to have a lower rate of incident knee OA over time. Potential drugs to treat OA could focus on emulating the mitochondrial behaviour of this haplogroup.Instituto de Salud Carlos III; CIBERCB06/01/0040-SpainInstituto de Salud Carlos III; RETIC-RIER-RD12/0009/0018Instituto de Salud Carlos III; PI14/01254Instituto de Salud Carlos III; CP12/0319

Primary constitutional MLH1 epimutations: a focal epigenetic event

BACKGROUND: Constitutional MLH1 epimutations are characterised by monoallelic methylation of the MLH1 promoter throughout normal tissues, accompanied by allele-specific silencing. The mechanism underlying primary MLH1 epimutations is currently unknown. The aim of this study was to perform an in-depth characterisation of constitutional MLH1 epimutations targeting the aberrantly methylated region around MLH1 and other genomic loci. METHODS: Twelve MLH1 epimutation carriers, 61 Lynch syndrome patients, and 41 healthy controls, were analysed by Infinium 450 K array. Targeted molecular techniques were used to characterise the MLH1 epimutation carriers and their inheritance pattern. RESULTS: No nucleotide or structural variants were identified in-cis on the epimutated allele in 10 carriers, in which inter- generational methylation erasure was demonstrated in two, suggesting primary type of epimutation. CNVs outside the MLH1 locus were found in two cases. EPM2AIP1-MLH1 CpG island was identified as the sole differentially methylated region in MLH1 epimutation carriers compared to controls. CONCLUSION: Primary constitutional MLH1 epimutations arise as a focal epigenetic event at the EPM2AIP1-MLH1 CpG island in the absence of cis-acting genetic variants. Further molecular characterisation is needed to elucidate the mechanistic basis of MLH1 epimutations and their heritability/reversibility

Pleistocene and Holocene peopling of Jerada province, eastern Morocco: introducing a research project

The Aïn Beni Mathar – Guefaït (ABM-GFT) region in Eastern Morocco is the object of an archaeological, palaeontological, geological and geochronological research project, led by an international team since 2006. The research in this former fluvio-lacustrine basin, roughly 2000 km2, has revealed a significant number of Pleistocene and Holocene sites. Here we introduce the research project, that we conduct in the region, the main issues it aims to address, and the results already obtained

Primary constitutional MLH1 epimutations: a focal epigenetic event

Background: Constitutional MLH1 epimutations are characterised by monoallelic methylation of the MLH1 promoter throughout normal tissues, accompanied by allele-specific silencing. The mechanism underlying primary MLH1 epimutations is currently unknown. The aim of this study was to perform an in-depth characterisation of constitutional MLH1 epimutations targeting the aberrantly methylated region around MLH1 and other genomic loci. Methods: Twelve MLH1 epimutation carriers, 61 Lynch syndrome patients, and 41 healthy controls, were analysed by Infinium 450 K array.&nbsp;Targeted molecular techniques were used to characterise the MLH1 epimutation carriers and their inheritance pattern. Results: No nucleotide or structural variants were identified in-cis on the epimutated allele in 10 carriers, in which inter-generational methylation erasure was demonstrated in two, suggesting primary type of epimutation. CNVs outside the MLH1 locus were found in two cases. EPM2AIP1-MLH1 CpG island was identified as the sole differentially methylated region in MLH1 epimutation carriers compared to controls. Conclusion: Primary constitutional MLH1 epimutations arise as a focal epigenetic event at the EPM2AIP1-MLH1 CpG island in the absence of cis-acting genetic variants. Further molecular characterisation is needed to elucidate the mechanistic basis of MLH1 epimutations and their heritability/reversibility