Incidência e purificação da proteína a em culturas de Staphylococcus aureus isoladas de bovinos

Of 345 cultures of Staphlococcus aureus, crystal-violettyp A, from cattle, 341 (98.8%) were protein A-positive in the hemagglutination test, 182 (52.7%) in the Ouchterlony double immune diffusion test and 180 (52.2%) in the precipitin ring test. Protein A was produced by growing the staphylococci for 18 hours at 37°C in fermenters with respectivelly 15 l caseine-peptone broth. The staphylococci were sedimented by continuous-flow centrifugation at 73,700 x g, washed repeatedly in sterile 0.14M Nacl and extracted with formic acid to obtain protein A. Partial purification of protein A in the formic acid extract could be achieved by absorbing basic proteins without protein A-activity onto cellulose phosphate and subsequente affinity-chromatography with human y-globuline, faction II of Cohn. The final product had an isoelectric point at about pH 4.4, as shown by isolectric focussing.Foram estudadas 345 culturas de Staphylococcus aureus, tipo cristal-violeta A, isoladas de bovinos com mastite, quanto à sua propriedade de produzir proteína A. Destas culturas, 341 (98,8%) se mostraram positivas no teste de hemaglutinação, 182 (52,7%) no teste de Ouchterlony e 180 (52,2%) na prova de precipitação em tubos capilares. Um extrato cru de proteína A obteve-se por extração com ácido fórmico e uma pré-purificação pelo tratamento deste extrato com fosfato de celulose. Proteína A, com um grau de pureza bastante elevado, conseguiu-se pela cromatografia de afinidade. Por focalização isoelétrica determinou-se um ponto isoelétrico ao redor de pH 4,4