Efecto de células alimentadoras inactivadas en el desarrollo in vitro de embriones bovinos.

El estudio pretende mejorar el sistema de cultivo convencional de embriones utilizando co-cultivo con células inactivadas. Para ello se inactivaron células provenientes del istmo y ámpula, con Mitomicina C (40 μg/ml) para inhibir la capacidad de división. Los ovocitos se maduraron in vitro durante 24 h, se fertilizaron durante 18 h en cultivo convencional y se cultivaron durante 7 días en un sistema de co-cultivo con células inactivadas (1.44 x 105 de células/pocillo 500 μl) provenientes del istmo y ámpula, por separado (2.88 x 105 de células/ml). Los resultados se evaluaron con un diseño completamente al azar (DCA) con sub muestra con tres tratamientos, realizando un ANOVA y prueba de Tukey (α = 0,05). Se concluye existe diferencias significativas de las células alimentadoras inactivadas comparada con el control (sin células alimentadoras). En conclusión, el co-cultivo con células alimentadoras inactivadas provenientes del Ámpula e istmo sirven como un soporte en la viabilidad del desarrollo embrionario

Efecto de células alimentadoras inactivadas de dos segmentos del oviducto en el desarrollo in vitro de embriones bovinos

The aim of this study was to evaluate the effect of inactivated feeder cells (feeder layer system) from two segments of the bovine oviduct (isthmus and ampulla) in the in vitro development of bovine embryos. Cell lines from segments of the isthmus and ampulla were generated and subsequently inactivated with mitomycin C (40 μg/ml) to inhibit their ability to divide and eliminate competition for nutrients with embryos. Bovine oocytes were matured in vitro for 24 h and were fertilized for 18 h in conventional culture with Brangus bovine semen. The expected fertilized oocytes were cultured for seven days in the feeder layer system with isthmus and ampulla cells separately at a concentration of 1.44 x 10 5 cells/ml. The best results in the production of in vitro bovine embryos were obtained with ampullary cells (280/84, 30%) in comparison with the isthmus cells (278/75, 26.9%) and the control group (275/73, 26.5%) in a conventional system. It is concluded that the cells of the oviduct can fulfill functions like those that the oviduct fulfills in the in vivo process, improving the in vitro production of embryos.El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de células alimentadoras inactivadas (sistema feeder layer) provenientes de dos segmentos del oviducto bovino (istmo y ámpula) en el desarrollo in vitro de embriones bovinos. Se generaron líneas celulares de segmentos del istmo y ámpula para posteriormente ser inactivadas con mitomicina C (40 µg/ml) para inhibir su capacidad de división y eliminar la competencia por nutrientes con los embriones. Se maduraron in vitro ovocitos bovinos por 24 h y fueron fertilizados por 18 h en cultivo convencional con semen bovino Brangus. Los ovocitos supuestamente fertilizados fueron cultivados por siete días en el sistema feeder layer con células de istmo y ámpula separadamente a una concentración de 1.44 x 105 células/ml. Se obtuvo mejores resultados de producción de embriones bovinos in vitro con células ampulares (280/84; 30%) en comparación con las células del istmo (278/75; 26.9%) y el grupo control (275/73; 26.5%) realizado en un sistema convencional. Se concluye que las células del oviducto pueden cumplir funciones similares a las que cumple el oviducto en el proceso in vivo, mejorando la producción in vitro de embriones

Efecto de células alimentadoras inactivadas en el desarrollo in vitro de embriones bovinos.

El estudio pretende mejorar el sistema de cultivo convencional de embriones utilizando co-cultivo con células inactivadas. Para ello se inactivaron células provenientes del istmo y ámpula, con Mitomicina C (40 μg/ml) para inhibir la capacidad de división. Los ovocitos se maduraron in vitro durante 24 h, se fertilizaron durante 18 h en cultivo convencional y se cultivaron durante 7 días en un sistema de co-cultivo con células inactivadas (1.44 x 105 de células/pocillo 500 μl) provenientes del istmo y ámpula, por separado (2.88 x 105 de células/ml). Los resultados se evaluaron con un diseño completamente al azar (DCA) con sub muestra con tres tratamientos, realizando un ANOVA y prueba de Tukey (α = 0,05). Se concluye existe diferencias significativas de las células alimentadoras inactivadas comparada con el control (sin células alimentadoras). En conclusión, el co-cultivo con células alimentadoras inactivadas provenientes del Ámpula e istmo sirven como un soporte en la viabilidad del desarrollo embrionario