Antifungal activity of local anesthetics against Candida species.

OBJECTIVE: To evaluate the activity of benzydamine, lidocaine, and bupivacaine, three drugs with local anesthetic activity, against Candida albicans and non-albicans strains and to clarify their mechanism of activity. METHODS: The minimal inhibitory concentration (MIC) was determined for 20 Candida strains (18 clinical isolates and two American Type Culture Collection strains). The fungistatic activity was studied with the fluorescent probe FUN-1 and observation under epifluorescence microscopy and flow cytometry. The fungicidal activity of the three drugs was assayed by viability counts. Membrane alterations induced in the yeast cells were evaluated by staining with propidium iodide, by quantitation of intracellular K+ leakage and by transmission electron microscopy of intact yeast cells and prepared spheroplasts. RESULTS: The MIC ranged from 12.5-50.0 microg/mL, 5.0-40.0 mg/mL, and 2.5-10.0 mg/mL for benzydamine, lidocaine, and bupivacaine, respectively. The inhibitory activity of these concentrations could be detected with the fluorescent probe FUN-1 after incubation for 60 minutes. A very fast fungicidal activity was shown by 0.2, 50, and 30 mg/mL of benzydamine, lidocaine, and bupivacaine, respectively. CONCLUSIONS: At lower concentrations, the tested drugs have a fungistatic activity, due to yeast metabolic impairment, while at higher concentrations they are fungicidal, due to direct damage to the cytoplasmic membrane

Cancro Avançado do Pulmão doença previsível?

RESUMO: O carcinoma do pulmão continua a ser a maior causa de mortalidade por cancro em grande parte dos países. O hábito de fumar, a incapacidade do rastreio em reduzir a taxa de mortalidade, o diagnóstico tardio e a inexistência de tratamento eficaz para as situações avançadas, são as razões mais relevantes para esta situação.O objectivo foi determinar o contributo, da ploidia do ADN e da percentagem de células em fase de síntese do ciclo celular(fase S), associadas a características clínicas bem conhecidas, na avaliação prognóstica dos doentes com carcinoma avançado do pulmão e identificar entre os parâmetros estudados alguns que pudessem servir de marcadores do comportamento da doença.Estudaram-se prospectivamente 93 doentes com carcinoma do pulmão diagnosticados e tratados no Serviço de Pneumologia do H.S. João.Os doentes eram predominantemente do sexo masculino,70 (75%) e 23 (25%) do sexo feminino com 64 anos de idade mediana. O estado geral da maioria dos doentes era bom, só 12 doentes estavam gravemente limitados. Setenta e quatro doentes (80%) apresentavam doença avançada, sendo em 57 (61,3%) metastática. Dezanove casos (20%) eram carcinomas de células pequenas,41 eram adenocarcinomas e 25 eram carcinomas epidermóides.A análise da sobrevida permitiu identificar como principais factores: o estado geral (Zubrod), o estádio da doença, as contagens, leucocitária e linfocitária, a fosfatase alcalina, a ploidia do ADN e a% de células em fase S. Assinale-se, que a presença de aneuploidia e% de células em fase Sâ¥15%, se associaram a bom prognóstico, ao contrário do referido na maioria dos estudos publicados.Na análise do comportamento da doença identificaram-se três parâmetros: o estado geral, a% de células em fase S e o valor das proteínas séricas totais. Utilizando estes parâmetros foi possível prever a evolução tumoral na grande maioria dos doentes.Concluímos referindo o importante contributo adicional, dos dois parâmetros tumorais de índole biológica estudados quando associados aos de natureza clínica, tanto na avaliação do prognóstico como na determinação do comportamento da doença.REV PORT PNEUMOL 2001; VII (3): SUMMARY: Lung Cancer continues to be a major cause of death from cancer in most countries mainly due to continued smoking, late diagnosis and the lack of an effective treatment.The objective was to evaluate the prognostic significance of clinical evaluation in association with two biological markers: DNA ploidy and S phase fraction determined by flow cytometry.We studied 93 patients with cancer of the lung diagnosed and treated at the São João Hospital Department of Pneumology. They were predominantly male 70 (75%) and mean age was 64 years the majority with good performance status; only 12 patients were severely disabled. Seventy-four patients (80%) presented with advanced disease, and this was metastatic on diagnosis in 57 (61.3%). Nineteen cases (20%) were small cell cancers; 41 were adenocarcinomas and 25 were scamous cell carcinomas. Forty seven (50,5%) were aneuploid and 22 had âhighâ S phase fraction.The survival analysis enabled us to identify the following as the principle independent prognostic factors: PS, stage of the disease, leukocyte and lymphocyte counts, alkaline phosphatase, DNA ploidy and the S phase fraction. We noted that the presence of aneuploidy and a S phase fractionâ¥15%, was associated with a good prognosis.The principle indicators of the disease progression were: PS, S phase fraction and the value of total serum proteins.We conclude by referring the importance of using clinical evaluation and biological markers in association, on prognostic evaluation and as indicators of the progression of the disease.REV PORT PNEUMOL 2001; VII (3): Palavras-chave: Carcinoma do pulmão, citometria de fluxo, factores de prognóstico, marcadores do comportamento da doença, Key-words: lung cancer, flow cytometry, prognostic factors, disease progression indicator

Citometria de fluxo no cancro do pulmão. Eficácia da citologia como técnica de selecção dos espécimes a processar

RESUMO: O cancro do pulmão é a neoplasia mais frequente no sexo masculino nos países da U.E., mostrando actualmente tendência crescente em todos os países. O cancro do pulmão é a maior causa de morte por neoplasia, tanto na E.U. como nos E.U.A. A sobrevida é geralmente curta, sendo a maioria dos doentes diagnosticados em fases avançadas da doença, dificultando a decisão terapêutica. Para estabelecer a opção terapêutica há necessidade de conhecimento mais aprofundado dos factores que podem influenciar a sobrevida, não só relativos ao doente, mas também em relação ao próprio tumor.O presente estudo insere-se numa avaliação prognóstica global, incluindo características do doente e do tumor. Na avaliação das características do tumor utilizamos citometria de fluxo (FCM) que permite avaliar o conteúdo e o índice do ADN e a fracção de cálulas em Fase-S. As amostras a processar são colhidas por técnicas diagnósticas (biopsia, escovagem e lavagem brônquicas, biopsia aspirativa transtorácica - BAT e aspirado ganglionar), sendo utilizado no processamento o material restante, após ter sido obtido o diagnóstico. Pretendemos nesta investigação preliminar definir um controlo de qualidade dos espécimes a processar por FCM em relação à presença ou não de células neoplásicas, atravás de um rastreio citológico. Por outro lado, verificar se é exequível utilizando amostras tão exíguas obter resultados de FCM fláveis. Estudámos 78 doentes suspeitos de terem neoplasia maligna do pulmão. Só nos 43 em que se provou existir neoplasia maligna se procedeu á realização de FCM. Obtivemos resultados avaliáveis de FCM em 62% (27/43). As técnicas de colheita mais reotáveis, após rastreio citológico, foram a biopsia brônquica (76%) e a escovagem brônquica (100%). Encontramos uma deficiente rentabilidade utilizando a BAT (31%). A citologia é um bom método de selecção para espécimes colhidos por biopsia brônquica e escovagem brônquica. A utilização desta metodologia parece-nos um bom método de controlo de qualidade para seleccionar amostras para realização de FCM

Antifungal activity of ibuprofen alone and in combination with fluconazole against Candida species

Ibuprofen, a non-steroidal anti-inflammatory drug, exhibited antimicrobial activity against Candida albicans and non-albicans strains. At 10 mg/ml, ibuprofen showed a rapid cidal activity against exponential growth phase C. albicans, accompanied by rapid and extensive leakage of intracellular K+, permeation to propidium iodide, lysis of spheroplasts and severe membrane ultrastructural alterations. These results indicate that the killing of Candida cells is due to direct damage to the cytoplasmic membrane. At 5 mg/ml, ibuprofen inhibited growth; however, it did not kill the yeasts and did not directly affect the cytoplasmic membrane. Evaluation of yeast metabolic vitality with the fluorescent probe FUN-1 showed that growth inhibition induced by the fungistatic drug concentration was due to metabolic alterations. The combination of ibuprofen with fluconazole resulted in synergic activity with eight of the 12 Candida strains studied, including four of the five fluconazole-resistant strains. The MICs of fluconazole for the fluconazole-resistant strains decreased 2-128-fold when the drug was associated with ibuprofen. When in combination with fluconazole, MICs for ibuprofen decreased by up to 64-fold for all the 12 strains studied. These results point to the practicability of using ibuprofen, alone or in combination with azoles, in the treatment of candidosis, particularly when applied topically, taking advantage of the drug's antifungal and anti-inflammatory properties