Mise en place de modèles cellulaires pour l'étude de l'absorption des médicaments

Le passage des barrières épithéliales constitue une étape limitante pour l absorption des médicaments. Dans le but de tester in vitro l efficacité de lipoaminoacides, promoteurs d absorption breveté par la société Physica Pharma, j ai mis en place au laboratoire deux modèles cellulaires de barrières épithéliales. Le premier modèle est un modèle de barrière épithéliale intestinale constitué par la lignée cellulaire humaine immortalisée, les cellules de colon Caco-2. Le deuxième modèle est un modèle de barrière épithéliale nasale constitué par des cultures primaires de cellules épithéliales nasales humaines issues d actes chirurgicaux. La perméabilité de quatre principes actifs a été étudiée sur ces modèles, en présence ou en absence de différents lipoaminoacides. Les études in vitro ont montré une augmentation de la perméabilité des molécules d intérêt, liée à l ouverture des jonctions intercellulaire, en présence des promoteurs d absorption. A l issu de ce travail, plusieurs formulations ont été sélectionnées pour des études précliniques sur l animal entier. Le modèle de barrière intestinale n a pas permis de prédire l absorption in vivo. En effet, les études de l administration par voie orale in vivo chez le chien n ont pas pu être corrélées avec les résultats in vitro. En revanche, ce travail de thèse a permis de valider un modèle de barrière épithéliale nasale pour l étude de la perméabilité de molécules à destinée nasale, qui a été validé par des études in vivo chez le mouton. Les cultures cellulaires mises en place ont donné un aspect qualitatif et non quantitatif des évènements complexes qui se produisent in vivo.The passage of the epithelial barriers constitutes a stage limiting for the absorption of drugs. With the aim of testing in vitro the effectiveness of lipoaminoacids, patented by the company Physica Pharma, as promoters of absorption, I set up at the laboratory two cellular models of epithelial barriers. The first model is a model of intestinal barrier constituted by immortalized human cells, the colon Caco-2 cell line. The second model is a model of nasal epithelial barrier consisting of primary cultures of human nasal epithelial cells available from surgical acts. The permeability of four active drugs was studied on these models. The in vitro studies showed an increase in the permeability of drugs, in the presence of different lipoaminoacids, owing to the opening of the intercellular junctions. From this work, several formulations were selected for preclinical studies on the whole animal. The intestinal model barrier didn t predict absorption in vivo. Indeed, the in vivo oral absorption studies carried out on the dog could not be correlated with the in vitro results. On the other hand, this work validates an epithelial nasal barrier model for permeability studies of molecules administered by nasal airway, which was validated by in vivo studies in the sheep. Cell cultures gave a qualitative but not a quantitative aspect of the complex events which occur in vivo.NICE-BU Sciences (060882101) / SudocSudocFranceF

Stability and Structure of Protein–Lipoamino Acid Colloidal Particles: Toward Nasal Delivery of Pharmaceutically Active Proteins

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