Nieinwazyjna diagnostyka prenatalna trisomii 21,18 i 13 z wykorzystaniem wolnego pozakomórkowego DNA płodu

Trisomy 21, 18 and 13 are the most common trisomies diagnosed in newborns. Screening methods consist of ultrasound and maternal serum markers. High risk for fetal aneuploidies is an indication for routine karyotyping, which requires collection of fetal tissue through amniocentesis or chorionic villous sampling. They are invasive procedures and carry a potential risk of miscarriage. The discovery of cell free fetal DNA (cffDNA) in maternal blood offered new opportunities for noninvasive prenatal diagnosis. The fraction of cell-free fetal DNA in total pool of cell-free DNA in maternal plasma is very low, therefore the analysis of cffDNA is very challenging. The introduction of massive parallel sequencing has enabled the application of noninvasive prenatal testing in the clinical practice and a variety of recent studies have proven its high efficacy in diagnosing common aneuploidies.Trisomie chromosomów 21, 18 i 13 należą do najczęściej diagnozowanych aberracji chromosomowych u noworodków. Obecnie w celu oceny ryzyka ich wystąpienia wykonuje się badanie ultrasonograficzne oraz testy biochemiczne. Stwierdzenie na podstawie testów przesiewowych wysokiego ryzyka trisomii u płodu jest wskazaniem do oznaczenia kariotypu klasyczną metodą cytogenetyczną, która niesie za sobą potrzebę pobrania materiału genetycznego płodu. Badania inwazyjne (amniopunkcja, biopsja trofoblastu) obarczone są ryzykiem straty ciąży. Wykrycie obecności wolnego pozakomórkowego DNA płodu (cffDNA – cell free fetal DNA) we krwi matki zapoczątkowało szereg badań nad możliwościami jego wykorzystania w diagnostyce prenatalnej. cffDNA stanowi jednak tylko niewielką część całkowitej puli wolnego DNA we krwi matki, dlatego jego analiza jest trudna. Wprowadzenie metody masywnego równoległego sekwencjonowania umożliwiło zastosowanie nieinwazyjnych testów w praktyce klinicznej, a prowadzone w ostatnich latach liczne badania dowiodły skuteczności metody w diagnostyce prenatalnej trzech najczęściej występujących trisomii

Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) – new possibilities of prenatal diagnosis

Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) is a relatively new method of molecular diagnosis. It enables a relative quantitative assessment of up to 50 different PCR amplicons in one reaction by the use of a very small amount of examined DNA. Nowadays MLPA is becoming a very helpful tool in prenatal diagnosis and is widely used for the detection of aneuploidies, familial single gene disorders, common microdeletion syndromes, sub-telomeric alterations and identification of marker chromosomes in fetuses. This review demonstrates possible applications of MLPA in prenatal diagnosis

Analysis of ultrasonic scans and karyotype of fetuses with holoprosencephaly diagnosed in The Department of Obstetrics & Gynecology of the Postgraduate Center of Medical Education between 1997 & 2005

Objectives: The aim of our study was to determine the risk of aneuploidy and associated malformations in fetuses with holoprosencephaly. We have also analyzed the gestational age during the first examination. Design: We have studied ultrasound reports of fetuses with holoprosencephaly. Materials and Methods: We analyzed 33 cases, diagnosed in the course of the last eight years in our center. All fetuses underwent a detailed ultrasound survey and, in most cases, antenatal karyotyping. In all cases the type of holoprosencephaly was assessed Results: In analyzed fetuses alobar holoprosencephaly was diagnosed in 24, semilobar in 7 and lobar holoprosencephaly in 2 cases. Associated anomalies were detected in 28 (mostly face defects) and chromosomal abnormalities in 12 cases. The median gestational age at the first examination was 25 weeks. No more than 14 examinations had been performed before 24 week. Conclusions: Our findings suggest that in case of fetuses with holoprosencephaly, a detailed ultrasound survey and karyotyping are essential to be performed in all cases. For that reason, patients with fetuses with holoprosencephaly should be diagnosed as early as possible in the referral center

Prenatal diagnosis of craniosynostosis (compound Saethre-Chotzen syndrome phenotype) caused by a de novo complex chromosomal rearrangement (1; 4; 7) with a microdeletion of 7p21.3–7p15.3, including TWIST1 gene – a case report

Craniosynostosis (a premature fusion of the cranial sutures) occurs with a frequency of 1 in 2100–2500 births and in over 40% cases is caused by known genetic factors – either single gene mutations or chromosomal rearrangements. Cases caused by complex chromosomal abnormalities are uncommon and likely associated with compound phenotype. Saethre–Chotzen syndrome (SCS) [#101400] is caused by TWIST1 gene haploinsufficiency. Its phenotype includes uni– or bicoronal synostosis, short stature, facial dysmorphism and variable anomalies of the hands and feet. Due to its poor sonographic manifestation a prenatal diagnosis of SCS is challenging. We report a case of a prenatally detected craniosynostosis (compound Saethre–Chotzen syndrome phenotype) caused by a de novo complex chromosomal rearrangement (1; 4; 7) with a microdeletion of 7p21.3–7p15.3, including TWIST1 gene

Wykorzystanie krwi matczynej do transfuzji dopłodowych w terapii konfliktu serologicznego na przykładzie trzech trudnych przypadków

Maternal alloimmunization can lead to hemolytic anemia, hydrops fetalis and even fetal or neonatal death. Intrauterine treatment is possible and effective even though it is associated with some risk. We present a rare method of maternal blood intrauterine transfusions in the therapy of three difficult cases of erythroblastosis fetalis. The aim of this report was to present an alternative to volunteer donors. In severe cases, i.e. in the absence of matching blood types from the donor, in the presence of multiple alloantibodies in the pregnant woman or if multiple transfusions are required, this can be the only therapeutic option. To the best of our knowledge, this has been the first publication on maternal blood donation for intrauterine transfusion in the Polish literature.Konflikt serologiczny może prowadzić do niedokrwistości hemolitycznej, obrzęku, a nawet śmierci płodu lub noworodka. Skuteczne leczenie wewnątrzmaciczne jest możliwe, choć obarczone ryzykiem powikłań. W pracy zaprezentowano rzadko stosowaną metodę wykorzystania krwi matczynej do transfuzji dopłodowych w terapii trzech trudnych przypadków konfliktu serologicznego, pragnąc zwrócić uwagę na alternatywny sposób pozyskania krwi do przetoczeń dopłodowych. W szczególnie ciężkich przypadkach (brak dostępności zgodnej antygenowo krwi od dawcy, obecność kilku rodzajów przeciwciał przeciw krwinkom czerwonym u matki, konieczność wykonania licznych przetoczeń) może być to jedyna opcja terapeutyczna. Według wiedzy autorów jest to pierwsza publikacja dotycząca tej metody leczenia prezentowana w polskim piśmiennictwie

Risk factors and primary prevention of lung cancer. Cessation of cigarette addiction

Despite the huge knowledge about the risk factors associated with lung cancer, this disease remains the leading cause of cancer deaths in highly developed countries. The reason for this phenomenon is the increasing pollution of the natural environment and, above all, the difficulties in eliminating the addiction to smoking. In large Polish urban agglomerations, the exposure to particulate matter containing hydrocarbons on its surface, to free hydrocarbons, nitrogen and sulphur oxides is constantly increasing. Moreover, almost 25% of the Polish population smoke cigarettes and the elimination of smoking addiction through psychotherapy, nicotine replacement therapy and pharmacotherapy are sometimes ineffective. This article presents that the use of tobacco-burning products other than cigarettes (e.g., cigars or pipes) and products containing marijuana are as dangerous to health as classical cigarettes. Other nicotine-containing products have also appeared: e-cigarettes and tobacco heating systems. These products are highly addictive to nicotine, but the aerosols, that are produced by them, contain fewer toxic substances than cigarette smoke. Therefore, there are reasons to use these products instead of traditional cigarettes in people who are highly addicted to nicotine (after exhaustion of other treatment options) to reduce health risks, including lung cancer risk. However, it must be evoked that only a complete smoking cessation and the use of nicotine-containing products could be effective in reducing the risk of lung cancer

Przezierność karku powyżej 3,5mm u płodów z prawidłowym kariotypem - analiza wyników ciąż

Objectives: The objective was to study the outcomes of fetuses with increased nuchal translucency ≥3.5 mm and normal karyotype. Materials and methods: We performed a retrospective study on pregnancy outcomes and children development in 87 women with increased fetal nuchal translucency and normal karyotype who underwent chorionic villus sampling at our department. Mean observation period was 12 months after birth. Adverse pregnancy outcome was defined as miscarriage and intrauterine fetal demise, termination of pregnancy, structural defect, neonatal death, genetic syndrome and other major abnormalities. Results: The total incidence of adverse pregnancy outcome was 39.1% (n=34). The likelihood of an adverse pregnancy outcome, a major structural defect or major heart defect increased significantly with nuchal translucency (OR 3.77). 68 children (78.2%) were born alive. Nuchal translucency was significantly higher in newborns with adverse pregnancy outcome than in healthy children [4.1 mm vs. 5.7 mm; pCel pracy: Celem pracy była analiza rozwoju pre- i postnatalnego płodów ze zwiększoną przeziernością karku powyżej 3,5 mm i prawidłowym kariotypem. Materiał i metoda: Przeprowadzono retrospektywną analizę przebiegu ciąży i rozwoju dzieci u 87 pacjentek, u których wykonano biopsję trofoblastu w Pracowni USG I Kliniki Ginekologii i Położnictwa CMKP w SPSK im. prof.Orłowskiego z powodu przezierności karku płodu powyżej 3,5 mm (powyżej 99 percentyla) i otrzymano prawidłowy wynik kariotypu. Średni czas obserwacji po porodzie wynosił 12 miesięcy. Za niepomyślne zakończenie ciąży uznano poronienie i wewnątrzmaciczne obumarcie płodu, terminację ciąży, zgon dziecka po urodzeniu, występowanie ciężkiej wady anatomicznej, podejrzenie zespołu genetycznego i występowanie innych istotnych nieprawidłowości. Wyniki: W 34 (39,1%) przypadkach ciąża zakończyła się niepomyślnie. Ryzyko niepomyślnego wyniku ciąży, a w szczególności występowania ciężkiej wady anatomicznej oraz wady serca wzrastało wraz z wartością NT [OR 3,77]. W 68 przypadkach (78,2%) ciąża zakończyła się urodzeniem żywego noworodka. Wartość NT była istotnie statystycznie wyższa u żywo urodzonych dzieci, u których stwierdzono nieprawidłowości lub zgon po urodzeniu, niż u zdrowych noworodków [4,1 mm vs 5,7 mm;

Analiza efektywności techniki MLPA w inwazyjnej diagnostyce prenatalnej najczęstszych aneuploidii

Cel badania: Ustalenie efektywności metody MLPA (multiplex ligation dependent probe amplification) w prenatalnej diagnostyce najczęściej występujących aneuploidii (chromosomów 21, 18, 13, X oraz Y) oraz porównanie wyników uzyskanych tą metodą z wynikami rutynowych technik prążkowych. Materiał i metoda: Przeprowadzono badanie metodą MLPA z zastosowaniem zestawu sond SALSA MLPA P095 (MRC – Holland) na 195 próbkach DNA wyizolowanego z materiału pochodzącego z inwazyjnych badań prenatalnych wykonanych w Pracowni USG SPSK im. Prof. Orłowskiego od października 2008 r. do lipca 2012 r. u pacjentek o podwyższonym ryzyku aberracji chromosomowych u płodu oraz 5 próbkach materiału po poronieniu indukowanym. Jednocześnie prowadzono hodowle komórkowe i oceniano kariotyp klasyczną metodą cytogenetyczną. Wyniki: Kariotyp oznaczono w 192 badaniach prenatalnych (98,5%; 192/195). W 52 przypadkach (26,8%) stwierdzono nieprawidłowy kariotyp płodu – w większości proste aneuploidie chromosomów 13, 18, 21, X i Y (86,5%, 45/52). Wynik metodą MLPA udało się uzyskać w 180 próbkach DNA z materiału pobranego prenatalnie (92,3 180/195). Bezwzględna czułość i swoistość metody MLPA wyniosła 100%. W dziewięciu próbkach pobranych prenatalnie metodą MLPA nie zidentyfikowano aberracji wykrytych klasyczną metodą prążkową lub FISH. W żadnym z tych przypadków nie było możliwe uzyskanie rzeczywistego wyniku stosowanym zestawem sond. We wszystkich próbkach materiału po poronieniu udało się przeprowadzić reakcję MLPA. Wnioski: MLPA jest skuteczną metodą wykrywania najczęstszych aneuploidii w diagnostyce prenatalnej. Ze względu na małą ilość przeprowadzonych reakcji na materiale po poronieniu, ocena przydatności metody w tych przypadkach wymaga dalszych badań