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    Fin de l’élimination des poussins mâles d’un jour : le choix du sexage in ovo

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    Une problématique majeure de la filière avicole est l’absence de valorisation des frères des poules pondeuses, du fait de leur faible rendement en viande. Ce constat, qui questionne l’éthique de la production, concerne 50 millions de poussins mâles en France et 7,5 milliards dans le monde, ces animaux étant jusqu’à récemment, éliminés après sexage et tri à l’éclosion. Cette prise de conscience, largement médiatisée ces dernières années, a conduit à la publication d’un décret, le 5 février 2022, interdisant la mise à mort des mâles des lignées de l’espèce Gallus gallus destinées à la production des œufs de consommation. Trois alternatives ont été proposées depuis les premières réflexions sur le sujet : 1) élever les frères de pondeuses et identifier des marchés de valorisation, 2) créer de nouveaux croisements génétiques entre souches « Chair » et souches « Ponte » où les descendantes femelles seraient valorisées pour les œufs et les descendants mâles pour leur viande (souches « mixtes »), et 3) développer des outils de sexage in ovo (ou ovosexage) pour détecter puis éliminer les œufs contenant un embryon mâle avant éclosion. Cette dernière approche est la seule viable techniquement et économiquement parlant, et utilisable par la filière actuellement. Elle réunit de nombreux atouts, en termes de faisabilité pour la mise en œuvre dans les couvoirs, et d’acceptabilité à la fois par le consommateur, le citoyen et les professionnels. Cette revue fait le point sur le contexte socio-économique et les techniques d’ovosexage actuellement disponibles, tout en introduisant quelques repères physiologiques d’embryologie aviaire qui permettent de mieux comprendre les contraintes associées au développement de techniques à des stades précoces de développement

    Etude fonctionnelle des kallicréines prostatiques humaines hK2 et hK3

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    Les kallicréines humaines hK2 et hK3 sont deux protéases à sérine exprimées essentiellement dans la prostate. HK3 participerait à la liquéfaction du plasma séminal en dégradant les séménogélines, les protéines majeures du coagulum formé immédiatement après éjaculation. Le rôle physiologique des kallicréines hK2 et hK3 n'est cependant pas clairement établi. Chez les patients atteints de cancer de la prostate, les concentrations sériques en hK2 et hK3 augmentent fortement suggérant que ces protéases pourraient jouer un rôle dans la croissance tumorale. Afin de faciliter la détection de hK3 enzymatiquement active dans les fluides biologiques, nous avons dans un premier temps conçu des substrats fluorogéniques peptidiques pour hK3. Ces substrats, dérivés de la séquence des séménogélines, se sont avérés beaucoup plus sensibles à l'hydrolyse par hK3 que ceux actuellement utilisés pour mesurer l'activité de cette protéase. Nous avons montré dans un deuxième temps que hK2 et hK3 pourraient participer à la progression cancéreuse selon deux voies au moins. Ces kallicréines sont capables de dégrader les protéines de liaison des facteurs de croissance de type insuline (IGFBPs), ce qui contribuerait à augmenter la biodisponibilité des IGFs dont l'action mitogénique favoriserait la croissance tumorale. D'autre part, nous avons mis en évidence que hK2 et hK3 pourraient en inactivant les inhibiteurs physiologiques de l'urokinase et de la plasmine (PAI-1, inhibiteur de l'activateur du plasminogène-1 et alpha2-antiplasmine), augmenter indirectement l'activité protéolytique de ces deux protéases sur les protéines de la matrice extracellulaire et faciliter ainsi la dissémination des cellules cancéreuses.HK2 and hK3 are two serine proteases mainly expressed in the prostate gland. HK3 is thought to be responsible for the liquefaction of seminal plasma through proteolysis of the semenogelins, the major proteins forming coagulum immediately after ejaculation. Nevertheless, the physiological function of kallikreins hK2 and hK3 is still unclear. Men suffering from prostate cancer have high plasma concentrations of both kallikreins hK2 and hK3 which suggests that these two kallikreins could be involved in tumor growth...TOURS-BU Sciences Pharmacie (372612104) / SudocSudocFranceF

    Caractérisation fonctionnelle et biochimique des protéases et antiprotéases présentés dans le jaune d'oeuf "gallus gallus".

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    Le jaune d œuf est une source de nutriments et de molécules bioactives pour l embryon. Il renferme de nombreuses protéases et antiprotéases, dont la fonction reste méconnue. Notre objectif était d identifier et de caractériser les protéases/antiprotéases associées spécifiquement à la formation du jaune d œuf (vitellogénèse). Les précurseurs du jaune sont exprimés par le foie à la maturité sexuelle des poules. Par une approche transcriptomique, nous avons identifié 582 gènes, dont 15 protéases et antiprotéases, sur exprimés par le foie des poules sexuellement matures. Au moins trois d entre elles sont présentes dans le jaune ou la membrane vitelline. Nous avons montré que l expression de la similar to nothepsin , une protéase prédite de fonction inconnue, était spécifique du foie des femelles et pourrait participer à la maturation des précurseurs du jaune. D autre part, nous avons démontré que l ovoinhibiteur, une antiprotéase du jaune, aurait un rôle dans la défense antimicrobienne de l œuf. L intégration de l ensemble de ces résultats fournira des données essentielles relatives à la vitellogénèse et à la fonction des protéases/antiprotéases dans le jaune d œuf.The egg yolk is a source of nutrients and bioactive molecules for the embryo,including many proteases/antiproteases, the function of which is still unknown. Our objective was to identify and characterize proteases/ antiproteases that are specifically associated with the formation of the yolk (vitellogenesis). Yolk precursors are synthesized by the liver at sexual maturity of hens. Using a transcriptomic approach, we identified 582 genes, including15 proteases and antiproteases that are over-expressed by the liver at sexual maturity of hens. At least three of them are recovered in the egg yolk or the vitelline membrane. We have shown that the expression of "similar to nothepsin was specific to the liver of females. This protease could participate in the processing of yolk precursors. We have also demonstrated that egg yolk ovoinhibitor is antimicrobial and could therefore participate in egg defense. The integration of all these results will provide major data relative to vitellogenesis and to the function of proteases/antiproteases in the egg yolk.TOURS-Bibl.électronique (372610011) / SudocSudocFranceF

    Selection and characterization of recombinant dromedary antiovalbumin antibody fragments that do not cross-react with ovalbumin-related protein x: use for immunoaffinity

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    Ovalbumin-related protein X (OVAX) and ovalbumin are two very close ovalbumin-related serpins. As primary data on OVAX remain recent, information about possible cross-reaction of available antiovalbumin antibodies with OVAX is still missing. Using labeled purified OVAX and dot ligand blotting, we identified 49 recombinant dromedary antiovalbumin single domain antibody (sdAb) fragments that were unable to bind OVAX. Discrimination between OVAX and ovalbumin was confirmed for two of the corresponding sdAb fragments by surface plasmon resonance and Western ligand blotting (WLB) characterizations. Furthermore, they were covalently linked to Sepharose and used as an affinity matrix for ovalbumin depletion. At least 90% of the original ovalbumin was eliminated from the allantoic fluid of 14 day old chicken embryo in one step. These sdAb fragments, which bind ovalbumin with nanomolar affinity, should also contribute to a better characterization of ovalbumin preparations

    Effect of temperature and time of storage on protein stability and anti-salmonella activity of egg white

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    Chantier qualité GAHen egg white contains numerous molecules of interest for human health, including antimicrobial proteins Little information is available concerning changes in the antimicrobial activity of egg white during storage; therefore, we analyzed the potential of egg white to inhibit growth of Salmonella enterica serovar Enteritidis following storage at 4, 20. or 37 degrees C for 30 days prior to inoculation Egg white displayed higher anti-Salmonella activity after a few days of storage at 20 and 37 degrees C. The rate of increase in activity was more rapid and pronounced at the higher temperature However, egg white stored at 20 degrees C retained higher antimicrobial activity than that of egg white stored at 4 or 37 degrees C, when the entire storage period is taken in consideration In contrast, storage of egg at 37 degrees C for more than 14 days reduced the bacteriostatic potential of egg white. Statistical analyses revealed a correlation between pH and the antimicrobial activity of egg white Moreover, diminished antimicrobial activity was associated with degradation of ovalbumin and ovotransferrin, as assessed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis and mass spectrometry. However, the fluctuation in anti-Salmonella activity of egg white could not be related to any variation of trypsin-like. chymotrypsin-like. or gelatinolytic activities that potentially account for degradation of antimicrobial egg white proteins

    Proteomic analysis of egg white heparin-binding proteins: towards the identification of natural antibacterial molecules

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    The chicken egg resists most environmental microbes suggesting that it potentially contains efficient antimicrobial molecules. Considering that some heparin-binding proteins in mammals are antibacterial, we investigated the presence and the antimicrobial activity of heparin-binding proteins from chicken egg white. Mass spectrometry analysis of the proteins recovered after heparin-affinity chromatography, revealed 20 proteins, including known antimicrobial proteins (avidin, lysozyme, TENP, ovalbumin-related protein X and avian beta-defensin 11). The antibacterial activity of three new egg candidates (vitelline membrane outer layer protein 1, beta-microseminoprotein-like (LOC101750704) and pleiotrophin) was demonstrated against Listeria monocytogenes and/or Salmonella enterica Enteritidis. We showed that all these molecules share the property to inhibit bacterial growth through their heparin-binding domains. However, vitelline membrane outer layer 1 has additional specific structural features that can contribute to its antimicrobial potential. Moreover, we identified potential supplementary effectors of innate immunity including mucin 5B, E-selectin ligand 1, whey acidic protein 3, peptidyl prolyl isomerase B and retinoic acid receptor responder protein 2. These data support the concept of using heparin affinity combined to mass spectrometry to obtain an overview of the various effectors of innate immunity composing biological milieus, and to identify novel antimicrobial candidates of interest in the race for alternatives to antibiotics
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