Desarrollo teórico de "high throughput screening" (HTS) para encontrar inhibidores de JAK2V617F destinados a pacientes con policitemia vera

Actas del VII Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2022. 14 a 18 de marzo, 2022. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. EspañaLa policitemia vera (PV) es una neoplasia mieloproliferativa crónica para la que, actualmente, no existe cura. La sintomatología inespecífica de dicha enfermedad retrasa, además, el diagnóstico correcto y el establecimiento de un régimen terapéutico adecuado. El tratamiento de primera línea es meramente paliativo. No obstante, como segunda línea de tratamiento en los casos más graves, se ha empezado a utilizar el Ruxolitinib, un inhibidor inespecífico de JAK1/2 relacionado con efectos adversos (EA) severos. La alteración molecular que causa mayoritariamente la PV es una mutación puntual que afecta a la proteína JAK2, donde tiene lugar la sustitución del aminoácido valina (V) por una fenilalanina (F) en la posición 617 (JAK2V617F). Dicha modificación causa una activación constitutiva de la vía JAK-STAT con especial importancia en las células progenitoras hematopoyéticas de linaje mieloide, resultando en eritrocitosis, trombocitosis y leucocitosis. En consecuencia, se propone un proceso de high throughput screening (HTS) dirigido hacia la búsqueda de inhibidores específicos de JAK2V617F que permitan una reducción de EA y una mejora en la eficacia. Para ello, el desarrollo teórico se basa en un método fluorescente, cuantitativo, robusto y fácilmente escalable, incluido en un ensayo celular para determinar la inhibición de JAK2V617F por parte de los compuestos de la batería a evaluar. Adicionalmente, el estudio de la actividad de cada hit frente a otras quinasas permitiría descartar los no específicos. Tras la selección de cabezas de serie, su modificación y la reevaluación en los ensayos anteriores, se obtendrían los candidatos. Su efectividad se estimaría después en líneas celulares con JAK2V617F y se externalizaría la evaluación del perfil de toxicidad y seguridad esperable en organismos completos. Por último, proponemos un modelo animal de PV que proporcione información adicional acerca de la seguridad y de la efectividad de los candidato

Aplicación de técnicas espectroscópicas en la caracterización del cáncer de próstata

Los métodos de cribado y diagnóstico actuales en cáncer de próstata (CaP) son insuficientes, inespecíficos o invasivos, por lo que la búsqueda de nuevos biomarcadores y técnicas diagnósticas sigue siendo relevante clínicamente. En el presente estudio, la Espectroscopía Raman mejorada por superficies (SERS) de muestras de orina y el estudio quimiométrico mediante análisis de componentes principales (PCA) acoplado a análisis linear discriminante (LDA) permite crear un sistema diagnóstico de CaP rápido, no invasivo y de bajo coste, posibilitando la identificación eficaz de CaP con una sensibilidad del 77.78 % y una especificidad del 100 %. A su vez, se aborda la búsqueda de biomarcadores propios del CaP mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS), en la que se sugiere que los metabolitos urinarios no son biomarcadores válidos para CaP

Induction of more aggressive tumoral phenotypes in LNCaP and PC3 cells by serum exosomes from prostate cancer patients

Prostate cancer (PCa) is the second most frequent and sixth most fatal cancer in men worldwide. Despite its high prevalence, our understanding of its etiology and the molecular mechanisms involved in the progression of the disease is substantially limited. In recent years, the potential participation of exosomes in this process has been suggested. Therefore, we aim to study the effect of exosomes isolated from the serum of patients with PCa on various cellular processes associated with increased tumor aggressiveness in two PCa cell lines: LNCaP-FGC and PC3. The exosomes were isolated by filtration wand ultracentrifugation. Their presence was confirmed by immunodetection of specific markers and their size distribution was analyzed by Dynamic Light Scattering (DLS). The results obtained demonstrated that serum exosomes from PCa patients increased migration of PC3 cells and neuroendocrine differentiation of LNCaP-FGC cells regardless of the grade of the tumor. PCa serum exosomes also enhanced the secretion of enzymes related to invasiveness and resistance to chemotherapeutics, such as extracellular matrix metalloproteases 2 and 9, and gamma-glutamyltransferase in both cell lines. Altogether, these findings support the pivotal participation of exosomes released by tumoral cells in the progression of PCa. Future studies on the molecular mechanisms involved in the observed changes could provide crucial information on this disease and help in the discovery of new therapeutic targets.Instituto de Salud Carlos III (ISCIII) P118/00526, co-funded by European Regional Development Fund (ERDF), A way to make Europe to AM

Nursing Escape Room UAH: motivation to learn in the biochemistry laboratory

In recent years, Escape Room-type games have gained popularity as a way to motivate students to become more actively involved in their learning. The overall objective of the proposed activity is to promote students' intrinsic motivation and, in turn, meaningful learning. For this purpose, we implemented the game in our laboratories. The first year students of the degree in Nursing participated in the Nursing Escape Room UAH. We chose a situation reviewed in the theoretical-practical contents of the Biochemistry subject they were studying. Our aim was to achieve significant learning through overcoming challenges and collaborative work. After the implementation of the activity, we assessed it. The participating students felt that the activity: i) had helped them to learn and understand the subject; ii) had been a fun and different experience when it came to understanding the content; iii) had been a motivating experience; and iv) they liked the fact that it was carried out in a team. In addition, these students obtained a higher average score and pass rate on the learning assessment test than those who had not participated in the game. The instructors involved also highlighted that the activity was a motivating and different way of learning and recommended its continuation. Altogether, we can conclude that the Nursing Escape Room UAH game has been a motivating experience in the Biochemistry laboratory for both students and instructors. We anticipate that the activity may improve the quality of the teaching-learning process.Universidad de Alcalá. Vicerrectorado de Innovación Docente y Transformación Digita