TINH SẠCH VÀ XÁC ĐỊNH ĐẶC TÍNH CỦA LACCASE TÁI TỔ HỢP TỪ ASPERGILLUS NIGER D15#26 lcc1 1.8B

Laccase  là  một  enzym  có  ứng  dụng  công  nghiệp  rất  rộng  rãi.  Laccase  từ  Trametes versicolor là enzym có thế oxy hóa khử lớn và là nguồn gen hấp dẫn cho nghiên cứu biểu hiện enzym. Laccase 1  từ T. versicolor 06 được biểu hiện  trong A. niger D15#26  lcc1 1.8B, với cơ chất cảm ứng là glucose, đạt hoạt độ cao nhất 4250 U/L sau 7 ngày nuôi ở tốc độ lắc 200 v/phút, pH 6. Laccase tái tổ hợp đã được tinh chế nhờ kết tủa phân đoạn  với ammonium sulfate 40 % - 80 % bão hòa ở 4 oC và sắc kí trên cột Hitrap Q Fast Flow với gradien NaCl 0 – 1 M, đạt hiệu suất  thu hồi enzym 26 %, hoạt độ  riêng 34,7 U/mg protein,  tăng 41,19  lần  so với enzym  thô. Laccase  tinh sạch có   khối  lượng phân  tử 70 kDa, phản ứng  tối ưu ở nhiệt độ 450C và pH   4. Enzym bền trong khoảng nhiệt độ từ 30 – 35 0C và pH 4 - 6. Các thông số động học của laccase trong phản ứng với ABTS là Km 1,35 µM; Vmax 53,14 µM/phút-1; Kcat 10,42 × 106 s-1 và Kcat/Km 7,72 × 106 µM-1s-1 cho thấy enzyme hoạt động hiệu quả trong oxy hóa cơ chất ABTS

Tổng hợp và biểu hiện gen caf1 mã hóa kháng nguyên F1 của vi khuẩn Yersinia pestis

Yersinia pestis is the etiologic agent of plague, one of the most deadly infectious diseases described in the history of humanity. It was responsible for millions of deaths all over the world. Yersinia pestis also can be used as a highly lethal biological potential weapon. For plague diagnosis in humans as well as to detect Y. pestis in the environment, fraction 1 capsular antigen (F1) of the bacteria was usually used as a good marker. The aim of this study is to produce Y. pestis F1 antigen to serve as a material for development of immunochromatographic test strips for rapid detection of Y. pestis. Because of the difficulty in Y. pestis culture for DNA extraction as well as F1 antigen production, we artificially synthesized the target caf1 coding for F1 antigen for expression in Escherichia coli. After the codon optimization step, caf1 was synthesized by “gapless” PCR using 22 overlaping oligonucleotides cover the complete sequence of this gene. The sequencing result showed that we successfully synthesized the target gene. In total 6 clones sequence, there are 2 clones sequence which were 100% identity with reference sequence. The target sequence was then introduced into pET-52b(+) vector and expressed in E. coli BL21 (DE3) in the form of (His)10 affinity tag fusion. As the result of SDS-PAGE, the recombinant protein Caf1 of 18 kDa was highly expressed in E. coli as inclusion body form and was purified by His-tag affinity chromatography. The recombinant Caf1 was then confirmed by Western blot with His-tag antibody.Vi khuẩn Yersinia pestis là tác nhân gây bệnh dịch hạch, một trong những loại bệnh truyền nhiễm nguy hiểm nhất được biết cho đến nay đã gây ra hàng triệu ca tử vong trên thế giới và có thể được sử dụng như một vũ khí sinh học có tính hủy diệt cao. Để chẩn đoán bệnh dịch hạch ở người cũng như phát hiện Y. pestis trong môi trường, người ta thường dựa trên việc phát hiện kháng nguyên nang F1 của loại vi khuẩn này. Mục tiêu của nghiên cứu này là nhằm tạo kháng nguyên F1 của Y. pestis để làm nguyên liệu cho que thử sắc ký miễn dịch phát hiện nhanh Y. pestis. Do việc nuôi cấy Y. pestis để thu nhận kháng nguyên F1 hoặc DNA của vi khuẩn này rất khó khăn nên chúng tôi đã tiến hành tổng hợp nhân tạo gen mục tiêu caf1, mã hóa kháng nguyên F1, nhằm biểu hiện trong tế bào Escherichia coli. Sau khi tối ưu hóa mã bộ ba mã hóa amino acid (codon) cho E. coli, gen caf1 đã được tổng hợp bằng phương pháp “gapless” PCR. Kết quả giải trình tự cho thấy phương pháp này cho phép tổng hợp được trình tự gen mục tiêu với độ chính xác là 2/6 dòng plasmid. Tiếp đó, trình tự gen này đã được đưa vào vector pET-52b(+) và biểu hiện trong tế bào E. coli BL21 (DE3) ở dạng dung hợp với đuôi ái lực (His)10. Các kết quả điện di protein SDS-PAGE, tinh sạch protein bằng sắc ký ái lực Ni và Western blot cho thấy kháng nguyên tái tổ hợp F1 đã được tạo ra thành công với hiệu suất lớn ở dạng thể vùi trong tế bào E. coli

ĐỘC LỰC VÀ TÍNH MẪN CẢM KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN E. COLI PHÂN LẬP TỪ LỢN CON THEO MẸ BỊ BỆNH TIÊU CHẢY Ở THỊ XÃ HƯƠNG TRÀ, TỈNH THỪA THIÊN HUẾ

Tóm tắt: Thông qua thu thập 120 mẫu phân từ hai phương thức nuôi nông hộ và trang trại chăn nuôi ở Thị xã Hương Trà tỉnh Thừa Thiên Huế để phân lập và xác định đặc tính sinh học của E.coli, kết quả cho thấy tỷ lệ phân lập vi khuẩn E. coli từ mẫu phân lợn con tiêu chảy nuôi tại trang trại là 83,3 %, tại nông hộ là 93,3 %. 100 % số chủng phân lập được có khả năng di động, có phản ứng sinh Indol, MR dương tính; 100 % các chủng đều lên men đường. Hình thái và đặc tính sinh vật hoá học của vi khuẩn E. coli phân lập được đều mang đặc điểm chung của giống E. coli và phù hợp với những đặc tính điển hình được mô tả. Thông qua tiêm truyền động vật thí nghiệm, chúng tôi nhận thấy 37,5 % số chủng gây chết chuột nhắt trắng trong vòng 24 h đến 36 h trong khi đó 62,5 % chủng gây chết chuột ở 36 h đến 48 h. Thông qua đánh giá tính mẫn cảm với kháng sinh thông dụng trong thú y chúng tôi nhận thấy các chủng E. coli phân lập được từ trang trại và nông hộ mẫn cảm với colistin, khá mẫn cảm với kanamycine trong khi đó lại đề kháng với các loại kháng sinh: gentamicin, tetracycline, streptomycin, ciprofloxacin, ofloxacin.Từ khóa: lợn con theo mẹ, tiêu chảy, E.coli, kháng kháng sin

CARPAINONE: ALKALOIT MỚI TỪ LÁ CÂY ĐU ĐỦ

Cây Đu Đủ (Carica papaya L.) thuộc họ Caricaceae là loại cây có nhiều tác dụng tốt cho sức khoẻ. Dịch chiết của lá Đu đủ thể hiện hoạt tính chống ung thư, chống oxy hóa, kháng vi sinh vật kiểm định và có tác dụng chống viêm, điều hòa miễn dịch. Trong khuôn khổ bài báo này, chúng tôi trình bày việc phân lập và xác định cấu trúc hóa học, đồng thời đánh giá hoạt tính gây độc tế bào, kháng khuẩn và chống oxy hóa của hợp chất ancaloit mới được đặt tên là Carpainone (1) từ lá cây Đu Đ

PHÁT XUNG PICÔ GIÂY HỒNG NGOẠI GẦN BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHỌN LỌC THỜI GIAN PHỔ

Động học phổ của laser hồng ngoại băng rộng phát ra từ một buồng cộng hưởng (BCH) ngắn có độ phẩm chất thấp đã được nghiên cứu với hệ phương trình tốc độ mở rộng cho nhiều bước sóng. Các kết quả thu được cho thấy khả năng phát trực tiếp xung laser màu picô giây hồng ngoại bằng phương pháp chọn lọc thời gian phổ (STS

Phát triển ngành nghề tiểu thủ công nghiệp ở Thừa Thiên Huế

Ngành nghề tiểu thủ công nghiệp (TTCN) là một bộ phận hợp thành công nghiệp nông thôn. Nhiều nghiên cứu chỉ ra vai trò quan trọng của việc phát triển TTCN đối với nền kinh tế, đặc biệt ở các nước đang phát triển như Việt Nam. Tại nước ta, mặc dù có nhiều tiềm năng phát triển nhưng ngành nghề TTCN chưa được nghiên cứu đầy đủ. Cho đến nay, ở Thừa Thiên Huế chưa có nhiều nghiên cứu đầy đủ về TTCN tiếp cận theo ngành nghề. Do đó, chúng tôi tiến hành nghiên cứu này nhằm đạt được hai mục tiêu: (1) tìm hiểu thực trạng ngành nghề TTCN; và (2) gợi ý chính sách phát triển ngành nghề TTCN ở Thừa Thiên Huế. Công trình nghiên cứu được tiến hành dựa trên số liệu khảo sát 213 cơ sở TTCN ở Thừa Thiên Huế theo các nhóm ngành chính: chế biến thực phẩm; đúc đồng; mộc mỹ nghệ; thêu, may áo dài; mây, tre, làm nón; và khai thác vật liệu xây dựng. Kết quả khảo sát cho thấy có nhiều hạn chế về nguồn lực, năng lực của chủ cơ sở để mở rộng hoạt động kinh doanh. Theo đó, nhóm nghiên cứu đề xuất các gợi ý phát triển ngành nghề TTCN ở Thừa Thiên Huế trong tương lai

Phát triển ngành nghề tiểu thủ công nghiệp ở Thừa Thiên Huế

Ngành nghề tiểu thủ công nghiệp (TTCN) là một bộ phận hợp thành công nghiệp nông thôn. Nhiều nghiên cứu chỉ ra vai trò quan trọng của việc phát triển TTCN đối với nền kinh tế, đặc biệt ở các nước đang phát triển như Việt Nam. Tại nước ta, mặc dù có nhiều tiềm năng phát triển nhưng ngành nghề TTCN chưa được nghiên cứu đầy đủ. Cho đến nay, ở Thừa Thiên Huế chưa có nhiều nghiên cứu đầy đủ về TTCN tiếp cận theo ngành nghề. Do đó, chúng tôi tiến hành nghiên cứu này nhằm đạt được hai mục tiêu: (1) tìm hiểu thực trạng ngành nghề TTCN; và (2) gợi ý chính sách phát triển ngành nghề TTCN ở Thừa Thiên Huế. Công trình nghiên cứu được tiến hành dựa trên số liệu khảo sát 213 cơ sở TTCN ở Thừa Thiên Huế theo các nhóm ngành chính: chế biến thực phẩm; đúc đồng; mộc mỹ nghệ; thêu, may áo dài; mây, tre, làm nón; và khai thác vật liệu xây dựng. Kết quả khảo sát cho thấy có nhiều hạn chế về nguồn lực, năng lực của chủ cơ sở để mở rộng hoạt động kinh doanh. Theo đó, nhóm nghiên cứu đề xuất các gợi ý phát triển ngành nghề TTCN ở Thừa Thiên Huế trong tương lai

Mô hình dự báo giá tôm sú xuất khẩu Việt Nam

Dự báo giá xuất khẩu có vai trò quan trọng đối với doanh nghiệp xuất khẩu và các nhà lập chính sách để đưa ra quyết định kinh doanh có tính chiến lược. Mục tiêu của nghiên cứu là sử dụng mô hình SARIMA để dự báo giá giao lên tàu (FOB) thực tôm sú ngắn hạn với nguồn số liệu là chuỗi giá tôm sú có kích cỡ 30-40 con/kg theo thời gian từ tháng 1/2011 đến tháng 12/2016. Kết quả nghiên cứu khẳng định mô hình (2,1,1)(0,1,11)12 là phù hợp để giải thích được sự biến động giá FOB thực của tôm sú trong giai đoạn nói trên. Đồng thời, mô hình dự báo rất đáng tin cậy, giá trị thực của tháng 1 trong năm 2017 nằm trong khoảng tin cậy 95% và gần bằng với giá trị dự báo với điểm sai số dự báo nhỏ

NGHIÊN CỨU PHẢN ỨNG QUANG OXY HÓA XANH METHYLEN TRÊN XÚC TÁC TiO2 NANO DƯỚI TÁC DỤNG CỦA ÁNH SÁNG MẶT TRỜI

Bài báo này trình bày hoạt tính xúc tác quang oxi hóa xanh methylen trên xúc tác TiO2 dưới tác dụng của ánh sáng mặt trời. Hình thái của TiO2 nano ảnh hưởng đến hoạt tính xúc tác của nó. TiO2 nano kích thước 20 - 70 nm thể hiện hoạt tính xúc tác cao hơn các hạt TiO2 hình cầu đường kính cỡ micromet hình thành từ sự kết cụm của một số hạt kích thước khoảng 25 nm, do các hạt bên trong ít được kích hoạt. Sự oxi hóa xanh methylen trên xúc tác quang TiO2 nano tuân theo động học Langmuir Hinshelwood