Systematic screening for novel, serologically reactive Hepatitis E Virus epitopes

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>The National Institutes of Health classified Hepatitis E as an emerging disease since Hepatitis E Virus (HEV) is the major cause of acute hepatitis in developing countries. Interestingly, an increasing number of sporadic cases of HEV infections are described in industrialized countries as zoonosis from domestic livestock. Despite the increasing relevance of this pathogen in clinical virology, commercial antibody assays are mainly based on fragments of HEV open reading frame (ORF) 2 and ORF3. The largest ORF1 (poly-)protein, however, is not part of current testing formats.</p> <p>Methods</p> <p>From a synthesized full length HEV genotype 1 cDNA-bank we constructed a complete HEV gene library consisting of 15 respective HEV ORF domains. After bacterial expression and purification of nine recombinant HEV proteins under denaturating conditions serum profiling experiments using 55 sera from patients with known infection status were performed in microarray format. SPSS software assessed the antigenic potential of these nine ORF domains in comparison to seven commercial HEV antigens (genotype 1 and 3) by performing receiver operator characteristics, logistic regression and correlation analysis.</p> <p>Results</p> <p>HEV antigens produced with our method for serum profiling experiments exhibit the same quality and characteristics as commercial antigens. Serum profiling experiments detected Y, V and X domains as ORF1-antigens with potentially comparable diagnostic significance as the well established epitopes of ORF2 and ORF3. However no obvious additional increase in sensitivity or specificity was achieved in diagnostic testing as revealed by bioinformatic analysis. Additionally we found that the C-terminal domain of the potential transmembrane protein ORF3 is responsible for IgG and IgM seroreactivity. Data suggest that there might be a genotype specific seroreactivity of homologous ORF2-antigens.</p> <p>Conclusions</p> <p>The diagnostic value of identified ORF1 epitopes might not necessarily improve sensitivity and specificity, but broaden the overall quality of existing test systems. ORF2 and ORF3-antigens are still commonly used in diagnostic assays and possibly hold the potential to serologically differentiate between genotype 1 and 3 infections. Our systematic approach is a suitable method to investigate HEV domains for their serologic antigenicity. Epitope screening of native viral domains could be a preferable tool in developing new serologic test components.</p

Immunomodulatory Properties of Bacterium-Like Particles Obtained From Immunobiotic Lactobacilli: Prospects for Their Use as Mucosal Adjuvants

Non-viable lactic acid bacteria (LAB) have been proposed as antigen delivery platforms called bacterium-like particles (BLPs). Most studies have been performed with Lactococcus lactis-derived BLPs where multiple antigens were attached to the peptidoglycan surface and used to successfully induce specific immune responses. It is well-established that the immunomodulatory properties of LAB are strain dependent and therefore, the BLPs derived from each individual strain could have different adjuvant capacities. In this work, we obtained BLPs from immunomodulatory (immunobiotics) and non-immunomodulatory Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus plantarum strains and comparatively evaluated their ability to improve the intestinal and systemic immune responses elicited by an attenuated rotavirus vaccine. Results demonstrated that orally administered BLPs from non-immunomodulatory strains did not induce significant changes in the immune response triggered by rotavirus vaccine in mice. On the contrary, BLPs derived from immunobiotic lactobacilli were able to improve the levels of anti-rotavirus intestinal IgA and serum IgG, the numbers of CD24+B220+ B and CD4+ T cells in Peyer's patches and spleen as well as the production of IFN-γ by immune cells. Interestingly, among immunobiotics-derived BLPs, those obtained from L. rhamnosus CRL1505 and L. rhamnosus IBL027 enhanced more efficiently the intestinal and systemic humoral immune responses when compared to BLPs from other immunobiotic bacteria. The findings of this work indicate that it is necessary to perform an appropriate selection of BLPs in order to find those with the most efficient adjuvant properties. We propose the term Immunobiotic-like particles (IBLPs) for the BLPs derived from CRL1505 and IBL027 strains that are an excellent alternative for the development of mucosal vaccines.Fil: Raya Tonetti, María Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Arce, Lorena Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Salva, Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Alvarez, Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Takahashi, Hideki. Tohoku University; JapónFil: Kitazawa, Haruki. No especifíca;Fil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentin

Early detection of Varicella-Zoster Virus (VZV)-specific T-cells before seroconversion in primary varicella infection: case report

Here we report the case of a 54-year old, immunocompetent German patient with primary varicella whose Varicella-Zoster Virus (VZV)-specific T-cell responses could be detected early in infection and before the onset of seroconversion. This case demonstrates that the detection of VZV-specific T-cells may under certain circumstances support the diagnosis of a primary varicella infection, as for example in cases of atypical or subclinical varicella or in the absence of detectable VZV DNA in plasma

Capacidad inhibitoria del escobajo, desecho de la industria vitivinícola, sobre cepas de (candida albicans) aisladas de pacientes con candidiasis vulvovaginal

Introducción. La Candidiasis Vulvovaginal (CVV) es una infección micótica de alta incidencia y recurrencia que causa dolor, irritación y prurito en la zona afectada. El 75% de las mujeres sufren por lo menos un episodio a lo largo de su vida. El agente etiológico más frecuente es Candida albicans. El tratamiento consiste principalmente en el uso de azoles antifúngicos, que provocan numerosos efectos secundarios y aparición de cepas resistentes. Por lo tanto, la búsqueda de nuevos agentes antimicóticos es necesaria y una posible fuente la representan los metabolitos de los residuos de la industria vitivinícola. El escobajo, material vegetal que soporta el racimo de la uva, conserva junto con el orujo un alto contenido de polifenoles luego del proceso de elaboración del vino.Objetivo. Evaluar la capacidad inhibidora de los extractos ricos en compuestos fenólicos del escobajo, residuo de la industria vitivinícola, sobre cepas de Candida albicans aisladas de muestras clínicas. Metodología. El extracto de escobajo (EE) se obtuvo por extracción continua en Soxhlet usando etanol como solvente. Se cuantificaron los compuestos fenólicos totales del EE y se evaluó su toxicidad sobre la viabilidad, el desarrollo larval y la reproducción de Caenorhaditis elegans. Se determinó la actividad antifúngica in vitro del EE (400, 600 y 800 µg/mL) sobre 2 cepas de Candida albicans (IBL001 e INM982891) mediante métodos de difusión en agar y de entrecruzamiento. Se determinó la capacidad del EE para inhibir el crecimiento (CIM) y la formación de biofilm de ambas cepas de C. albicans. La capacidad protectora de la muerte causada por cándida se estudió in vivo sobre el nematodo C. elegans infectado con IBL001 y INM982891.Resultados. El rendimiento del EE fue de 15%, lo que indica que la técnica de extracción utilizada fue apropiada. El EE inhibió el crecimiento de ambas cepas de C. albicans ensayadas (CIM 650 µg/mL) y la formación del biofilm por las mismas en ∼90%. Por otro lado, no alteró la viabilidad, el desarrollo normal ni la reproducción de C. elegans a las concentraciones ensayadas. El EE redujo en un 18% la muerte causada por la infección con las cepas IBL001 e INM982891 en el nematodo, utilizando 400 y 800 µg/mL, respectivamente para cada una. Este efecto fue similar al efecto protector de 1 mg/mL de Fluconazol, usado como control. Conclusiones. El EE fue efectivo para inhibir in vitro el crecimiento y el biofilm de dos cepas de C. albicans aisladas de pacientes con vulvovaginitis. Este efecto se vio reflejado en el ensayo in vivo, protegiendo al nematodo de la muerte causada por el patógeno. Dada la necesidad de encontrar nuevos agentes antimicóticos para el tratamiento de CVV causada por C. albicans, y de hallar formas alternativas de revalorizar y utilizar los desechos de las industrias ricos en metabolitos activos, el extracto de escobajo demostró tener actividad antifúngica para ser explotada en el desarrollo de nuevos antimicóticos.Fil: D'almeida, Romina Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Vallejo, Claudia Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Microbiología "Luis Verna". Cátedra de Microbiología General; ArgentinaFil: Perez Merello, Mercedes. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Microbiología "Luis Verna". Cátedra de Microbiología General; ArgentinaFil: Vera, María Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Rodriguez Vaquero, Maria Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Microbiología "Luis Verna". Cátedra de Microbiología General; ArgentinaXV Congreso Argentino de Microbiología; V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos; XIV Congreso Argentino de Microbiología GeneralCiudad Autónoma de Buenos AriesArgentinaAsociación Argentina de Microbiologí

Strawberry polyphenols with antihypertensive and antioxidant activities as natural antifungal in strawberry-orange juice

Tucumán is the leading producer of strawberries in Argentinaand consumption of strawberry juice is high. The contaminatingmicrobiota that can be present in strawberry juice is mainly constitutedof yeasts extraordinarily resistant to chemical preservativescommonly used in the juice industry. On the other hand, there isa high amount of damaged strawberries which is discarded duringharvest, so that their reutilization as source of polyphenols withantifungal activity could be a good alternative.The aim of this work was the recovery and identification ofphenolic compounds present in strawberries and the investigationof their beneficial properties, such as antimicrobial, antihypertensiveand antioxidant activities. Orange-strawberry juice was usedas food model system. Our results demonstrated that strawberrypolyphenols possess antioxidant and antihypertensive activities upto 60%. Microbiological and sensorial analysis of juices enrichedwith polyphenols and inoculated with yeasts were performedthroughout two weeks of storage at 4, 20 and 28 ◦C. The addition ofphenolic compounds significantly increased antioxidant and antihypertensivecapacity of strawberry-orange juice when comparedto fresh control. Polyphenols treatments, alone or combined withmetabisulfite, completely killedspoilage yeasts in juice samples,at all conditions tested. Thus, polyphenols from strawberry couldbe feasible alternatives to improve microbiological quality withlow impact on the organoleptic properties of polyphenols-enrichedstrawberry-orange juice.Fil: Rodriguez Vaquero, Maria Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán; ArgentinaFil: Vallejo, Claudia Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán; ArgentinaFil: Torres, E.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán; ArgentinaFil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina18th European Congress on BiotechnologyGinebraSuizaEuropean Federation of Biotechnolog

Composición química del aceite esencial de Acanthostyles buniifolius (Asteraceae) y su actividad antifúngica sobre Candida spp.

Se evaluó la actividad antifúngica del aceite esencial(AE) de A. buniifolius sobre cuatro cepas de Candida sp. (C. albicans,. parapsilosis, C. famata y C. tropicalis). El AE obtenido se caracteriza por un alto contenido de monoterpenos siendo el sabineno (58%) el componente predominante.El AE inhibió el crecimiento de las cuatro cepas de Candida sp. testeadas en un orden de 2-4 log a las 24 hs. Sin embargo a las 48 hs algunas cepas recuperaron su capacidad de crecimiento por lo que estudios de mayor especificidad permitirán establecer si el AE esfungistático. Se determinó la concentración mínima inhibitoria, la cual fue 25 ug/ml. De la composición del aceite, inferimos que su principal componente, el sabineno, podría ser el responsable de los efectos biológicos observados según los datos informados sobrebioactividad de monoterpenos. El AE de A. boniifolius presenta un interesante potencial por su actividad contra Candida spp., por lo que continuaremos estudiando su mecanismo de acción y el rol del sabineno puro en la actividad observada.Fil: Guerra, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Lizarraga, Emilio Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Química del Noroeste. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química del Noroeste; ArgentinaFil: Catalan, Cesar Atilio Nazareno. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Química del Noroeste. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química del Noroeste; ArgentinaFil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaIII Congreso Bioquímico del Litoral; XVI Jornadas Argentinas de MicrobiologíaSanta FéArgentinaAsociación Argentina de Microbiologí

Modulation of mucosal antiviral immune response at the female genital tract by immunobiotic lactic acid bacteria

The female genital tract (FGT) has unique characteristics, which have evolved to adequately carry on its vital function of reproduction. Thus, on the one hand the FGT has to be tolerogenic enough not to reject the allogeneic sperm and fetus in order to ensure procreation and; on the other hand it should be reactive enough for clearing viral, bacterial, fungal and parasitic pathogens. To increase complexity, there is a constant exposure of mucosal cells to an endogenous microbiota [1-3], and to the direct and indirect action of sexual hormones (estradiol and progesterone) [4]. The immunity of the FGT has not been studied as extensively as the immunity of the gut, and the antiviral response at this important mucosal site is even less understood. In line with this, immune modulation by lactic acid bacteria (LAB) offers a brand new field of research. In this review, we discuss some recent advances in the understanding of viral infections at the FGT, the use of TLR-ligands as possible therapeutic tools, and the hallmarks during the infection process, which may be used for modulation of the antiviral responses using immunobiotic and/or recombinant LAB expressing viral antigens.Fil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina;Fil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Centro de Referencia Para Lactobacilos (i); Argentina; Tohoku University. Graduate School of Agricultural Science. Department of Science of Food Function and Health. Food and Feed Immunology Group. Laboratory of Animal Products Chemistry; Japón;Fil: Rodriguez, Ana Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Centro de Referencia Para Lactobacilos (i); Argentina;Fil: Kitazawa, Haruki. Tohoku University. Graduate School of Agricultural Science. Department of Science of Food Function and Health. Food and Feed Immunology Group. Laboratory of Animal Products Chemistry; Japón;Fil: Salva, Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Centro de Referencia Para Lactobacilos (i); Argentina;Fil: Alvarez, Gladis Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Centro de Referencia Para Lactobacilos (i); Argentina; Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquimica, Quimica y Farmacia. Instituto de Bioquimica Clinica Aplicada. Catedra de Bioquimica Clinica I; Argentina

Modulation of mucosal antiviral immune response by immunobiotic lactic acid bacteria 5 Part I: the intestinal mucosa

Viruses are the most important cause of severe mucosal infections worldwide especially in high risk populations such as in infants, young children, elderly and immunocompromised hosts. A significant improvement in the knowledge of how the host immune response contributes to the pathogenesis of viral infections has been made during the last decade. This understanding of host response and molecular pathogenesis of viral infections has been critical for the development of vaccines, antivirals and other disease intervention approaches such as probiotic functional foods. Lactic acid bacteria (LAB) are technologically and commercially important and have various beneficial effects on human health. Several studies have demonstrated that certain LAB strains can exert their beneficial effect on the host through their immunomudulatory activity. These strains, termed immunobiotics, have been used for the development of probiotic foods with the ability to stimulate mucosal antiviral immunity. In this review we examine the current scientific literature concerning the advances in our understanding of how commensal microorganisms are able to modulate intestinal viral immunity and affect the outcome of viral diseases. Research from the last decade demonstrates that immunobiotic LAB represent a promising resource for the development of prevention strategies against viral infections that could be effective tools for medical application.Fil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentina. Tohoku University; JapónFil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; ArgentinaFil: Rodriguez, Ana Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Salva, Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Alvarez, Gladis Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Aplicada; ArgentinaFil: Kitazawa, Haruki. Tohoku University; Japó

Modulation of mucosal antiviral immune response by immunobiotic lactic acid bacteria - Part II: the respiratory mucosa

Viruses are the most important cause of severe mucosal infections worldwide especially in high risk populations such as in infants, young children, elderly and immunocompromised hosts. Lactic acid bacteria (LAB) are technologically and commercially important and have various beneficial effects on human health. Several studies have demonstrated that certain LAB strains can exert their beneficial effect on the host through their immunomudulatory activity. These strains, termed immunobiotics, have been used for the development of probiotic foods with the ability to stimulate mucosal antiviral immunity. In this review we examine the current scientific literature concerning the advances in our understanding of how probiotic microorganisms are able to modulate respiratory viral immunity and affect the outcome of viral diseases. Moreover, this review explores the recent advances of our laboratories regarding the cellular and molecular interactions between immunobiotics and hosts cells and how this interaction modulate the resistance against respiratory viral infections. Research from the last decade demonstrates that immunobiotic LAB represent a promising resource for the development of prevention strategies against viral infections that could be effective tools for medical application.Fil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentina. Tohoku University; JapónFil: Vizoso Pinto, María Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet Noa Sur. Instituto Superior de Investigaciones Biologicas. Grupo de Investigacion y Desarrollo del Noroeste Argentino | Universidad Nacional de Tucuman. Instituto Superior de Investigaciones Biologicas. Grupo de Investigacion y Desarrollo del Noroeste Argentino.; ArgentinaFil: Rodriguez, Ana Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Kitazawa, Haruki. Tohoku University; JapónFil: Salva, Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Alvarez, Gladis Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Aplicada; Argentin