Quantitative correlation between transcriptional levels of ER chaperone, peroximal protein and FVIII productivity in human Hek-293 cell line

Hek-293 cell line presents good production platform for recombinant therapeutic proteins, however little is known about the components that contribute to the cellular control of recombinant protein production. In this study, we generated a Hek-293 producing recombinant factor VIII (FVIII) and we evaluated the immunoglobulin-binding protein (BiP) and phytanoil-CoA α-hydroxylase (PAHX) expression levels which are known for diminishing FVIII production. Our analyses showed that the recombinant cell population expresses 3.1 ± 1.4 fold of BIP mRNA (P = 0.0054) and 97.8 ± 0.5 fold of PAHX mRNA (P = 0.0016) compared to nontransduced cells. The amount of these proteins was inversely correlated to the secreted FVIII. In conclusion, BIP and PAHX expression are augmented in human cells producing FVIII and they antagonize the amount of therapeutic factor VIII in the cell culture.This study was supported by the Center for Cell-based Therapy (CTC) and Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo – FAPESP. The authors acknowledge Dr. Garry P. Nolan for contributing with the pBMN-I-GFP vector and David Marco Antonio for statistical support. We thank Fernanda Udinal and Alessandra Almeida for English language support. We also thank Sandra Navarro Bresciani for preparing the figures.This study was supported by the Center for Cellbased Therapy (CTC) and Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo – FAPESP. The authors acknowledge Dr. Garry P. Nolan for contributing with the pBMNIGFP vector and David Marco Antonio for statistical support. We thank Fernanda Udinal and Alessandra Almeida for English language support. We also thank Sandra Navarro Bresciani for preparing the figures

AgNP-PVP-meglumine antimoniate nanocomposite reduces Leishmania amazonensis infection in macrophages

Institute Evandro Chagas (IEC), Department of Health Surveillance, Ministry of Health: Laboratory of Electron Microscopy and Laboratory of Superficial and Systemic Mycoses. Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), grant number: 424101/2016-5. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - finance code 001.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Laboratório de Microscopia Eletrônica. Belém, PA, Brasil / Federal University of Pará. Postgraduate Program in Biology of Infectious and Parasitic Agents. Belém, PA, Brazil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Laboratório de Microscopia Eletrônica. Belém, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Laboratório de Microscopia Eletrônica. Belém, PA, Brasil / Federal University of Pará. Postgraduate Program in Biology of Infectious and Parasitic Agents. Belém, PA, Brazil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Laboratório de Microscopia Eletrônica. Belém, PA, Brasil.Background: Leishmaniasis is an infectious disease caused by parasites of the genus Leishmania and presents different clinical manifestations. The adverse effects, immunosuppression and resistant strains associated with this disease necessitate the development of new drugs. Nanoparticles have shown potential as alternative antileishmanial drugs. We showed in a previous study the biosynthesis, characterization and ideal concentration of a nanocomposite that promoted leishmanicidal activity. In the present study, we conducted a specific analysis to show the mechanism of action of AgNP-PVP-MA (silver nanoparticle-polyvinylpyrrolidone-[meglumine antimoniate (Glucantime (R))]) nanocomposite during Leishmania amazonensis infection in vitro. Results: Through ultrastructural analysis, we observed significant alterations, such as the presence of small vesicles in the flagellar pocket and in the extracellular membrane, myelin-like structure formation in the Golgi complex and mitochondria, flagellum and plasma membrane rupture, and electrodense material deposition at the edges of the parasite nucleus in both evolutive forms. Furthermore, the Leishmania parasite infection index in macrophages decreased significantly after treatment, and nitric oxide and reactive oxygen species production levels were determined. Additionally, inflammatory, and pro-inflammatory cytokine and chemokine production levels were evaluated. The IL-4, TNF-alpha and MIP-1 alpha levels increased significantly, while the IL-17 A level decreased significantly after treatment. Conclusions: Thus, we demonstrate in this study that the AgNP-PVP-MA nanocomposite has leishmanial potential, and the mechanism of action was demonstrated for the first time, showing that this bioproduct seems to be a potential alternative treatment for leishmaniasis

Estimating the Colored Dissolved Organic Matter in the Negro River, Amazon Basin, with In Situ Remote Sensing Data

Dissolved organic matter (DOM) is a crucial component of continental aquatic ecosystems. It plays a vital role in the carbon cycle by serving as a significant source and reservoir of carbon in water. DOM provides energy and nutrients to organisms, affecting primary productivity, organic composition, and the food chain. This study presents empirical bio-optical models for estimating the absorption of colored dissolved organic matter (aCDOM) in the Negro River using in situ remote sensing reflectance (Rrs) data. Physical–chemical data (TSS, DOC, and POC) and optical data (aCDOM and Rrs) were collected from the Negro River, its tributaries, and lakes and empirical relationships between aCDOM at 440 nm, single band, and the ratio bands of Rrs were assessed. The analysis of spectral slope shows no statistically significant correlations with DOC concentration or aCDOM absorption coefficient. However, strong relationships were observed between DOC and aCDOM (R2 = 0.72), aCDOM and Rrs at 650 nm (R2 > 0.80 and RMSE −1), as well as aCDOM and the green/red band ratio (R2 > 0.80 and RMSE −1). aCDOM displayed large spatial and temporal variations, varying from 1.9 up to 20.1 m−1, with higher values in rivers of the upper course of the Negro basin and lower values in rivers with total solids suspended > 10 mg·L−1. Environmental factors that influence the production of dissolved organic matter include soil type, dense forest cover, high precipitation, and low erosion rates. This study demonstrated that aCDOM can serve as an indicator of DOC, and Rrs can serve as an indicator of aCDOM in the Negro basin. Our findings offer a starting point for future research on the optical properties of Amazonian black-water rivers

Analysis of an acute Chagas disease outbreak in the Brazilian Amazon: human cases, triatomines, reservoir mammals and parasites

Secretaria de Vigilância em Saúde — SVS and the European Community Latin American Network for Research on the Biology and Control of Triatomines — ECLATMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Secretaria de Saúde do Estado do Amapá. Macapá, AP, Brazil.Secretaria de Saúde do Estado do Amapá. Macapá, AP, Brazil.Secretaria de Saúde do Estado do Amapá. Macapá, AP, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brazil.An outbreak of Chagas disease occurred in Mazagão, Amapá, Brazilian Amazon in 1996. Seventeen of 26 inhabitants presented symptoms compatible with acute Chagas disease and were submitted to parasitological and serological tests. All 17 were positive in at least one parasitological test and 11 were also IgM or IgG anti-Trypanosoma cruzi positive. The nine asymptomatic patients were negative for parasites and one was positive for IgG anti-T. cruzi. Sixty-eight triatomines were captured (66 Rhodnius pictipes; two Panstrongylus geniculatus); 45 were infected with T. cruzi (43 R. pictipes; two P. geniculatus). Thirteen trypanosomatid strains were isolated: eight from humans and five from R. pictipes. Four were genotyped as T. cruzi I (two from humans; two from R. pictipes), seven as T. cruzi Z3 (six from humans; one from R. pictipes) and two as T. cruzi Z3 and T. rangeli (from R. pictipes). Treatment started for all patients leading to a decrease in parasitaemia in 16 during the follow-up period (6 months, 1, 5 and 7 years). All were serologically negative 7 years post-treatment. There was an overlap of genotypes in the same ecotope, raising the possibility of transmission through the oral route and the need for early therapeutic intervention for better patient management in the Brazilian Amazon

Alterações ventilatórias durante o uso de trocadores de calor e umidade em pacientes submetidos à ventilação mecânica com pressão de suporte e ajustes nos parâmetros ventilatórios para compensar estas possíveis alterações: estudo de intervenção autocontrolado em humanos

RESUMO Objetivo: Avaliar as possíveis alterações do volume corrente, volume-minuto e frequência respiratória causadas pela utilização de trocadores de calor e umidade em pacientes submetidos à ventilação mecânica na modalidade pressão de suporte, e quantificar a variação da pressão de suporte necessária para compensar o efeito causado pelo trocador de calor e umidade. Métodos: Os pacientes sob ventilação mecânica invasiva na modalidade pressão de suporte foram avaliados utilizando umidificadores aquecidos e trocadores de calor e umidade. Caso o volume encontrado com uso de trocadores de calor e umidade fosse menor que o achado com o umidificador aquecido, iniciava-se o aumento da pressão de suporte, perante o uso de trocadores de calor e umidade, até ser encontrado um valor de pressão de suporte que possibilitasse ao paciente gerar um valor próximo do volume corrente inicial com umidificador aquecido. A análise foi realizada por meio do teste t pareado, e os valores de incremento foram expressos em porcentagem de aumento necessário. Resultados: Foram avaliados 26 pacientes. O uso de trocadores de calor e umidade aumentou a frequência respiratória, e reduziu o volume corrente e o volume-minuto, quando comparados com o uso do umidificador aquecido. Com o uso de trocadores de calor e umidade, os pacientes precisaram de um incremento de 38,13% na pressão de suporte para manter os volumes prévios. Conclusão: O trocador de calor e umidade alterou os parâmetros de volume corrente, volume-minuto e frequência respiratória, sendo necessário um aumento da pressão de suporte para compensar estas alterações

Reperfusion after 4·5 hours reduces infarct growth and improves clinical outcomes

Background: The currently proven time window for thrombolysis in ischemic stroke is 4·5h. Beyond this, the risks and benefits of thrombolysis are uncertain. Aims: To determine whether thrombolysis and reperfusion were beneficial after 4·5h, we examined clinical and radiological outcomes in patients treated with tissue plasminogen activator or placebo within 4·5-6h, using data from the Echoplanar Imaging Thrombolytic Evaluation Trial. Methods: In the Echoplanar Imaging Thrombolytic Evaluation Trial, ischemic stroke patients presenting three to six-hours after stroke onset were randomized to tissue plasminogen activator or placebo, without knowledge of magnetic resonance imaging results. This analysis was restricted to patients treated between 4·5 and 6h. The effect of tissue plasminogen activator and reperfusion on infarct growth between baseline diffusion-weighted imaging and day 90 T2 imaging was assessed, along with good neurological outcome (≥8 point reduction or reaching 0-1 at 90 days on National Institutes of Health Stroke Scale) and functional outcome (modified Rankin scale). The effect of tissue plasminogen activator on reperfusion was also analyzed. Results: Sixty-nine patients were treated 4·5-6h after onset, and infarct growth was assessed in 63. Tissue plasminogen activator was associated with lower relative growth (94% vs. 168%, <i>P</i>=0·03) and a trend to lower absolute growth (-0·17ml versus 9·6ml, <i>P</i>=0·07). Reperfusion was increased in the tissue plasminogen activator group (58% versus 25%, <i>P</i>=0·03) and was associated with increased rates of good neurological (86% versus 28% <i>P</i><0·001) and functional (modified Rankin scale 0-2 73% versus 34%, <i>P</i>=0·01) outcomes. Reperfusion was strongly associated with lower relative (80% versus 189%, <i>P</i><0·001) and absolute (-2·5ml versus 40ml, <i>P</i><0·001) infarct growth. Conclusions: Thrombolysis 4·5-6h after stroke onset reduced infarct growth and increased the rate of reperfusion, which was associated with good neurological and functional outcome

O impacto do protocolo de desmame de traqueostomia em pacientes vítimas de traumatismo cranioencefálico internados no hospital metropolitano de urgência e emergência no pará

Esta pesquisa surgiu da vivência em um Hospital de referência em Trauma, onde foi observado um grande número de pacientes com diagnóstico de traumatismo cranioencefálico e que, ao passarem um tempo demasiado longo hospitalizados, evoluíam para a traqueostomia e, em consequência, pôde-se observar seu processo de desmame e decanulação que, no âmbito do Hospital Metropolitano é realizada de forma diferenciada. Foi estudada a relação entre o tempo de desmame e decanulação da traqueostomia e o tempo de hospitalização, a presença de complicações pós-traqueostomia e o protocolo de desmame de traqueostomia adotado pelo hospital. Objetivamos analisar a relação entre o tempo de hospitalização dos pacientes vítimas de traumatismo cranioencefálico e que realizaram traqueostomia e a realização do protocolo de desmame do hospital, bem como observar a incidência das complicações que podem ocorrer. Os objetivos foram alcançados mediante realização de coleta de dados em prontuários de pacientes hospitalizados no HMUE no ano de 2012.  Observou-se a correlação no tempo de desmame e decanulação de traqueostomia no tempo de alta hospitalar e no tempo de hospitalização do paciente vítima de Trauma Cranioencefálico. A não padronização no processo do cuidado com a traqueostomia causa um grande desentendimento entre vários profissionais na hora de lidar com esse tipo de situação.

O IMPACTO DO PROTOCOLO DE DESMAME DE TRAQUEOSTOMIA EM PACIENTES VÍTIMAS DE TRAUMATISMO CRANIOENCEFÁLICO INTERNADOS NO HOSPITAL METROPOLITANO DE URGÊNCIA E EMERGÊNCIA NO PARÁDOI: http://dx.doi.org/10.5892/ruvrd.v13i1.2293

Esta pesquisa surgiu da vivência em um Hospital de referência em Trauma, onde foi observado um grande número de pacientes com diagnóstico de traumatismo cranioencefálico e que, ao passarem um tempo demasiado longo hospitalizados, evoluíam para a traqueostomia e, em consequência, pôde-se observar seu processo de desmame e decanulação que, no âmbito do Hospital Metropolitano é realizada de forma diferenciada. Foi estudada a relação entre o tempo de desmame e decanulação da traqueostomia e o tempo de hospitalização, a presença de complicações pós-traqueostomia e o protocolo de desmame de traqueostomia adotado pelo hospital. Objetivamos analisar a relação entre o tempo de hospitalização dos pacientes vítimas de traumatismo cranioencefálico e que realizaram traqueostomia e a realização do protocolo de desmame do hospital, bem como observar a incidência das complicações que podem ocorrer. Os objetivos foram alcançados mediante realização de coleta de dados em prontuários de pacientes hospitalizados no HMUE no ano de 2012.  Observou-se a correlação no tempo de desmame e decanulação de traqueostomia no tempo de alta hospitalar e no tempo de hospitalização do paciente vítima de Trauma Cranioencefálico. A não padronização no processo do cuidado com a traqueostomia causa um grande desentendimento entre vários profissionais na hora de lidar com esse tipo de situação.