Bovine babesiosis and anaplasmosis complex: diagnosis and evaluation of the risk factors from Bahia, Brazil

Direct diagnoses were made by using - blood smears and nested PCR (nPCR) tests on 309 blood samples from crossbred dairy cattle in the municipality of Ibicaraí, Bahia. From diagnostic blood smear slides, the observed parasitic frequencies were 31.1% for Anaplasma marginale and 20.4% for Babesia sp. From nPCR diagnoses, they were 63% for A. marginale, 34% for Babesia bigemina and 20.4% for Babesia bovis. There were significant differences (P <0.01) between the two diagnostic methods (nPCR and blood smear slides). The compliance obtained from the kappa test was 0.41 and 0.48 for A. marginale and Babesia sp., respectively. The tick samples from the six farms analyzed using nPCR were only positive for A. marginale. Evaluation of the risk factors relating to the presence of ticks and the age of the animals showed that there was a significant association (P <0.01) with the frequency of animals infected with both pathogens. Therefore, under the conditions studied, nPCR proved to be a good tool for diagnosing the agents of the bovine babesiosis and anaplasmosis complex because of its sensitivity and specificity in comparison with blood smears. The municipality of Ibicaraí is an area with endemic prevalence of bovine babesiosis and anaplasmosis confirmed by nPCR and A. marginale is the main agent of the disease

Diagnóstico molecular de Ehrlichia canis em cães com alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas no município de Ilhéus, Bahia, 38(4):345-352

RESUMO. Rocha J.M., Carvalho F.S., Oliveira H.C., Carlos R.S.A., Carneiro P.L.S., Albuquerque G.R. & Wenceslau A.A. [Molecular diagnosis of Ehrlichia canis in dogs with clinical signs, hematological and biochemical changes in the Municipality of Ilhéus, Bahia.] Diagnóstico molecular de Ehrlichia canis em cães com alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas no município de Ilhéus, Bahia. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 38(4):345-352, 2016. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, Universidade Estadual de Santa Cruz, Rodovia Jorge Amado, Km 16, Salobrinho, Ilhéus, BA 45662-900, Brasil. E-mail: [email protected] Objetivou-se com este trabalho identificar DNA de Ehrlichia canis em cães com alterações clínicas e ou hematológicas condizentes com a infecção, e identificar possíveis fatores de risco à infecção no município de Ilhéus, uma área endêmica à infecção. Foram coletadas 558 amostras de sangue de cães. Essas amostras foram divididas em frascos com e sem anticoagulante e foram confeccionados esfregaços sanguíneos para pesquisa direta na lâmina. Durante o momento da coleta os animais foram submetidos a exame clínico completo e avaliação para presença de carrapatos. O sangue com anticoagulante foi utilizado para realização de hemograma completo e testes moleculares para detecção de E. canis e o sem anticoagulante para os exames bioquímicos de Ureia, Creatinina e ALT. Antes da análise molecular e em lâmina, foi realizada uma triagem, onde foram selecionados animais que apresentassem sinais clínicos, hematológicos e bioquímicos sugestivos da infecção. Após essa triagem, foram selecionados 297 cães para a pesquisa de Ehrlichia sp. e E. canis. Dos animais avaliados pela metodologia molecular 85,52% (254/297) foram positivos para o gênero e 80,13% (238/297) foram positivos para a espécie E. canis pelo Nested–PCR. A visualização de mórulas nas lâminas foi verificada em 28,16% (84/297) de animais e todos também foram positivos pelo Nested-PCR. Dos animais positivos para E. canis, 25,39 % apresentaram caquexia, 17,46% apresentaram palidez em mucosas, 15,87% apresentaram petéquias e 1,58% apresentaram epistaxe, e outros 38,09% (24/63) apresentaram mais de uma das alterações concomitantes. Animais que apresentaram alterações em sinais clínicos foram estatisticamente significativos (p=0,02) em relação à positividade para E. canis. Com relação às alterações hematológicas 80,13% dos cães estavam infectados, sendo estas estatisticamente significantes (p=0,001). Os animais com anemia apresentaram significância estatística (p=0,001), porém, não foi constatada significância nos animais trombocitopênicos (p=0,28). Quando se avaliou animais que possuíam anemia em associação com trombocitopenia, os resultados foram significativos estatisticamente (p0,05), porém 48,82% (145/297) animais apresentaram controle carrapaticida anterior ao momento da coleta e, este dado foi significante (p=0,003). Com relação a avaliação bioquímica os resultados não foram estatisticamente significativos (p>0,05) para a infecção. Foram detectados pela análise molecular 19,04% de carrapatos infectados das 42 amostras de carrapatos coletados. Conclui-se que a região tem alta infecção por E. canis e os animais neste estudo, possivelmente estavam cursando com a fase crônica da infecção, no município de Ilhéus, BA