Gene expression and biochemistry of isoprenoid biosynthesis in the glandular secretory trichomes of Artemisia annua

The Chinese herb Artemisia annua possesses small 10-cell biseriate glandular trichomes on the surface of its aerial tissues. These trichomes were isolated from floral tissue using a Bead Beater based method. Expression patterns of expressed sequence tags from a trichome library whose Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) results suggested a possible function in terpenoid metabolism were investigated by RT-PCR. Known terpenoid biosynthetic enzymes, such as amorpha-4,11-diene synthase showed a high degree of trichome-specific expression. In order to investigate cell specific gene expression within the trichome, the promoter for the gene encoding amorpha-4,11-diene synthase was isolated but the lack of an efficient transformation protocol in A. annua hindered reporter gene localization experiments. Traditional and whole-mount in situ hybridization techniques were used to further the study of cell specific gene expression within the glandular trichome. An RNA probe constructed from the sequence of amorpha-4,11-diene synthase localized expression to the 2nd and 3rd subapical cell pairs of the glandular trichomes. This suggests that at least part of the artemisinin biosynthetic pathway resides within the lower cell pairs. To better understand the genes involved in terpenoid biosynthesis in A. annua, the full length sequence of a short chain alcohol dehydrogenase highly represented in an expressed sequence tag library and shown to have trichome-specific expression by RT-PCR, was cloned. Heterologous expression in Escherichia coli demonstrated that the enzyme was capable of oxidizing a wide range of monoterpenols to their corresponding ketone forms. All of this data helps us to better understand the organization of expression and biochemistry of terpenoids in A. annua glandular trichomes

Segurança jurídica dos atos jurisdicionais

Resumo: A segurança jurídica decorre da confiança e da previsibilidade depositadas nas estruturas do Estado. Esta concepção de segurança jurídica somente pode ser alcançada mediante um sistema estável de decisões judiciais. Nos países do common law, historicamente, observou-se uma maior aproximação sistêmica desses valores, com a adoção da teoria do stare decisis e a elaboração de técnica própria para revogação e alteração dos precedentes, preservando a confiança neles depositada. A compreensão e a comparação entre os sistemas jurídicos do common law (tradição anglo-saxã) e do civil law (tradição omano-germânica), demonstra que os fins perseguidos são os mesmos, embora as técnicas para sua obtenção, ainda, sejam diversas. A análise da atual formatação do sistema brasileiro aponta para a aproximação dos dois modelos jurídicos apresentados, e a perfeita aceitação de uma teoria constitucional de precedentes obrigatórios no Brasil. Admitida a vinculação das decisões judiciais das Cortes xtraordinárias (STF e STJ), e reconhecida a necessidade de conferir mais segurança e confiabilidade aos atos jurisdicionais, pertinente à avaliação dos efeitos dessas decisões e o reconhecimento de sua ubmissão ao princípio da irretroatividade do Direito. As decisões judiciais devem ser capazes de suprir a demanda de estabilidade, de previsibilidade e de confiança dos jurisdicionados e dos cidadãos. Assim, as modificações da jurisprudência estável somente são possíveis com a ressalva ao princípio da proteção da confiança, imprimindo efeitos prospetivos às alterações. A elaboração e a adoção de técnicas que lcancem a segurança jurídica, preservandose o próprio Estado Democrático de Direito, em consonância com os demais princípios constitucionais, despontam para a real aproximação do eterno desejo de Justiça

Оцінка впливу харчових кріопротекторів на якісні показники посіче-них напівфабрикатів

A prerequisite for the preservation of quality indices of truncated semi-finished products after defrosting is compliance with the recommended conditions of refrigeration. However, it is not always possible to maintain high consumer properties of frozen semi-finished products, as the degree of destructive influence of low minus temperatures on muscle fibers of meat raw materials also depends on its quality. In world practice, the issue of the use of physico-chemical methods of treating biotechnological objects is often discussed with the use of substances of cryoprotective action. In order to stabilize the functional and technological properties of low-grade meat raw material and protect frozen brooded semifinished products from the negative influence of physico-chemical factors, protein-hydrocarbon compositions of cryoprotective action were developed. According to the results of the research, the use of Vepro 75 PSC, sodium caseinate and vegetable fiber (wheat, flax, plantain) as part of semi-finished products helps to obtain high quality products with stable consumer properties. Stabilizing effect of protein-polysaccharide mixtures ... in the model samples, the cutlet manifests itself in improving their consistency, increasing juicing and other quality indicators. The most effective composition of the complex cryoprotective protein-polysaccharide mixture containing the blood plasma protein, sodium caseinate, plantain fiber and flaxseed was determined in equal proportions. It was established that the use of developed cryoprotective complex mixtures in the model of meat minced meat systems in the amount of 2% reduces the cryoscopic temperature by 2.09–2.81 ºС, reduces the mass fraction of frozen moisture by 0.9% and increases the moisture content capable of 9.7–15.3%, in comparison with the control sample, which positively affects the quality indices of finished products. According to the results of the conducted research, it was found that the use of protein-carbohydrate compositions in the half-finished semifinished products can preserve the dense structure and succulence of the semi-finished products after 30 days of storage in the frozen state. It is confirmed that the mechanism of cryoprotective action of the developed protein-polysaccharide compositions is associated with a decrease in water activity, the formation of an amorphous structure within the product and a decrease in the number of crystallization centers.Необхідною умовою збереження якісних показників посічених напівфабрикатів після розморожування є дотримання оптимальних умов їх попереднього низькотемпературного оброблення. Проте не завжди це дозволяє зберегти високі споживчі властивості заморожених напівфабрикатів, оскільки ступінь руйнівного впливу низьких мінусових температур на м’язові волокна м’ясної сировини також залежить і від її якості. У світовій практиці все частіше обговорюється питання застосування фізико-хімічних способів оброблення біотехнологічних об’єктів шляхом використання речовин кріопротекторної дії. З метою стабілізації функціонально-технологічних властивостей низькосортної м’ясної сировини та захисту від негативного впливу фізико-хімічних факторів на якість заморожених посічених напівфабрикатів було розроблено білково-вуглеводні композиції кріопротекторної дії За результатами проведених досліджень встановлено, що використання білків плазми крові Vepro 75 PSC, казеїнату натрію та рослинної клітковини (пшеничної, льону, подорожника) у складі посічених напівфабрикатів сприяє отриманню продуктів високої якості зі стабільними споживчими властивостями. Стабілізуюча дія білково-полісахаридних сумішей в кількості 2% у складі модельних зразків котлет проявляється у зниженні негативного впливу фізико-хімічних факторів на якість готової продукції, у поліпшенні їх консистенції, підвищенні соковитості та інших показників якості. Визначено найефективніший склад комплексної кріопротекторної білково-полісахаридної суміші, що містить білок плазми крові, казеїнат натрію, клітковину подорожника та льону за рівних співвідношень. Встановлено, що використання розроблених кріопротекторних комплексних сумішей у складі модельних м’ясних фаршевих систем знижує кріоскопічну температуру на 2,09–2,81 ºС, зменшує масову частку вимороженої вологи на 0,9% та підвищує вологоутримуючу здатність на 9,7–15,3%, порівняно з контрольним зразком. За результатами проведених досліджень встановлено, що використання білково-вуглеводних композицій у технології посічених напівфабрикатів дозволяє зберегти щільну структуру напівфабрикатів після 30 діб зберігання в замороженому стані і сприяє отриманню продуктів високої якості. Підтверджено, що механізм кріопротекторної дії розроблених білково-полісахаридних композиції пов’язаний зі зниженням активності води, утворенням аморфної структури всередині продукту і зменшенням кількості центрів кристалізації

Кольорокорегуючі композиції м’ясних систем з низьким вмістом гемоглобінвмісної сировини

The development of technologies for new types of salty meat products with a high level of safety requires the improvement of the basic technological processes of their production, using intensive methods of influence on the raw materials processed, especially in the conditions of the work of domestic enterprises on defective and marked signs of PSE and DFD raw materials (DFD – drу , firm, dark; PSE – pale, soft, exudative). The purpose of the research is the scientific substantiation of the directed use of multicomponent bristles in the technology of salty meat products, in particular, the study of the mechanism of forming the coloring of meat systems with different levels of content of immiglobin raw materials at the stage of its salting with the inclusion in the composition of the brine of nitrite salt instead of sodium nitrite and natural dyes Apro Red and Vepro 70 Col R. According to research results, the replacement of sodium nitrite with nitrite salt leads to an increase in the content of nitrosopigments, which enables to receive a finished product with a lower content of residual nitrite and better color characteristics than equivalent intake and sodium nitrite. Based on theoretical and experimental researches, the analysis of the compatibility of the constituent components, their synergistic influence, the specifics of the functional and technological properties and the results of the influence on the organoleptic, functional-technological and biochemical parameters of the model meat systems, the composition of the multicomponent color-correcting brines is substantiated and developed. The rational concentration of hemoglobin preparations Vepro 70 Col R and AproRed for the coloring of meat systems with the content of glucose-free glycogen up to 15% and the level of injection of more than 140% (respectively, 0.5 and 0.7%) with simultaneous use of 0.05% isoascorbate Na and 0.006% sodium nitrite. It was established that the combined use of nitrate salt and preparations of hemoglobin of blood reduces the residual amount of sodium nitrite twice from the norm established in State Standart of Ukraine due to a more complete transformation of nitrite in nitro compounds. The results of spectrophotometric studies allowed to conclude that the most effective color-correction effect in the formation of pinkish-red shades of model emulsions is Vepro 70 Col R. The possibility of adjusting the color of salted meat products by using multicomponent brines, enhances the efficiency of utilization of raw material resources of the meat processing industryРозробка технологій нових видів солених м’ясних виробів з високим рівнем безпеки потребує удосконалення основних технологічних процесів їхнього виробництва з використанням інтенсивних способів впливу на сировину, що переробляється, особливо в умовах роботи вітчизняних підприємств на розмороженій та позначеній ознаками PSE та DFD сировині ( DFD – drу, firm, dark – темне, жорстке, сухе; PSE – раle, soft, ехudаtive – бліде, м’яке, ексудативне). Метою досліджень є наукове обґрунтування направленого використання багатокомпонентних розсолів в технології солених м’ясних виробів, зокрема вивчення механізму формування кольороутворення м’ясних систем з різним рівнем вмісту безміоглобінової сировини на стадії її соління з включенням до складу розсолів нітритної солі замість нітриту натрію та натуральних барвників Апро Ред та Vepro 70 Col Р. За результатами досліджень встановлено, що заміна нітриту натрію на нітритну сіль призводить до збільшення вмісту нітрозопігментів, що дає змогу отримувати готовий продукт з меншим вмістом залишкового нітриту і кращими кольоровими характеристиками, ніж за еквівалентнго внесенняі нітриту натрію. На підставі проведенних теоретичних та експериментальних досліджень, аналізу сумісності складових компонентів, їх синергетичного впливу, специфіки функціонально-технологічних властивостей і результатів впливу на органолептичні, функціонально-технологічні та біохімічні показники модельних м’ясних систем, обґрунтовано та  розроблено склад багатокомпонентних кольорокорегуючих розсолів. Визначено раціональну концентрацію препаратів гемоглобіну крові Vepro 70 Col Р і Апро Ред для забарвлення м’ясних систем з вмістом безміоглобінової сировини до 15% та рівнем ін’єктування понад 140% (відповідно 0,5 та 0,7%) за одночасного використання 0,05% ізоаскорбату Na і 0,006% нітриту натрію. Встановлено, що сумісне використання нітратної солі і препаратів гемоглобіну крові  знижує залишкову кількість нітриту натрію в два рази від встановленої в ДСТУ норми за рахунок більш повної трансформації нітриту в нітрозосполуки. Результати спектрофотометричних досліджень дозволили дійти висновку, що найбільш ефективну кольорокоректуючу дію при формуванні рожево-червоного відтінку модельних емульсій має Vepro 70 Col Р. Доведено можливість корегування кольору солених м’ясних виробів шляхом використання багатокомпонентних розсолів, дозволяє підвищити ефективність використання сировинних ресурсів м’ясопереробної галузі

Treatment of overactive bladder symptoms in women with Diunorm®: preliminary results report

Introduction. Overactive bladder (OAB) with or without urgent incontinence tends to progress with age and occurs in both men and women. However, the frequency of occurrence in the female population averages about 25%.Purpose of the study. To assess the effectiveness and safety of the drug Diunorm® (in caps.) in the prevention and treatment of OAB in women.Materials and methods. The statistical analysis includes the results of a survey of 28 women with symptoms of OAB, whose average age was 35.3 years. The drug Diunorm® was used for treatment in dosage 400 mg QD for 90 days. Patients completed the Overactive Bladder Awareness Tool and a urination diary. Additionally, urinalysis, bacteriological examination of urine, uroflowmetry, bladder ultrasound and cystoscopy were performed.Results. All women throughout the study had negative urine cultures and no pyuria in urinalysis, which excluded an infectious etiology of urinary dysfunction. During therapy, a statistically significant decrease in irritative symptoms was recorded according to the Overactive Bladder Awareness Tool questionnaire. The sum of points after 1 and 3 mo decreased by 3.0 and 4.3 points, respectively (p < 0.05). Positive dynamics in terms of the points' sum was noted in 75%, in relation to nocturia in 82% of patients (p < 0.01). The average urination rate increased from 13.3 ± 0.7 ml/s to 15.1 ± 0.7 ml/s and 15.4 ± 0.5 ml/s after 1.5 and 3 months, respectively (p < 0,0001). A similar trend was observed for maximum urine flow and residual urine volume. The maximum urine flow when taking Diunorm® increased from 15.9 ± 0.6 ml/s to 17.4 ± 0.5 ml/s and 18.1 ± 0.4 ml/s (p < 0.001). Residual urine volume decreased throughout the study. When included in the study, after 1,5 and 3 mo, this indicator was 19.9 ± 1.4; 12.2 ± 1.6 and 6.4 ± 1.1 ml, respectively (p < 0.001).Conclusion. Diunorm® can become a worthy alternative to traditional first-line OAB therapy. Comparative studies are required to obtain a high-level evidence base

Transcriptome analysis of Thapsia laciniata rouy provides insights into terpenoid biosynthesis and diversity in apiaceae

Thapsia laciniata Rouy (Apiaceae) produces irregular and regular sesquiterpenoids with thapsane and guaiene carbon skeletons, as found in other Apiaceae species. A transcriptomic analysis utilizing Illumina next-generation sequencing enabled the identification of novel genes involved in the biosynthesis of terpenoids in Thapsia. From 66.78 million HQ paired-end reads obtained from T. laciniata roots, 64.58 million were assembled into 76,565 contigs (N50: 1261 bp). Seventeen contigs were annotated as terpene synthases and five of these were predicted to be sesquiterpene synthases. Of the 67 contigs annotated as cytochromes P450, 18 of these are part of the CYP71 clade that primarily performs hydroxylations of specialized metabolites. Three contigs annotated as aldehyde dehydrogenases grouped phylogenetically with the characterized ALDH1 from Artemisia annua and three contigs annotated as alcohol dehydrogenases grouped with the recently described ADH1 from A. annua. ALDH1 and ADH1 were characterized as part of the artemisinin biosynthesis. We have produced a comprehensive EST dataset for T. laciniata roots, which contains a large sample of the T. laciniata transcriptome. These transcriptome data provide the foundation for future research into the molecular basis for terpenoid biosynthesis in Thapsia and on the evolution of terpenoids in Apiaceae.Damian Paul Drew, Bjørn Dueholm, Corinna Weitzel, Ye Zhang, Christoph W. Sensen and Henrik Toft Simonse

Representações sociais de integrantes do movimento hip-hop em Ponta Grossa: seus elementos e o lazer

Essa pesquisa tem como objetivo geral identificar quais são as representações sociais dos integrantes do Movimento Hip-Hop em Ponta Grossa-PR. Os objetivos específicos estão em descrever como os integrantes vivenciam o Movimento Hip- Hop; apontar quais são as atividades desenvolvidas dentro do Movimento Hip-Hop; identificar se essas atividades desenvolvidas são para as integrantes atividades de lazer. Para que os objetivos fossem alcançados construímos um referencial teórico pautado em discussões sobre o conceito de representação social, sobre lazer e sobre o Movimento Hip-Hop. Essa pesquisa é qualitativa e teve como procedimentos metodológicos a pesquisa exploratória. Para a coleta de dados utilizamos as técnicas de entrevista semiestruturada e a observação participante. O método de análise dos dados empíricos foi o Hermenêutico.This research aims at identifying what are the social representations of members of the Movement in Hip-Hop Ponta Grossa-PR. The specific objectives are to describe how members experience the Hip-Hop Movement, pointing out which are the activities developed within the Hip-Hop Movement, to identify whether these activities are integral to recreational activities. For the objectives to be achieved construct a theoretical framework guided discussions about the concept of social representation, leisure and about the Hip-Hop Movement. This research is qualitative and methodological procedures was the exploratory research. To collect data we used the techniques of semistructured interviews and participant observation. The method of analysis of the data was the Hermeneutic