Recuperación de columnas de extracción en fase sólida DetectabuseTM para la detección de esteroides anabólicos en el control doping

Las columnas DetectabuseTM han sido desarrolladas para la extracción cuantitativa de drogas a partir de fluidos biológicos; debido a su versatilidad y robustez son actualmente uno de los productos poliméricos más populares en la técnica de extracción en fase sólida. Una de las ventajas que presentan es la capacidad de extraer, de manera eficiente, una amplia variedad de compuestos que incluye las drogas de abuso más comunes, las de actividad terapéutica y esteroides excretados en forma libre y conjugada. La utilización de estas columnas en la preparación de muestras para la determinación de esteroides anabólicos y otros compuestos, tiene como objetivo disminuir las sales inorgánicas excretadas en la orina y aumentar con esto la eficiencia de la hidrólisis enzimática. Se presentan los resultados de la recuperación de estas columnas para su posterior utilización en procedimientos de tamizaje. El estudio se realizó con los compuestos siguientes: metenolona, boldenona, fluoximesterona, 3’-hidroxistanozolol, 19-norandrosterona, epimetendiol, clenbuterol, salbutamol, etamiván, dehidroepiandrosterona, ácido carboxílico del tetrahidrocannabinol, morfina, triamtereno, testosterona, epitestosterona, androsterona, etiocolanolona, 16,16,17-d3 testosterona y 17α-metiltestosterona y metabolitos de la metenolona, la boldenona, la bolasterona, la drostanolona, la mesterolona, la metandienona, del danazol y la metiltestosterona. Se compararon las abundancias absolutas y relativas de cada uno de los compuestos de la columna 1 con las recuperadas 2 y 3. Fueron determinadas la media, la desviación estándar y el coeficiente de variación para cada compuesto. Se realizó una prueba F para análisis de varianzas y una prueba T de Student para análisis de medias

Validación de un método para la determinación de 19-norandrosterona en orina humana por Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas de Trampa de Iones

El consumo de nandrolona rinde en el humano tres metabolitos fundamentalmente, 19-norandrosterona (19-NA), 19-noretiocolanolona (19-NE) y 19- norepiandrosterona. Estudios recientes han demostrado la producción endógena de 19-NA a niveles de concentración muy cercana al límite de corte establecido por el Comité Olímpico Internacional, es decir de 2 ng/mL para los hombres y de 5 ng/mL para las mujeres. El metabolito marcador del consumo de ese esteroide es la 19-NA. El presente trabajo trata de la validación cualitativa de un método analítico para su determinación con metiltestosterona como patrón interno que emplea un paso de extracción en fase sólida con columnas DetectabuseÔ, seguida de una hidrólisis enzimática con b-glucuronidasa de E. coli, extracción líquido- líquido, derivatización con N-metil-N-trimetilsililtrifluoroacetamida (MSTFA) para obtener el bis-trimetilsilil derivado de la 19-NA (19-NA bis-O-TMS) y análisis mediante Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas en tándem (CG-EM-EM) utilizando un espectrómetro de masas de trampa de iones. Se utilizó una columna capilar Ultra HP-1 (20 m X 0,20 mm X 0,11 µm), con un programa de temperatura que va desde 181 °C (por 1 min), hasta 210 °C (10 °C/min), entonces hasta 310 °C (20 °C/min), manteniéndose en esa temperatura durante 2 min . El modo de adquisición fue EM-EM con ionización por impacto electrónico seguido de disociación mediante colisión inducida con helio