Identification by PCR of S‑alleles associated with gametophytic compatibility in Japanese plum

O objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar molecularmente os alelos‑S de cultivares de ameixeira japonesa e verificar a compatibilidade gametofítica entre estes. Foram utilizados dois pares de iniciadores específicos na amplificação dos alelos via PCR, em 18 cultivares: Pluma 7, Gulf Rubi, Blood Plum, Wickson, América, Santa Rosa, Rosa Mineira, Estrela Púrpura, Amarelinha, The First, Harry Pieckstone, Santa Rita, Seleção 16, Seleção A26 (Burbank), Seleção 21, Seleção 19, Methley e Simka. As condições da PCR e as combinações de oligonucleotídeos iniciadores utilizadas permitiram a identificação de alelos‑S nas cultivares, bem como a indicação dos polinizadores mais compatíveis. As cultivares América e Santa Rosa, bem como Blood Plum, Wickson, Rosa Mineira, Estrela Púrpura e Seleção 21 apresentam incompatibilidade total entre si, por compartilharem os mesmos alelos.The objective of this work was to molecularly identify and characterize the S‑alleles of Japanese plum cultivars and to verify the gametophytic compatibility between them. Two pairs of specific primers were used for allele amplification by PCR in 18 cultivars: Pluma 7, Gulf Rubi, Blood Plum, Wickson, América, Santa Rosa, Rosa Mineira, Estrela Púrpura, Amarelinha, The First, Harry Pieckstone, Santa Rita, Seleção 16, Seleção A26 (Burbank), Seleção 21, Seleção 19, Methley, and Simka. PCR conditions and oligonucleotide primer combinations used allowed the identification of S‑alleles in cultivars, as well as the indication of the most compatible pollinators. América and Santa Rosa cultivars, as well as Blood Plum, Wickson, Rosa Mineira, Estrela Púrpura, and Seleção 21 show total incompatibility among each other, since they share the same alleles

In vitro multiplication and regeneration of quince

Pomares de pereira com plantio em alta densidade foram possíveis devido a utilização de portaenxerto de marmeleiro (Cydonia oblonga Mill.), obtendo-se assim plantas de pequeno porte e rápida frutificação, além de proporcionar uniformidade a esses pomares. Técnicas que venham melhorar a capacidade de propagação deste portaenxerto são de grande interesse. O objetivo desse trabalho foi ajustar protocolos de multiplicação e regeneração in vitro de marmeleiro cultivares MC e Adams. Os resultados do trabalho estão apresentados na forma de capítulos. O material vegetal utilizado nos experimentos foi obtido a partir da multiplicação in vitro em meio de cultura básico composto dos sais e vitaminas MS, suplementados com mio-inositol (100 mg L-1), 6- benzilaminopurina (BAP) (0,3 mg L-1), sacarose (30 g L- 1) e ágar (8 g L-1). No capítulo 1, utilizou-se meio básico acrescentado de ágar (8 g L- 1) no meio solidificado e vermiculita (3 g frasco-1) no meio líquido e os frascos foram vedados com papel alumínio, filme PVC e tampa de polipropileno. No capítulo 2, como fonte de carbono no meio de cultura foi utilizado sacarose, frutose ou sorbitol nas concentrações de 0, 15, 30, 45 e 60 g L-1. Para regeneração in vitro o capítulo 3 foi dividido em dois experimentos. No experimento 1 os meios de cultura constituíram-se dos sais e vitaminas MS e SH, suplementados com mio-inositol (100 mg L-1), sacarose (30 g L-1), ágar (8 g L-1), ANA (2 μM) e TDZ nas concentrações de 0, 1,5, 3, 4,5 e 6 μM. No experimento 2 o meio de cultura constituiu-se dos sais e vitaminas SH, suplementado com mio-inositol (100 mg L-1), sacarose (30 g L-1), ágar (8 g L-1), TDZ (0, 1,5, 3, 4,5 e 6 μM) combinado com ANA ou AIB nas concentrações de 0; 1,0; 1,5 e 2 μM. Todos os experimentos foram avaliados após 60 dias. Diante dos resultados apresentados no capítulo 1 é possível concluir que a utilização de meio de cultura solidificado com ágar e os frascos vedados com papel alumínio ou tampa de polipropileno favorecem a multiplicação in vitro de marmeleiro 'MC' e 'Adams'. No capítulo 2 constatou-se que a sacarose na concentração de 45 g L-1 para cultivar MC e 30 g L-1 para cultivar Adams são as melhores concentrações e fonte de carbono para multiplicação in vitro dos portaenxertos de marmeleiro testados. No capítulo 3, primeiro verificou-se no experimento 1 que a regeneração in vitro de brotos adventícios de marmeleiro das cultivares MC e Adams foi favorecida pelo uso do meio de cultura SH e pela adição de 4,5 μM de TDZ para cultivar MC e 6 μM de TDZ para a cultivar Adams. No experimento 2 concluiu-se que houve maior taxa de regeneração a partir da combinação de 4,5 μM de TDZ e 2 μM de ANA para cultivar MC e 6 μM de TDZ e 2 μM de ANA para cultivar Adams.Pear orchards with high density planting were possible due to the use of rootstock quince (Cydonia oblonga Mill.), thus obtaining small plants and rapid fruiting, and provide uniformity to these orchards. Techniques that may improve the ability to propagation this rootstock are of great interest. The aim of this study was to adjust protocols for in vitro multiplication and regeneration of quince cultivars MC and Adams. The results of this word are presented in chapter. Material used in the experiments was obtained from in vitro propagation in culture medium consisting of MS salts and vitamins supplemented with myo-inositol (100 mg L-1), 6 - benzylaminopurine (BA) (0.3 mg L-1), sucrose (30 g L-1) and agar (8 g L-1). Chapter 1 we used MS medium added agar (8 g L-1) on solidified medium and vermiculite (3 g flask-1) in the liquid medium and the flasks were sealed with aluminum foil, PVC film and polypropylene cap. In Chapter 2 how carbon source in culture medium was added sucrose, fructose or sorbitol at concentrations 0, 15, 30, 45 and 60 g L-1. For in vitro regeneration the Chapter 3 was divided in two experiments. In experiment 1 the culture medium consisted of salts and vitamins MS and SH supplemented with myoinositol (100 mg L-1), sucrose (30 g L-1), agar (8 g L-1), NAA (2 mM) and TDZ at concentrations 0, 1.5, 3, 4.5 and 6 μM. In experiment 2 the culture medium consisted of SH salts and vitamins supplemented with myo-inositol (100 mg L-1), sucrose (30 g L-1), agar (8 g L-1), TDZ (0 , 1.5, 3, 4.5 and 6 μM) combined with NAA or IBA at concentrations of 0, 1.0, 1.5 and 2 μM. All experiments were evaluated after 60 days. Considering the results presented in Chapter 1 is possible to conclude that the use of culture medium solidified with agar and the flasks sealed with aluminum foil or polypropylene cap favored the in vitro multiplication of quince 'MC' and 'Adams'. In the second chapter it was found that the sucrose concentration of 45 g L-1 to cultivar MC and 30 g L-1 to cultivar Adams are the best concentrations and carbon source for in vitro multiplication quince. In the Chapter 3 first verified in experiment 1 that the in vitro regeneration of adventitious shoots quince cultivars MC and Adams was favored by the use of SH culture medium and addition of 4.5 μM TDZ to cultivar MC and 6 μM TDZ for cultivar Adams. And in experiment 2 it was concluded that multiple shoots were formed from the combination of 4.5 μM TDZ and 2 μM NAA for cultivar MC and 6 μM TDZ and 2 μM NAA to cultivar Adams

Micropropagation and oxidative stress of pear and quince cultivated on medium with aluminum

The objective of this work was to evaluate the effect of aluminum (Al) on in vitro multiplication and rooting of pear and quince. The explants were nodal segments of pear and quince in vitro cultivated. The culture medium to pear was QL modificated by Leblay and to quince was MS, both added of Al to 0 (pH 5,7, control), 0, 15, 30, 45 e 60 mg L-1 (pH 4,0) put in jars with 1 g of cotton for multiplication and 3 g of vermiculite for rooting and 30 mL of medium. The trial had four replicates and five explants each. At 60 days the percentage of shoots, length and number of shoots, fresh and dry mass and catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX) activity in pear were assessed. At 45 days the percentage of rooting, length and number of root, fresh and dry mass of shoots and roots, CAT, APX and superoxide dismutase (SOD) activity in pear and nutrients content were assessed. In the multiplication, the quince had 100% of shoot, but decreased the number of shoots. The length of shoots, fresh and dry mass decreased in MC but increased in BA 29 . The pear had high percentage of shoots. The number of shoot was higher for Conference . The length of shoots, fresh and dry mass was increased at Al. CAT activity in Conference was increased at 30 mg L-1 of Al and in Abate Fetel was increased at 30 and 45 mg L-1 of Al. APX activity in Conference was increased at 30 and 60 mg L-1 of Al and in Abate Fetel was increased at 30 mg L-1 of Al. In the rooting, the percentage of rooting, lenght and number of roots was higher for quince. The fresh mass of shoot was higher for Conference and for 30 mg L-1 of Al. The fresh mass of root was higher for BA 29 at 15 mg L-1 of Al. The dry mass of shoot was higher for Conference and for 15 and 30 mg L-1 of Al. The dry mass of root was higher for BA 29 and for 15 mg L-1 of Al. The nutrient content increased at aluminum. In the Abate Fetel the CAT and APX activity was increased and the SOD activity was decreased at aluminum. On the other hand, in the Conference the CAT activity was decreased at aluminum, the APX was decreased only at 45 mg L-1 of Al and the SOD activity was increased. As conclusion, the cultivars answered of different form at Al and, in some parameters, the presence of this metal was beneficial.O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito do alumínio (Al) na multiplicação e enraizamento in vitro de pereira e marmeleiro. Os explantes constituíram-se de segmentos nodais de pereira e marmeleiro cultivados in vitro. O meio de cultura para pereira foi o QL modificado por Leblay e para marmeleiro foi o MS, ambos adicionados de Al a 0 (pH 5,7 controle), 0, 15, 30, 45 e 60 mg L-1 (pH 4,0), colocado em frascos contendo 1 g de algodão hidrófilo para multiplicação e 3 g de vermiculita para enraizamento e 30 mL de meio. O experimento constou de quatro repetições com cinco explantes cada. A multiplicação foi avaliada aos 60 dias quanto a percentagem de explantes brotados, número e comprimento das brotações, massa fresca e massa seca total e a atividade das enzimas catalase (CAT) e ascorbato peroxidase (APX) em pereira. O enraizamento foi avaliado aos 45 dias quanto a percentagem de explantes enraizados, número e comprimento das raízes, massa fresca e seca da parte aérea e radicular, a atividade das enzimas CAT, APX e superóxido dismutase (SOD) em pereira e teor de nutrientes. Na multiplicação, o marmeleiro teve 100% de explantes brotados, mas houve diminuição no número de brotos. O MC apresentou diminuição no comprimento dos brotos, na massa fresca e seca, já o BA 29 apresentou aumento desses parâmetros. A pereira teve alta percentagem de explantes brotados. A Conference apresentou maior número de brotos. Com relação ao comprimento dos brotos, massa fresca e seca houve aumento na presença de Al. A atividade da CAT na Conference foi aumentada em 30 mg L-1 de Al e na Abate Fetel foi aumentada em 30 e 45 mg L-1 de Al. A atividade da APX na Conference foi aumentada em 30 e 60 mg L-1 de Al e na Abate Fetel foi aumentada em 30 mg L-1 de Al. No enraizamento, o marmeleiro apresentou maior percentagem de enraizamento, maior número e comprimento das raízes. A maior massa fresca da parte aérea foi obtida pela Conference e por 30 mg L-1 de Al. A massa fresca da raiz foi maior no BA 29 em 15 mg L-1 de Al. A maior massa seca da parte aérea foi obtida pela Conference e por 15 e 30 mg L-1 de Al. A maior massa seca da raiz foi obtida pelo BA 29 e por 15 mg L-1 de Al. O teor de nutrientes aumentou na presença de Al. A atividade da CAT e APX aumentou e da SOD diminuiu em Abate Fetel na presença de Al, enquanto que na Conference a atividade da CAT diminui, da APX diminuiu somente em 45 mg L-1 de Al e da SOD aumentou. De modo geral, os cultivares responderam de vii forma diferente a presença de Al e, em alguns parâmetros, a presença desse metal foi benéfica

Estabelecimento in vitro de oliveira cv. "Arbequina" para início da micropropagação In vitro establishment of olive tree cultivar 'Arbequina' for micropropagation starting

A utilização de técnicas de cultura de tecidos com o objetivo de melhorar a rentabilidade das culturas tem-se apresentado como um instrumento importante que pode ser explorado pelos pesquisadores, produzindo plantas com elevada qualidade sanitária. Este trabalho teve como objetivo determinar o meio de cultura e a concentração de zeatina adequadas no estabelecimento in vitro de oliveira "Arbequina". Foram utilizados segmentos nodais (1cm), obtidos de plantas mantidas em casa de vegetação. Em laboratório, o material foi desinfestado com álcool 70% (um minuto) e solução de hipoclorito de sódio (2,5%), por 15 minutos, e inoculado em meio MO, MS ou WPM, adicionados de diferentes concentrações de zeatina (0, 2 e 4mg L-1). O material foi mantido em sala de crescimento a 25&plusmn;2&deg;C, no escuro, por uma semana. Depois, foi transferido para luz, fotoperíodo de 16 horas e densidade de fluxo de fótons de 27µmol m-2 s-1. Aos sete, 14 e 21 dias o material foi avaliado quanto à percentagem de contaminação bacteriana, percentagem de contaminação fúngica e percentagem de explantes oxidados. Aos 45 dias de cultivo, o material foi avaliado quanto à percentagem de sobrevivência, à percentagem de estabelecimento, ao número de brotações, ao comprimento de brotações e ao número de folhas. Os resultados permitiram concluir que o material mantido em meio WPM apresentou melhores resultados, seguidos do meio MO.<br>The use of tissues culture techniques aiming to improve the profitability of the cultures has been presented as an important tool that may be explored by researchers to produce plants with high sanitary quality. This research aimed to determine both the suitable culture medium and zeatin concentration for in vitro establishment of olive tree cultivar 'Arbequina'. The 1cm nodal segments were obtained from plants grown in the greenhouse. In the laboratory, the material was disinfested with 70% alcohol (1 minute) and in a 2.5% hypochlorite solution for 15 minutes. Then they were inoculated onto MO, MS or WPM medium enriched of different zeatin concentrations (0, 2 and 4mg L-1). The material was kept in growth room at 25&plusmn;2&deg;C under dark conditions for a week. After darkness, they were transferred to light, 16-hour photoperiod and photon flux density of 27mmol m-2 s-1. On the 7th, 14th and 21st day, the fungal and bacterial contamination and explants oxidation percentage were evaluated. On the 45th day of cultivation the material was assessed regarding to the survival rate, establishment of explants, shoots number and length, and leaves number. The present research concluded that the WPM medium showed the better performances, followed by MO medium