Inmunolocalizacion temporal y espacial de osteopontina en la reparación de defectos óseos ortopédicos tratados con matriz ósea desmineralizada

La osteopontina (OPN) es la proteína no colágena que más abunda en la matriz ósea. Cumple funciones de adhesión celular y biomineralización de la matriz extracelular. En el presente trabajo se informa la localización temporal y espacial de la OPN durante la reparación de defectos óseos ortopédicos tratados con matriz ósea desmineralizada (MOD). Se emplearon 30 conejos a los que se les practicó un defecto óseo ortopédico de tamaño crítico en uno de sus radios. Los defectos se rellenaron con MOD obtenida según protocolo previamente informado. Los conejos fueron sacrificados en grupos de 5 a los 7, 15, 21, 30, 120 y 150 días de los cuales se recuperaron los defectos para identificar las estructuras histológicas y establecer la inmunomarcación espacial y temporal de OPN. Se realizaron cortes histológicos de los defectos que se tiñieron con hematoxilina y eosina (HE) e inmunomarcaron según técnica inmunohistológica. Los cortes inmunomarcados se observaron en un microscopio óptico de donde se capturaron imágenes histológicas a 20X para analizarlas con el software ImageJ y establecer la densidad óptica (DO) y densidad óptica integrada (DOI). Los datos se analizaron con un test ANOVOA y LSD Fisher. A los 7 días se observó la presencia de OPN solo en las partículas de MOD donde la DO: 0,109 y DOI: 3587,043; a los 15 días OPN marcaba distintos sitios de condensaciones colágenas y células en su interior. En este período DO fue 0,096 y la DOI: 10593,08. A los 21 y 30 días OPN señalaba trabéculas óseas, osteocitos, osteoblastos, osteoclastos y condrocitos hipertróficos inmediatos a las zonas de osificación, la DO fue 0,134 y DOI 14.639,7. A los 120 y 150 días OPN se encontraba uniformemente distribuida por la matriz del hueso nuevo con una DO: 0,0104; DOI: 4160,96 y DO: 0,081 y DOI 8878,9 respectivamente. Las DO y DOI mostraron diferencias significativas (p<=0,05) entre los 7, 15, 21 y 30 días y no existió diferencia a los días 120 y 150 días (p=0,05). OPN se halló presente en las partí- culas de MOD e incrementó las densidades ópticas a los 15, 21 y 30 días como producto del metabolismo celular posibilitando la adhesión celular y luego interviniendo en la biomineralización

Inmunodetección de Wingless int-3 (Wnt3) en la reparación de defectos óseos ortopédicos en conejos tratados con matriz ósea desmineralizada / Wingless int-3 (Wnt3) Immunodetection in the repair of orthopedic bone defects in rabbits treated with

Although the expression Wnt and its isoforms are widely known in the embryonic skeletogenesis, little is known about the role they play in the particular Wnt3 isoform in the repair of orthopedic bone defects. Thirty rabbits were used, which were given a bone defect inone of the radiuses. The defect was refilled with demineralized bone matrix (DBM). The rabbits were sacrificed at 7, 15, 21, 30, 60 and 150 days post-treatment to immuno-detect the Wnt3 in the repair sites. The immuno-determination was done by optic density (OD) and integrated optic density (IOD). Both, the OD and the IOD were analyzedusing ANOVA and Fisher LSD test. The Wnt3 protein was immuno-detected in mesenchymal cells, in the sites where the chondrogenesis was produced and in osteoprogenitor, preosteoblasts and osteoblasts cells. The OD had significant variations (p<0,05) at 7, 15, 60 and 150 days post-treatment. The same statistical analysis for IOD showed significantstatistical differences (p<0,05) at day 30 with respect to 60 and 150 days post-treatment. The evidence showed the histological sites as well as the chronological immune expression of Wt3 in the repair of orthopaedic bone defects treated with demineralized bone matrix.Si bien la expresión de Wnt y sus isoformas se conocen ampliamente en la esqueletogénesis embrionaria, poco se sabe del rol que desempeña, en particular la isoforma Wnt3, en la reparación de defectos óseos ortopédicos. Se emplearon 30 conejos a los que se les practicó acada uno, un defecto óseo en sus miembros torácicos , el que se procedió a rellenar con matriz ósea desmineralizada (MOD). Los conejos fueron sacrificados a los 7, 15, 21, 30, 60 y 150 días post-tratamiento para realizar inmunodetección de Wnt3 en los sitios de reparación. La inmunodeterminación se efectuó mediante densidad óptica (DO) y densidad óptica integrada (DOI). Las DO y DOI se analizaron mediante ANOVA y Test LSD de Fisher. La proteína Wnt3 se inmunodetectó en células mesenquimáticas, en los sitios donde se produjo la condrogénesis y en células osteoprogenitoras, preosteoblastos y osteoblastos. La DO tuvo variaciones significativas (p<0,05) a los 7,15, 60 y 150 días post-tratamiento. El mismo análisis estadístico para DOI señaló que hubo diferencias estadísticamente significativas (p<0,05) a los 30 días respecto a los 60 y 150 días. La evidencia expuesta mostró los sitios histológicos como así también la cronología de expresión de Wnt3 en la reparación de defectos óseos ortopédicos tratados con matriz ósea desmineralizada