Biocontrol de cepas de Trichoderma spp. frente a aislados de Fusarium spp. procedentes de frijol (Phaseolus vulgaris L.)

The objective of this work was to determine the modes of action of seven strains of Trichoderma asperellum (Ta.) Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg and one isolate of Trichoderma sp. (T. 81) against two isolates of Fusarium spp. from bean (Phaseolus vulgaris L.) seeds stored in a warehouse in Güines, Mayabeque province. Antibiosis, competition for space [percentage of radial growth inhibition (PICR)] and mycoparasitism of Trichoderma strains were evaluated in front of Fusarium isolates by using the dual culture technique. The antagonist strains inhibited the development of the Fusarium isolates (Fs. 1 and Fs. 2) after 48 h. The strains Ta. 13, Ta. 79, and Ta. 90 stood out in growth inhibition of Fs. 1 and the strain Ta. 13 in that of Fs. 2. All the strains of T. asperellum and the isolate T. 81 were classified in class 1 on the Bell et al. scale. The highest PICRs were obtained with the strains Ta 56, Ta. 79 and T. 81 with values over 60%. Ta.13, Ta. 79 and T. 81 were selected as promissoring strains for the control of this phytopathogen in the field.El objetivo del trabajo fue determinar los modos de acción de siete cepas de Trichoderma asperellum (Ta.) Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg y un aislado de Trichoderma sp. (T. 81), frente a dos aislados de Fusarium spp., procedentes de semillas de frijol (Phaseolus vulgaris L.) de un almacén del municipio Güines, provincia Mayabeque. Se evaluaron la antibiosis, competencia por espacio [porcentaje de inhibición del crecimiento radial (PICR)] y el micoparasitismo de las cepas de Trichoderma, mediante la técnica de cultivo dual, frente a los aislados de Fusarium. Las cepas del antagonista inhibieron el desarrollo de los aislamientos de Fusarium (Fs. 1 y Fs. 2) a partir de las 48 h. Las cepas Ta. 13, Ta. 79 y Ta. 90 se destacaron por la inhibición del crecimiento del aislado Fs. 1 y Ta. 13 del aislado Fs. 2. Todas las cepas de T. asperellum y el aislado Tsp. 81 se ubicaron en la clase 1 de la escala de Bell et al. Los mayores PICR se obtuvieron con las cepas Ta. 56, Ta. 79 y Tsp. 81 con valores por encima del 60 %. Se seleccionaron como promisorias para el control de Fusarium spp. en campo a las cepas Ta.13, Ta. 79 y Tsp. 81

Los hongos endófitos y sus aplicaciones potenciales en la agricultura

The objective of this work was to review different issues related to endophytes of fungal origin, with emphasis on their functions (especially those related to plant protection). In this paper, the general concept of endophyte, its classification, general procedures for its isolation, characterization and conservation are detailed. Some of its most important functions are mentioned and explained, and examples of its functions in plant protection including the risk of their application, are described, and so are the cases of mixed application with other endophytes or with other biological controls with predator or parasitoid function.El objetivo del presente trabajo fue la revisión de diferentes aspectos relacionados con los endófitos de origen fúngico, con énfasis en sus funciones (en especial las relacionadas con la protección vegetal). Se detallan el concepto general de endófito, su clasificación, los procedimientos generales para su aislamiento, caracterización y conservación. Se nombran y explican algunas de sus funciones más importantes y se describen ejemplos de sus funciones en la protección de las plantas, así como de casos de la aplicación mixta con otros endófitos o con otros controles biológicos con función de depredador o parasitoide y riesgos de su aplicación

Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg como estimulante del crecimiento de Solanum lycopersicum (L.)

The objective of the present work was to evaluate the endophytic and stimulant effect of selected strains of T. asperellum in tomato under semi controlled conditions. Conidial suspensions of the fungal strains at two concentrations were independently applied to the soil at two times (at sowing or seven days prior to sowing). The number of roots and leaves, plant height, root length and fresh and dry weights of the aerial part and root of each plant (treated and control) and the endophytic capacity in roots were determined. Treatment evaluations were performed 15 or 30 days after plant sprouting. The plants treated with the strains Ta. 13 and Ta. 90 showed increases of the growth indicators when the soil was inoculated with the fungus seven days prior to sowing. All the fungal strains showed endophytic growth in the tomato roots, standing out the strains Ta. 13 and Ta. 90 with the highest percentage of endophytism. Once again, the results showed the variability of the studied strains and the need for studies that allow the selection of candidates for being applied in the field.El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el efecto endofítico y estimulante de cepas seleccionadas de T. asperellum en tomate, en condiciones semicontroladas. Trichoderma se aplicó de forma independiente en suspensión en dos concentraciones, directamente al suelo, en dos momentos: 1) en el momento de la siembra y 2) siete días antes de la siembra. En las plantas (tratadas y control) se determinó el número de raíces y de hojas, la altura de la planta, la longitud de la raíz, las masas fresca y seca de las áreas foliar y radicular, y la capacidad endófita en raíces. Las evaluaciones se realizaron a los 15 y 30 días. Las plantas tratadas con las cepas Ta. 13 y Ta. 90 manifestaron incremento de los indicadores de crecimiento, cuando la siembra se efectuó siete días posinoculación del hongo al suelo. Todas las cepas crecieron endofíticamente en las raíces de tomate, en ambos momentos de aplicación; no obstante, sobresalen Ta. 13 y Ta. 90 con el mayor porcentaje de endofitismo. Los resultados demostraron, una vez más, la variabilidad de las cepas en estudio y la necesidad de realizar estudios que permitan la selección de candidatos con nuevos atributos para su aplicación en campo

Caracterización de la variabilidad genética de cepas de Pseudomonas spp. patógenas en arroz

The objective of this work was to characterize the genetic variability of strains of Pseudomonas spp. that cause Sheath Brown Rot of rice in Cuba, through the analysis of genomic regions. A first grouping was performed based on the genetic fingerprint analysis by PCR, and then the analysis was developed through rep-PCR (ERIC, BOX and REP-PCR). In the two types of tests, the strains showed molecular variability, which was evidenced by the formation of three groups of Pseudomonas that circulate in the country. One of them grouped the strains A74 and A75, the second group included the strains A90 and A91, and the last group related most of the strains (A9, A36, A63, PR1 and PR3), the latter identified as Pseudomonas sp. or Pseudomonas fluorescens.El objetivo de este trabajo fue caracterizar la variabilidad genética de cepas de Pseudomonas spp. causantes de la Pudrición parda de la vaina en arroz, en Cuba, mediante el análisis de regiones genómicas. Se realizó un primer agrupamiento basado en el análisis de la huella genética mediante PCR. Posteriormente, se desarrolló el análisis a través de rep-PCR (ERIC, BOX y REP-PCR). En los dos tipos de ensayos las cepas mostraron variabilidad molecular, lo que se evidenció por la formación de tres grupos de Pseudomonas que circulan en el país. El primer grupo estuvo conformado por las cepas A74 y A75, el segundo incluyó las cepas A90 y A91, y el último relacionó la mayoría de las cepas (A9, A36, A63, PR1 y PR3); estas últimas se identificaron como Pseudomonas sp. o Pseudomonas fluorescens

Efectos de Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg y Azofert ® sobre el crecimiento y desarrollo de Phaseolus vulgaris L.

The aim of this work was to evaluate the effect of Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg (Ta. 13, Ta. 78 and Ta. 90) combined with Azofert® on growth and development of Phaseolus vulgaris L. (cv. 'BAT-304') under semi-controlled conditions. Evaluations were carried out in 32-day-old plants sown at two times: 1) plant sowing and soil inoculation with Trichoderma at the same time, 2) plant sowing seven days after soil inoculation with the fungus. The plant height, root length, number of leaves, number of flowers, number of tendrils and pods, fresh and dry weight of plant aerial parts and roots, Trichoderma endophytic capacity in roots, nodulation effectiveness by Rhizobium and the induction of peroxidase enzymes (POD), polyphenoloxidases (PPO), and phenylalanine ammonium lyases (PAL) were determined. All results were contrasted according to simple analysis of variance followed by the least significant difference test. The co-inoculation of Ta. 13 and Ta. 78 with Azofert® had a synergist effect on growth and defense enzymes stimulation of P. vulgaris. The ability of the T. asperellum strains studied to endophytically colonize the roots of P. vulgaris (cv. 'BAT-304') and their compatibility with Azofert® were verified, under controlled conditions. In general, the treatments to which T. asperellum was applied from the moment of sowing presented the best values of the growth and development parameters evaluated. The co-inoculation of Ta. 13 and Ta. 78 with Azofert® had a synergistic effect on growth stimulation and expression of defense enzymes PAL, PPO and POD of P. vulgaris.El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto combinado de tres cepas de Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg (Ta. 13, Ta. 78 y Ta. 90) con Azofert® (Rhizobium leguminosarum cepa CF1) sobre el crecimiento y desarrollo de plantas de frijol común Phaseolus vulgaris L. (cv. 'BAT-304') en condiciones semicontroladas. Las evaluaciones se realizaron en plantas de 32 días, sembradas en dos momentos: 1) siembra e inoculación de Trichoderma en el suelo al unísono; 2: siembra de las plantas siete días después de la inoculación del suelo con el hongo. Se determinó la altura de las plantas, la longitud de la raíz, el número de hojas, flores, zarcillos y vainas, la masa fresca y seca del área foliar y radicular, la capacidad endófita de Trichoderma en las raíces, la efectividad de nodulación de Rhizobium y la inducción de enzimas peroxidasas (POD), polifenoloxidasas (PPO) y fenilalanina amonio liasas (PAL). Los resultados de los tratamientos, en ambas formas de inoculación, se contrastaron según análisis de varianza simple seguido de la prueba de mínima diferencia significativa. Se comprobó la capacidad de las cepas de T. asperellum estudiadas de colonizar endofíticamente las raíces de P. vulgaris (cv. 'BAT-304') y su compatibilidad con Azofert®, en condiciones controladas. De manera general, los tratamientos a los que se les aplicó T. asperellum desde el momento de la siembra presentaron los mejores valores de los parámetros de crecimiento y desarrollo evaluados. La coinoculación de las cepas Ta. 13 y Ta. 78 con Azofert® tuvo un efecto sinérgico sobre la estimulación del crecimiento y la expresión de enzimas de defensa PAL, PPO y POD de P. vulgaris

Primer informe de Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc. afectando al cultivo del garbanzo en Cuba

The objective of the work was to characterize isolates of Fusarium sp. from chickpea (Cicer arietinum L.) morphologically and molecularly. For this, the morphological characterization of the isolates of Fusarium sp. was conducted by using a taxonomic key and, for their molecular identification, DNA extraction, amplification of the translation and elongation factor 1α (tef-1α) gene, purification and sequencing of the amplified fragments were performed. The results allowed reporting the first identification of a new Fusarium species on chickpea in Cuba [Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc.], a species belonging to the Fusarium incarnatum-equiseti species complex (FIESC). The Cuban strains were phylogenetically clustered with the FIESC 15 group. This is the first report of F. incarnatum associated with chickpea in Cuba.El trabajo tuvo como objetivo caracterizar morfológica y molecularmente aislamientos de Fusarium sp. procedentes de plantas de garbanzo (Cicer arietinum L.). Para ello, se realizó la caracterización morfológica de los aislados de Fusarium sp. mediante el uso de una clave taxonómica. Para la identificación molecular se realizó la extracción de ADN, amplificación del gen que codifica para el factor de elongación y traducción 1α (tef- 1α), purificación de los fragmentos amplificados y su secuenciación. Los resultados permitieron informar, por primera vez en Cuba, una nueva especie de Fusarium en el garbanzo [Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc.], incluida en el clado Incarnatum, que pertenece al complejo de especies Fusarium incarnatum-equiseti (FIESC). Las cepas cubanas se agruparon filogenéticamente con el grupo FIESC 15. Este es el primer informe de F. incarnatum asociado al garbanzo en Cuba

Diagnóstico, caracterización y algunas alternativas de manejo de enfermedades en cultivos de importancia económica

Los resultados abarcan el diagnóstico de enfermedades de interés en diferentes familias de plantas cultivables_ poáceas,solanáceas y cucurbitáceas, así como algunas alternativas para su manejo. En la enfermedad Carbón de la caña de azúcarse determinó por primera vez para el país, la variabilidad intraespecífica del agente causal [Sporisorium scitamineum (Syd.) M. Piepenbr. M. Stoll., F. Oberw], y se estandarizó su diagnóstico por PCR, que permite su detección precoz en tejido vegetal. Se contribuyó con el programa de obtención de genotipos resistentes al Carbón en la EPICA-Habana con la selección de los progenitores más promisorios ante esta enfermedad, por su respuesta en condiciones de campo. Se determinaron los hongos asociados al Amarillamiento foliar de la caña, pero que no son los causantes de esta enfermedad, lo que apoyó la hipótesis de la etiología fitoplásmatica. Se logró un método confiable para su diagnóstico en campo, basado en el brix de lashojas. Se caracterizaron morfo - fisio - patogénicamente aislamientos de Rhizoctonia spp. Kühn agente causal del Tizón de la vaina en arroz, segunda enfermedad en importancia en el cultivo, provenientes de los principales complejos agro-industriales arroceros de Cuba. Se observaron diferencias entre los aislados, algunos con células multinucleadas pertenecientes a la especie R. solani y otros con binucleadas, que no se correspondían con otras especies informadas para el cultivo de arroz, ni con los grupos anastomósicos de los aislamientos notificados en el cultivo. Se constató que estos aislamientos afectan maíz (Zea mays L.), tomate (Solanum lycopersicum L.) y frijol (Phaseolus vulgaris L.), especies que no deben ser incorporados al sistema de rotación del cultivo en áreas con alta incidencia de este patógeno, pero si el girasol (Helianthus annuus L.), que no fue atacado por los aislamientos procedentes de arroz. En las pruebas de variedades en condiciones de campo, se observó que los genotipos de mayor resistencia son Amistad 82, Reforma y AC 28. Para facilitar la selección se lograron métodos in vitro para la discriminación de genotipos con resistencia a Rhizoctonia solani y Sarocladium oryzae (Sawada). En el cultivo del tomate, se caracterizaron morfo-fisio-patogénica y molecularmente, aislamientos de A. solani de todo el país, procedentes de diferentes variedades y se demostró que las características morfo-culturales no tienen relación ni con las patogénicas, ni con la procedencia u origen geográfico. Existe variabilidad patogénica, diferenciándose fundamentalmente en su agresividad. Por AFLP se pudo detectar esta variabilidad entre aislamientos procedentes de papa y tomate, aspecto que se corroboró en inoculaciones sobre diferentes cultivares de estos cultivos, lo que evidenció la existencia de grupos intraespecíficos en Alternaria solani. Estos resultados permitieron la selección de aislamientos altamente agresivos,que sirvieron para descartar genotipos susceptibles al Tizón temprano, con una metodología elaborada para tal fin. Con lautilización de esta metodología y evaluaciones en condiciones de campo se colaboró en la obtención de la variedad detomate Amalia, una de las más distribuidas en el país, con resistencia aceptable a la enfermedad. En producciones protegidas de esta hortaliza se determinó la incidencia de P. fulva y se caracterizaron aislamientos del hongo de diferentes localidades del país, a partir de caracteres culturales, fisiológicos, patogénicos y genéticos. Estos resultados, novedosos para el país, conllevaron a la determinación de genes relacionados con la patogenicidad y a definir que las características culturales no guardan relación con la variabilidad patogénica del hongo. Se determinó por primera vez para Cuba, la presencia de cuatro razas fisiológicas del patógeno (0, 2, 4, 2.4), distribuidas aleatoriamente por el país. Por la respuesta frente al patógeno se sugirió la inclusión de los genotipos silvestres S. pimpinellifolium, S. esculentum var. cerasiforme y S. peruvianum en los programas de mejoramiento genético del tomate, por la resistencia a P. fulva. En campos de melón en la República de Honduras se detectó y diagnosticó el agente causal de la Muerte súbita o declive de guías (Monosporascus cannonballus), uno de los agentes causales de mayores pérdidas en el cultivo. De manera general, en todos los cultivos estudiados se propició el desarrollo y uso del agente de control biológico Trichoderma y/o de elementos menos agresivos al ambiente. Seseleccionaron aislamientos de este, frente a la mayoría de los patógenos fúngicos referidos anteriormente, bajo condicionesin vitro, semicontroladas y campo, evidenciándose que los aislamientos del controlador biológico tienen cierto grado deespecificidad ante los diferentes agentes causales, lo que infiere la necesidad de una selección ante los mismos. Varios de los aislamientos seleccionados como promisorios se caracterizaron fisiológica y patogénicamente, determinándose las condiciones de temperatura, pH y humedad para la reproducción y conservación, así como los modos de acción de los mismos. Un grupo de estas cepas se identificaron a través de técnicas moleculares como Trichoderma asperellum Samuels, primera notificación de esta especie para el país. Para el control de Rhizoctonia en arroz se seleccionaron dos cepas con eficacia técnica superior al 80%. Como parte del conocimiento necesario para la integración de las tácticas en los cultivos se determinó la compatibilidad de las cepas de Trichoderma con agroquímicos empleados en este cultivo y con otros agentes biológicos, con vistas a armonizar la acción de las mismas

Actividad antagónica de Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg sobre aislados de diferentes grupos anastomósicos de Rhizoctonia solani Kühn

The objective of the work was to evaluate the antagonistic activity of seven strains of Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg against isolates from three anastomosis groups of Rhizoctonia solani Kühn in vitro. The antagonistic capacity was determined by evaluating the competition for space (diameter of the colonies, according to the scale by Bell et al.) and mycoparasitism (Trichoderma growth on the pathogen colonies) in dual culture. All the strains were located in class 1 of the scale by Bell et al., given by the highest growth rate of the Trichoderma strains. Parasitism was determined by the colonized anastomosis group, standing out the Trichoderma strains Ta.13 versus AG-2.1; Ta.17, Ta.75, Ta.78, and Ta.90 against AG-5; and Ta.85 against AG-8, wich overgrew more than 75% (parasitism) the area of the pathogen colonies. From the practical point of view, tthese results are of great importance because the R. solani complex is responsible for considerable economic losses in various crops of interest.El trabajo tuvo como objetivo evaluar la actividad antagónica in vitro de siete cepas de Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg frente a aislamientos de Rhizoctonia solani Kühn pertenecientes a tres grupos anastomósicos. La capacidad antagónica se determinó evaluando la competencia por espacio (diámetro de las colonias, según escala de Bell et al.) y el micoparasitismo (crecimiento de Trichoderma sobre las colonias de los patógenos) en cultivo dual. Todas las cepas se ubicaron en la clase 1 de la escala de Bell et al, dado a la alta velocidad de crecimiento de las cepas de Trichoderma. El parasitismo estuvo determinado por el grupo anastomósico colonizado; se destacaron, con más de 75 % de parasitismo, las cepas Ta.13 frente a AG-2.1, Ta.17, Ta.75, Ta.78 y Ta.90 frente a AG-5; y Ta.85 frente a AG-8. Desde el punto de vista práctico, estos resultados revisten gran importancia debido a que el complejo R. solani causa pérdidas económicas considerables en diversos cultivos de interés