Alteraciones Histopatológicas y de los niveles de Inmunoglobulina G en la Criptococosis inducida en mus musculus balb/c a diferentes tiempos de infección

The present study had the purpose of evaluate histopatological alterations and IgG levels in induced criptococosis in Mus musculus BALB/c "mouse" at different times of infection. For that it was worked with a culture of Cryptococcus neoformans and 45 specimens of Mus musculus BALB/c of both sexes, of 45 days of age and approximately 25g weigh, in 5 of those randomly chosen natural infection by C.neoformans was discarded by means of the test of negative tint with 10% nigrosine in brain samples and lungs, the 40 remaining were distributed at random in control group and experimental group of 20 especimens each one and were subdivided in 4 subgroups of 5 specimens each one. The mice of the experimental group were inoculated intraperitoneally with 0,5 mL of a suspension from the fungus in a similar concentration to the tube Nº 3 of of Mac Farland's Nefelometer, and for the control group it was used 0,5 mL of sterile physiologic saline solution (SSF). At the 10, 15, 20 and 25 days of the inoculation, there were taken samples of blood to evaluate the levels of IgG in serum, and after the sacrifice there were extracted the encephal, lungs, spleen, liver and kidneys for their macroscopic and histological evaluation after their conservation in 10% formol and were later colorated with Hematoxylin. eosin. In relation to the control group in the organs of the experimental group were observed macroscopic changes as: size Increase in longitude presenting marked hepatomegalia and esplenomegalia, change of color, hemorrhagic aspect and presence of abscesses that went increasing in number at more time of infection and histopatological alterations were also observed at the days 10 and 15 as hiperemia in meninxes, chronicle inflammatory infiltration in meninxes, alveolus and interstice in lung, liver and kidney; edema in cerebral cortex; necrosis in cerebral cortex, spleen, liver and kidney; areas of hemorrhages in brain, lung, and perirrenal adipose tissue; tendency to form granuloma in lung, and liver; hiperplasia of lymphatic nodules and megacarioblastos in spleen; proliferation of lymphocytes in spleen, sinusoids dilation in liver; Cryptococcus in meninxes, brain in bilateral form, lung, liver and kidney. At the 20 and 25 days of infection besides the histopatological alterations observed at the days 10 and 15, it was observed granulomatose chronic inflammatory Infiltration in meninxes and lung; hiperemy in cerebral cortex; chronicle inflammatory infiltration in spleen; multiple necrosis focuses in liver and kidney; abundant Cryptococcus in meninxes, brain, spleen, lung, liver and kidney. The evaluation of the levels of anticriptococosic IgG of experimental group and control was carried out by means of ELISA'S test, being the control group negative for anticriptococosic IgG, and the experimental group positive with titles of 1/80, 1/320, 1/160, 1/160 corresponding to the 10, 15, 20, and 25 days of infection. It was concluded that at more times of infection bigger histopatological alterations were presented in the evaluated organs and the levels of IgG increases until the 15 days of infection and then they diminish starting from the 20 days of infection. The test of correlation of Pearson was used, to determine if there is relationship between the size of the evaluated organs and the time of infection with C. neoformans, and it was found that it is highly significant, and the test of Chi squared to determine the dependence relationship between the histopalogical alterations and the levels of Ig G and it was found that dependence relationship exists.El presente estudio tuvo por finalidad evaluar las alteraciones histopatológicas y los niveles de IgG en la criptococosis inducida en Mus musculus BALB/c “ratón” a diferentes tiempos de infección. Se trabajó con Cryptococcus neoformans y 45 ejemplares de Mus musculus BALB/c de ambos sexos, de 45 días de edad y de aproximadamente 25g, en 5 de los cuales elegidos al azar se descartó infección natural por C.neoformans mediante la prueba de tinción negativa con nigrosina al 10 % en muestras de cerebro y pulmones, con los 40 restantes se distribuyeron al azar en grupo control y grupo experimental de 20 ejemplares cada uno y subdividiéndose en 4 subgrupos de 5 ejemplares cada uno. Los ratones del grupo experimental fueron inoculados intraperitonealmente con 0,5 mL de una suspensión del hongo a una concentración similar al tubo No 3 del Nefelómetro de Mac Farland, y para el grupo control se utilizó 0,5 mL solución salina fisiológica (SSF) estéril. A los 10, 15, 20 y 25 días de la inoculación, se tomaron muestras de sangre para evaluar los niveles de IgG en suero, y luego del sacrificio se extrajeron el encéfalo, los pulmones, el bazo, el hígado y los riñones para su evaluación macroscópica e histológica luego de su conservación en formol al 10% y su posterior coloración con Hematoxilina eosina. Se observó cambios macroscópicos como: Aumento de tamaño en longitud presentándose marcada hepatomegalia y esplenomegalia, cambio de color, aspecto hemorrágico y presencia de abscesos que iban aumentando en número a mayor tiempo de infección y alteraciones histopatológicas que variaron de acuerdo al tiempo de infección, así tenemos que : a los 10 y 15 días se observó hiperemia en meninges, infiltración inflamatoria crónica en meninges , alvéolos e intersticio en pulmón, hígado y riñón; edema en corteza cerebral; necrosis en corteza cerebral , bazo, hígado y riñón; zonas de hemorragias en cerebro, pulmón, y tejido adiposo perirrenal; tendencia a formar granuloma en pulmón, e hígado; hiperplasia de nódulos linfáticos y de megacarioblastos en bazo; proliferación de linfocitos en bazo, dilatación de sinusoides en hígado; Cryptococcus en meninges, cerebro en forma bilateral, pulmón, higado y riñón. A los 20 y 25 días de infección además de las alteraciones histopatológicas observadas a los 10 y 15 días, se encontró: Infiltración inflamatoria crónica granulomatosa en meninges y pulmón; hiperemia en corteza cerebral; infiltración inflamatoria crónica en bazo; múltiples focos de necrosis en hígado y riñón; abundantes Cryptococcus en meninges, cerebro, bazo, pulmón, hígado y riñón. La evaluación de los niveles de IgG anticriptococósico del grupo experimental y control se realizó mediante la prueba de ELISA, siendo el grupo control negativo para IgG anticriptococósico, y el grupo experimental positivo con títulos de 1/80, 1/320, 1/160, 1/160 correspondientes a los días 10, 15, 20, y 25 días de infección. Se concluyó que a mayores tiempos de infección se presentaron mayores alteraciones histopatológicas en los órganos evaluados y los niveles de IgG aumentan hasta los 15 días de infección y luego disminuyen a partir de los 20 días de infección. Se utilizó la prueba de correlación de Pearson, para determinar si hay relación entre el tamaño de los órganos evaluados y el tiempo de infección con C. neoformans, y la prueba de Chi cuadrado para determinar la relación de dependencia entre los niveles de alteración histopatológica y los niveles de Ig G encontrandose que existe relación de dependencia entre estos