La vitrification en une seule étape d’embryons murins définit de nouveaux standards de cryopréservation

La cryopréservation d’embryons est un des outils les plus efficaces, économiques et utiles au niveau éthique pour préserver indéfiniment la génétique des animaux de laboratoire. Les bénéfices liés à son utilisation sont nombreux, et incluent la réduction des coûts associés à la pérennisation de lignées, la limitation de l’apparition et de la dissémination de mutations non voulues, la facilité et la sécurité pour les transferts internationaux, et la réduction du nombre d’animaux à élever en captivité. La vitrification a été démontrée comme étant plus efficace que la congélation lente en procréation médicalement assistée humaine, où elle constitue maintenant la méthode de référence. Il en va de même pour la cryopréservation des embryons de souris, où la vitrification préserve mieux l’intégrité de la chromatine, réduit la pénétration intracytoplasmique d’agents cryoprotecteurs potentiellement toxiques, et in fine permet une meilleure survie et un meilleur développement après réchauffement que la congélation lente. Cependant, pour être efficaces, les méthodes actuelles de vitrification nécessitent plusieurs étapes d’exposition des embryons à des solutions spécifiques avant le refroidissement, mais aussi au cours de leur réchauffement ultérieur. Cette relative complexité peut s’avérer difficile à gérer de manière optimale quand un grand nombre d’embryons doivent être traités au cours d’une même session. Nous avons développé et breveté une technologie de vitrification d’embryons en une étape (« one-step ») qui est aussi efficace que les meilleures méthodes de vitrification multi-étapes. De plus, nos milieux sont chimiquement définis (sans sérum ou autre composant biologique non défini), et des supports permettant la vitrification aseptique peuvent être utilisés sans perte de rendement. Notre technologie de vitrification one-step d’embryons de rongeurs répond ainsi aux problèmes d’ergonomie liés aux méthodes classiques de vitrification, et fournit ainsi aux scientifiques une solution efficace, biologiquement sûre et facile à utiliser pour la cryopréservation d’embryons de rongeurs. Elle rend ainsi l’efficacité de la vitrification plus aisément applicable aux rongeurs de laboratoire, contribuant ainsi à la réduction du nombre d’animaux nécessaires à la pérennisation et à la diffusion de lignées ou de colonies utiles.Vitricell: développement et valorisation de kits de vitrification de cellules en conditions aseptiques et chimiquement définie

A successful positional cloning in cattle: characterization of the myostatin gene whose loss of function alleles cause hypermuscularity

This talk reports on the pathway from description of the mode of inheritance of muscular hypertrophy (mh) in cattle to identification of the causative gene and mutations.clonage positionnel du gène d e l'hypertrophie musculaire des bovin

Le travail de Fin d'études à la Faculté de Médecine Vétérinaire: What's new since 2014?

Depuis 2014, date du dernier témoignage lors de formations IFRES, la situation a évolué avec les réglementations et décrets (Bologne -->paysage). De nouveaux outils ont été développés (guide du TFE, clés d'évaluation par compétences spécifiques) et d'autres sont en chantier (implémentation de MaTheO comme outil de gestion du TFE à la FMV). Des problèmes d'organisation surviennent du fait de la conjonction de la nouvelle organisation du cursus vétérinaire, de la réduction de la durée de réalisation du TFE et de la pléthore estudiantine.Travaux de fins d'études: organisatio

VitriCell: The cool way from academic research to company foundation

The presentation was aimed at presenting the pathway from academic research to Vitricell company foundation, emphasizing on the grants and loans that have made this achievement possibleVitriCel

Le travail de Fin d'études à la Faculté de Médecine Vétérinaire: situation en 2012-2013

A la demande de l'IFRES, cet exposé dresse un bilan des conditions d'organisation, d'encadrement et d'évaluation du travail de fin d'études à la Faculté de Médecine Vétérinaires, ainsi que les chantiers à venir.Travaux de fins d'études: organisatio

Genetic engineering in the mouse: from functional genomics to zootechnical applications

Muscular hypertrophy (MH) in cattle is a condition occuring in various breeds and often referred to as “double muscling”. Affected individuals are characterized by a mean 20% increase of skeletal muscle mass. This trait has been selected for in some breeds, especially in the Belgian White and Blue breed, and has attracted considerable attention from geneticists. The mode of inheritance has been characterized as autosomal and recessive (Hanset & Michaux, 1985 a et b). A positional cloning approach has localized MH to the centromeric tip of bovine chromosome 2 (Charlier et al., 1995). Inactivation of the Growth and Differentiation Factor 8 (now referred to as Myostatin - MSTN) in the mouse (McPherron et al., 1997) resulted in a dramatic increase of skeletal muscle mass as a result of combined muscular hyperplasia and hypertrophy. Using a positional candidate approach, Grobet et al. (1997, 1998) demonstrated that MH in cattle is due to loss of function alleles of MSTN. MSTN is a member of the TGF- superfamily of growth and differentiation factors (McPherron et al., 1997). As in cattle, naturally occurring loss of MSTN function in mice (Szabo et al., 1998), sheep (Clop et al., 2006), dogs (Mosher et al., 2007) and humans (Schuelke et al., 2004) result in a spectacular muscular hypertrophy. Consequently, MSTN has become a major research topic in muscle biology either for fundamental research or for more applied purposes. For unravelling some aspects of its biology, for exploring new avenues for palliating muscle wasting conditions or for developing new zootechnical strategies, MSTN over-expression as well as inhibition has been performed in various mouse models (Bogdanovitch et al., 2002; Zimmers et al., 2002; Lee, 2007). Engineering of MSTN in the mouse was carried out in our unit for achieving either its post-natal or male-specific muscular inactivation. Post-natal inactivation has been performed using a conditional knock-out approach (Grobet et al., 2003). The third exon of MSTN, mainly coding for the bioactive domain of the protein, has been flanked by two loxP sites in the same orientation. Post-natal and muscle-specific genomic inactivation was achieved by use of a trangene expressing the Cre recombinase under the MCK promoter. This resulted in a skeletal muscle mass increase of the same magnitude as found in the constitutive knock-out. This demonstrated clearly that post-natal manipulation of MSTN can still have a major effect on muscle development. For modelizing a male-specific muscular hypertrophy, the MSTN latency associated propeptide (previously demonstrated as having MSTN dominant-negative properties; Lee & McPherron, 2001) was inserted on the murine Y chromosome under a muscle-specific promoter (Pirottin et al., 2005). This first successful targeting of the Y chromosome in live mice allowed the expression of a male-specific muscular hypertrophy. This model demonstrated the feasibility of a novel production system in cattle, combining superior beef ability in bulls without impeding dairy production in cows of the same lineage. The MSTN story depicted here is a clear example of the contribution of mouse genetic engineering to fundamental research as well as to more applied model development.Genetic engineering of myostati

Le travail de fin d'études à la FMV: Définition, objectifs, évaluation et modalités

Cet exposé rapporte les évolutions en cours de TFE en médecine vétérinaire, ainsi que les modalités d'application et les problèmes spécifiques liés à la pléthore estudiantineTravaux de fins d'études: organisatio

Double-muscling in mammals" Gene réf. Myostatin (MSTN).

publication date: 2000-08-15; filing date: 1997-07-14A gene (cDNA) encoding a bovine myostatin protein. The nucleic acid coding sequence is identified as SEQ ID NO:1 and the protein sequence is identified as SEQ ID NO:2. A mutant gene (SEQ ID NO:3) in which the coding sequence lacks an 11-base pair consecutive sequence (SEQ ID NO:11) of the sequence encoding bovine protein having myostatin activity has been sequenced. It has been shown that cattle of the Belgian Blue breed homozygous for the mutant gene lacking myostatin activity are double-muscled. A method for determining the presence of muscular hyperplasia in a mammal is described. The method includes obtaining a sample of material containing DNA from the mammal and ascertaining whether a sequence of the DNA encoding (a) a protein having biological activity of myostatin, is present, and whether a sequence of the DNA encoding (b) an allelic protein lacking the activity of (a), is present. The absence of (a) and the presence of (b) indicates the presence of muscular hyperplasia in the mammal