Reproductive technology in domestic carnivorous

Background: The delay in development of artificial reproduction techniques on carnivorous could be due to countless reasons, but the lack of commercial interest is probably the most important one. The majority of canines are small structures, canidae are extremely fertile and a great number of species are adapted to domestication or captivity. Finally, the canine gamete physiology presents a difficult adaptation of technology knowledge obtained from other species. Furthermore, domestic felines are animals of company and there is no interest in reproducing them in a large scale, as it has been observed in other domestic animals, however, besides of being a valuable model for the development of in vitro techniques, the domestic cat is also used as an embryo receptor for different species of small wild felines due to physiological similarities among them, in vitro embrionary development, Review: It was reviewed the main insights about the reproductive physiology in female dogs, in vitro oocytary maturation (IVM), pregnancy and conception rate with dogs' frozen/unfrozen semen and PIV in domestic cats. The majority of mammal oocytes restart meiosis spontaneously after ovulation and reaches MII in artificial environment; in an in vitro maturation system in bovines, around 90% of oocytes complete their maturation, although its development capacity can be reduced subsequently. The success of IVM in canidae have been limited, with maturation rate varying from 0 to 58%, usually around 20%. The greatest difficulties include oocyte quality, hormonal environment, protein supplementation, cumulus / oocyte cell interaction, donor breed and age, culture systems, oxygen tension, amino acids, growth factor and sequential means. The freezing process reduces the quality of the semen, firstly because it reduces the number of living sperms and secondly because freezing produces cell modifications that could alter the sperm motility, longevity, integrity of membranes and its fertilizing capacity. Conclusion: Nowadays, several researches are being performed with the aim of increasing viability after dogs' and cats' semen is unfrozen, using extenders, cryoprotectors, freezing and unfreezing curves, addition of antioxidant substances. The aim of this text is to inform about the improvements obtained on the artificial reproduction techniques, emphasizing the oocytary maturation in female dogs, semen cryopreservation and artificial insemination in domestic dogs and cats

Uso de agonistas de gnrh en la anticoncepción de felinos: revisión de literatura

In several feline species there is a need for contraception in order to prevent overpopulations. Despite the ovariohysterectomy or ovariectomy are the methods of choice for most cats, reproductive management of endangered species requires safe and reversible contraceptive methods. Many aspects must be considered for the choice of contraceptive protocols and different methods have been described. GnRH (gonadotropin-releasing hormone) agonists are an alternative to methods associated with adverse effects as mammary tumors and pyometra. GnRH influences the reproductive process, modulating the gametogenesis, and therefore can be used to inhibit reproduction through direct suppression of the hypothalamic-pituitarygonadal axis in both males and females. In female cats, GnRH agonists overlap the endogenous pulse, initially stimulating folliculogenesis and ovulation, followed by ovarian quiescence. Although effective as a contraceptive, studies are needed to elucidate the return of fertility of females treated. In male cats, suppression of testosterone, sexual behavior and the development of penile spines were observed. This way GnRH agonists can be considered a viable method of suppression of sexual function cats.En varias especies de felinos es necesario para la anticoncepción para evitar sobrepoblaciones. A pesar de que la ovariectomía u ovariohisterectomía son los métodos de elección para la mayoría de los gatos, la cría de especies en peligro de extinción requiere de métodos anticonceptivos seguros y reversibles. Muchos aspectos deben ser considerados para la elección de los protocolos y diferentes métodos anticonceptivos se han descrito. Agonistas de la GnRH (hormona liberadora de gonadotropina) es una alternativa a los métodos asociados con efectos adversos como tumores mamários e piometra. GnRH influye en el proceso reproductivo, la modulación de la gametogénesis, y por lo tanto puede ser utilizado para inhibir la reproducción mediante la supresión directa del eje hipotálamo-hipófisisgonadal tanto en machos como hembras. En las gatas, los agonistas de GnRH superponen el pulso endógena, inicialmente estimulan la ovulación y la foliculogénesis seguido de quiescencia ovárica. Aunque es eficaz como método anticonceptivo, se necesitan estudios para dilucidar el regreso de la fertilidad de las hembras tratadas. En los gatos machos, la supresión de la conducta de la testosterona, sexual y el desarrollo de las espinas del pene se observaron. Así los agonistas de GnRH pueden considerarse como un método viable de supresión de la función sexual en felinos.Em várias espécies felinas há a necessidade de contracepção no intuito de prevenir superpopulações. Apesar da ovariohisterectomia ou ovariectomia serem os métodos de escolha para a maioria dos gatos domésticos, o manejo reprodutivo de espécies em risco de extinção requer métodos contraceptivos seguros e reversíveis. Muitos aspectos devem ser considerados para a escolha de protocolos contraceptivos e diversos métodos têm sido descritos. Os agonistas do GnRH (hormônio liberador de gonadotrofinas) são uma alternativa a métodos associados a efeitos adversos, como tumores mamários e piometra. O GnRH influencia o processo reprodutivo, modulando a gametogênese, podendo, portanto, ser utilizado para inibir a reprodução pela supressão direta do eixo hipotalâmico-hipofisário-gonadal tanto de machos quanto de fêmeas. Em fêmeas de felídeos, os agonistas GnRH sobrepõem o pulso endógeno, inicialmente estimulando a foliculogênese e a ovulação, seguida de quiescência ovariana. Apesar de eficaz como contraceptivo, estudos são necessários para elucidar o retorno da fertilidade das fêmeas. Em felídeos machos foi observada a supressão de testosterona, do comportamento sexual e do desenvolvimento das espículas penianas. Portanto os agonistas do GnRH podem ser considerados um método viável de supressão da função sexual de felídeos

Influence del ciclo estral en diámetro de los ovocitos en hembras

The low meiotic competence of canine oocytes when subjected to conditions of artificial cultive is considered a major obstacle to the development of reproductive biotechnologies in this species. Low rates of IVM may be linked to the size of oocytes recovered from different phases of the estrous cycle. The objective of this study is to evaluate the relationship between the phases of the estrous cycle - luteal phase and anestrus, with oocyte diameter of bitches. A total of 41 female dogs, aged 6 months to 7 years, subject to ovariosalpingohisterectomy elective in the Clinic of Small Animal Reproduction, Department of Animal Reproduction and Veterinary Radiology, School of Veterinary Medicine and Animal Science, UNESP, Botucatu. Ovaries were sliced and selected only those COCs grade I, being subjected to the solution of 2% hyaluronidase to remove cumulus cells. After this process, the oocytes were stained with 10 / ml of Hoechst 33342 for assessment of oocyte diameter without the zona pellucida. The results showed no statistically significant difference between the oocytes from anestrous and luteal phases (77.62 µm x 78.64 µm ). Thus, there is a need for further studies to be able to have a proper understanding of the factors that may be interfering with oocyte competence and should not be considered only a determining factor since the coordinated action of several factors contributing to the growth and developing oocyte.La baja competencia meiótica de ovocitos caninos cuando se someten a condiciones de cultivo artificial se considera un obstáculo importante para el desarrollo de biotecnologías reproductivas de esta especie. Las bajas tasas de IVM puede estar relacionado con el tamaño de los ovocitos recuperados de las diferentes fases del ciclo estral. El objetivo de este estudio es evaluar la relación entre las fases del ciclo estral - fase lútea y anestro, con un diámetro de ovocitos de hembras. Un total de 41 hembras, con edades entre 6 meses a 7 años, conforme a ovariosalpingohisterectomy el trabajo electiva en la Clínica de Reproducción de Pequeños Animales, Departamento de Reproducción Animal y Radiología Veterinaria, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNESP, Botucatu. Los ovarios fueron cortados y seleccionar sólo aquellos COCs grado I, se someten a la solución de 2% de hialuronidasa para eliminar las células del cumulus. Después de este proceso, los ovocitos se tiñeron con 10 g / ml de Hoechst 33342 para evaluar diámetro de los ovocitos sin zona de los ovarios pelúcida. Os rodajas y se selecciona sólo aquellos AOC grado I, siendo sometidos a solución de hialuronidasa de 2% para la retirada de los células del cumulus. Después de este proceso, los ovocitos se tiñeron con 10 g / ml de Hoechst 33342 para la evaluación del diámetro del ovocito sin la zona pelúcida. Los resultados no mostraron diferencias estadísticamente significativas entre los ovocitos de las fases lútea y en anestro (77,62 x 78,64 mm microM). Por lo tanto, hay una necesidad de más estudios para ser capaz de tener una adecuada comprensión de los factores que pueden interferir con la competencia de ovocitos y no debe considerarse simplemente un factor determinante ya que la acción coordinada de varios factores que contribuyen al crecimiento y desarrollo de los ovócitos.A baixa competência meiótica de oócitos caninos quando submetidos às condições artificiais de cultivo é considerada um grande obstáculo para o desenvolvimento de biotecnologias reprodutivas nessa espécie. As baixas taxas de MIV podem estar associadas ao tamanho dos oócitos recuperados das diferentes fases do ciclo estral. Assim, o objetivo desse trabalho é avaliar a relação entre as fases do ciclo estral – fase luteal e anestro, com o diâmetro oocitário de cadelas. Foram utilizadas 41 fêmeas caninas, com idades entre 6 meses e 7 anos, submetidas à ovariosalpingohisterectomia eletiva no Ambulatório de Reprodução de Pequenos Animais do Departamento de Reprodução Animal e Radiologia Veterinária, da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da UNESP, Botucatu. Os ovários foram fatiados e selecionados apenas os COCs grau I, sendo submetidos à solução de hialuronidase a 2% para a retirada das células do cumulus. Após esse processo, os oócitos foram corados com 10 μg/ml de Hoechst 33342 para avaliação do diâmetro oocitário, sem a zona pelúcida. Os resultados não demonstraram diferença estatisticamente significativa entre os oócitos obtidos das fases de anestro e luteal (77.62 µm x 78.64 µm). Dessa forma, há a necessidade de novos estudos para que seja possível uma compreensão adequada de quais os fatores que possam estar interferindo na competência oocitária, não devendo-se considerar apenas um fator determinante já que a ação coordenada de diversos fatores contribui para o crescimento e desenvolvimento do oócito

Semen freezing and its efficiency in the artificial insemination in dog

The canine reproductive physiology and unsatisfactory results on techniques of frozen dog semen has been the biggest barrier on the improvement of artificial insemination in dogs. Many researches are been done in this area generating a lot of information, especially on semen technology. The aim of this text is to discuss the major advances on semen evaluation and semen frozen and its influence on artificial insemination results.A fisiologia reprodutiva da espécie canina e a resposta insatisfatória do sêmen do cão à técnica da congelação são os dois maiores empecilhos aos esforços para o avanço da inseminação artificial em cães. Inúmeras pesquisas estão sendo desenvolvidas nessa área, gerando muitas informações, sobretudo na tecnologia de sêmen. O objetivo desse texto é discutir os principais avanços na avaliação e congelação de sêmen e sua influencia nos resultados de inseminação artificial

Acompañamiento de la gestación en perras por el ultrasonido: revisión de literatura

The ultrasonography exam is largely used in Veterinary Medicine as a method of diagnosis on several domestic animals species, mainly to diagnose pregnancy. Beyond confirm the pregnancy, the ultrasound is able to assess the age of the fetus, the conditions of the ovary and the uterus, the structures and vital condition of the fetus and the fetal development on different pregnancy s stages. The ultrasound has 94% of precision to diagnosis pregnancy since the 30º day after the breed. Compared with the humans being, the application of the ultrasound to estimate the fetal age in bitch is limited, due to the large variation of breed and size on this specie. Several formulas were developed to calculate the gestational age and to provide the date of the birth in dogs, but it is unknown the efficacy of this formulas on the different gestational stages and on different breed of dogs. Therefore, new studies are necessary to guide the veterinary about the best choice of the ultrasonographic evaluation method to known exactly the date of the gestational age.El examen del ultrasonido en el modo-B es ampliamente utilizado en la Medicina Veterinaria como un método de diagnostico en varias especies de animales domésticos, especialmente para confirmación de gestación. Más allá de diagnosticar la preñez, el ultrasonido también evalua la edad de la gestación, las condiciones de los ovarios y del útero, estructuras y condiciones vitales de los fetos y el desenvolvimiento fetal en diferentes etapas de gestación. El ultrasonido tiene 94% de precisión en el diagnóstico de gestación después del 30º día de la copula. Comparada con la especie humana, la aplicación del ultrasonido para estimar la edad fetal en perros es limitada, debido a la gran variación de razas y de tamaño en esa especie. Varias formulas fueran desarroladas para el cálculo de la edad gestacional y previsión de fecha del parto en perros, pero no se sabe aún cual la eficacia de cada una de esas formulas en las diferentes fases de gestación y en las diferentes razas de perros. Por tanto, son necesarios nuevos estudios que orienten el medico veterinario en relación a la mejor escoja del método de evaluación del ultrasonido para tener la fecha correcta de la edad gestacional.O exame ultrassonográfico em modo-B é amplamente utilizado na Medicina Veterinária como método de diagnóstico em várias espécies de animais domésticos, especialmente para confirmação de gestação. Além de diagnosticar a prenhes, o ultrassom também avalia a idade gestacional, as condições dos ovários e do útero, estruturas e condições vitais dos fetos e o desenvolvimento fetal em diferentes estágios gestacionais. O ultrassom possui 94% de precisão no diagnóstico de gestação a partir do 30º dia após a cópula. Comparada com a espécie humana, a aplicação do ultrassom para estimar a idade fetal em cadelas é limitada, devido a grande variação de raças e de tamanho nessa espécie. Várias fórmulas foram desenvolvidas para cálculo da idade gestacional e previsão da data do parto em cães, porém não se sabe ainda qual a eficácia de cada uma dessas fórmulas nas diferentes fases gestacionais e nas diferentes raças de cães. Portanto, são necessários novos estudos que orientem o médico veterinário em relação a melhor escolha do método de avaliação ultrassonográfica a fim de se ter a data exata da idade gestacional

Lactate in Bitches with Pyometra

Lactate is a compound produced by the anaerobic metabolism of glucose, and hyperlactataemia occurs when the rate of production of lactate exceeds the rate of elimination. This occurs in situations of hypoxia and tissue hypoperfusion. Lactate has been considered a useful prognostic indicator in critically ill patients. Pyometra is a disease of adult female dogs characterized by inflammation of the uterus with an accumulation of exudate, which occurs during the luteal phase. It is one of the most common diseases that occur in the genital tract of female dogs. A total of 31 dogs were diagnosed with pyometra. The diagnosis was confirmed at ultrasonography. of the 31 dogs, 25 females had open cervix pyometra and six had closed cervix pyometra. Plasma lactate concentrations were determined by an enzymatic colorimetric method. The average concentration (+/- SD) of plasma lactate in all 31 bitches with pyometra was 3.55 +/- 0.46 mm. Healthy dogs had plasma lactate concentrations between 0.3 and 2.5 mm (mean +/- SD). Concentrations ranged from 0.8 to 2.9 mm when plasma lactate was measured with a portable device and 0.42.6 mm with the blood gas analyser. Even though plasma lactate values vary between several studies and equipment used to measure concentrations, our results for dogs with pyometra are higher indicating hyperlactataemia (Thorneloe et al. , Can Vet J 48, 283288). Plasma lactate in dogs with closed cervix pyometra was mean +/- SD and in dogs with open cervix pyometra, it was mean +/- SD. The plasma lactate concentration in dogs with pyometra was higher than in healthy bitches, and there was no influence of patency of the cervix on the concentration of plasma lactate concentrations. Plasma lactate concentrations were similar for animals with open and closed pyometra (3.54 +/- 0.52 to 3.64 +/- 1.03 mm)

Influence of stages anestrous and diestrus in chromatin configuration in germinal vesicle of canine oocytes

In canine specie, oocyte maturation rates are low and the percentage of oocytes that remain in the stage of germinal vesicle (GV) regardless of culture conditions is high. During maturation oocyte undergoes modification and the GV chromatin remodeling manifested by changes in the configuration and positioning. The objective of this work is to evaluate the configuration and positioning of chromatin of oocytes in GV stage during anestrus and diestrus bitches. The ovaries of 33 females (20 bitches in anestrous and 13 in diestrus) were isolated, sliced and only cumulus-oocyte complexes (COCs) grade 1 were subjected to solution of 0.2% hyaluronidase for release in cumulus cells. After this process, the selected oocytes were stained and evaluated. From a total of 920 oocytes, 566 were classified as grade 1 and the stages of chromatin configuration identified as GV-1, GV-2, GV-3 and GV-4. The observed changes in chromatin configuration been characterized as a transition dispersed chromatin (GV-1, GV-2) for partially condensed (GV-3) until it reaches a fully condensed stage (GV-4). The data analyzed from the chromatin configuration showed a significant difference between the stages with a higher proportion of GV-1 and GV-2 for the anoestrus and GV-3 and GV-4 during diestrus. There is need for further studies to be able to have a proper understanding of the influence of chromatin configuration of oocytes in GV stage in resumption of meiosis and consequently in oocyte meiotic competence.Na espécie canina as taxas de maturação oocitária são baixas e a porcentagem de oócitos que permanecem em estágio de vesícula germinativa (VG), independente das condições de cultivo, é alta. Durante a maturação oocitária, a VG sofre modificação e remodelamento da cromatina, que se manifesta por alterações na sua configuração e posicionamento. Assim, o objetivo deste trabalho é avaliar a configuração e o posicionamento da cromatina de oócitos em estágio de VG durante o anestro e diestro de cadelas. Os ovários de 33 fêmeas (20 cadelas em anestro e 13 em diestro) foram isolados, fatiados e os complexos cumulus-oócitos (COCs) foram submetidos à solução de hialuronidase 0,2% para a liberação das células do cumulus. Após esse processo, os oócitos selecionados foram corados, avaliados e apenas COCs grau 1 foram utilizados. De um total de 920 oócitos, 566 foram classificados como grau 1 e os estágios de configuração da cromatina identificados como VG-1, VG-2, VG-3 e VG-4. As alterações observadas na configuração da cromatina foram caracterizadas como transição de uma cromatina dispersa (VG-1, VG-2) para parcialmente condensada (VG-3) até atingir um estágio totalmente condensado (VG-4). Os dados analisados da configuração da cromatina mostraram uma diferença significativa entre as fases de anestro e diestro, com maior proporção de VG-1 e VG-2 durante o anestro e de VG-3 e VG-4 durante o diestro. Há necessidade de novos estudos para uma compreensão adequada da influência da configuração da cromatina de oócitos no estágio de VG na retomada da meiose e na competência meiótica do oócito

Incorporación de vitamina C y catalasa en la refrigeración de semen de perros jóvenes y viejos

The use of cooled semen is anoption for clinical practice, since it’s a practical and inexpensive method, which allows a god preservation of fertility. However, spermatozoa stored under refrigeration conditions become aged, losing fertilizing capacity. The addition of antioxidant molecules tocooling extenders could reduce oxidative stress during storage improving semen quality. The goal of this study was to analyze the effects of the addition of catalaseand vitamin C over the quality of refrigerated semen. Semen from five dogs aging between 2 to 5 years and five with more than 7 years was used. After collection the ejaculates were divided into three samples, one diluted in the cooling extender (control without antioxidant), another diluted in the extender with vitaminC, and the last with extender with catalase. Before and after cooling all samples were analyzed by Computer Assisted Semen Analysis (CASA), sperm morphology and analysis of the plasmatic and acrosomal membrane integrity. In this study the only variable that has benefited from the action of antioxidants was the acrosome integrity in cooled samples obtained from aged animals. In addition, in this same group the concentration of catalase used seems to have had a deleterious effect on sperm motility parameters. These results provide additional evidence of individual variations in response to cooling suggesting the need for a larger number of studies involving experimental animals of different ages.El interés en las técnicas de preservación de los espermatozoides y de la inseminación artificial ha crecido mucho en todo el mundo. La utilización del semen refrigerado es una opción para el uso en la rutina clínica, ya que es un método práctico, más barato, que preserva mejorla fertilidad y con el cual la inseminación puede ser hecha por la vía transvaginal. La principal desventaja del uso del semen refrigerado es el corto período de supervivencia de los espermatozoides, siendo necesaria la utilización de la muestra en aproximadamente 4,9 días después de la colecta. La incorporación de moléculas antioxidantes en el diluyente de semen refrigerado podría reducir el impacto del estrés oxidativo durante el proceso de almacenamiento espermático y así mejorar la calidad del semen, propiciando un mayor tiempo de supervivencia de los espermatozoides y la disminución de la dosis de inseminación. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la incorporación de la catalasa y de la vitamina C en el diluyente sobre la calidad del semen refrigerado de perros y comparar estos antioxidantes, enzimáticos o no (catalasa x vitamina C), en la calidad de semen refrigerado de perros. Para esto fueron utilizados 10 perros, cinco de ellos con edad entre 2 y 5 años (jóvenes) y cinco con más de siete años (mayores). El semen fue colectado por manipulación digital del pene, en embudo de plástico, acoplado en un tubo plástico graduado. El semen de todos los animales fue analizado utilizando la prueba hipoosmótica, marcadores fluorescentes, sistema computadorizado CASA, análisis de la morfología espermática e integridad acrosomal. Después, el semen fue dividido en tres muestras con el fin de ser sometidas a refrigeración a 5°C por 96 horas en los medios de refrigeración control (sin incorporación de antioxidante), con incorporación de vitamina C y con adición de catalasa. Después de este período de refrigeración los análisis fueron repetidos en todas las muestras. Los resultados fueron evaluados por el análisis de variancia y las diferencias fueron verificadas por la prueba de Tukey, siendo el nivel de significancia adoptado de 5%. Los resultados obtenidos demuestran que la única variable que fue beneficiada por la acción de los antioxidantes fue la integridad acrosómica. Se concluye que los oxidantes vitamina C y catalasa no actuaron positivamente en el proceso de refrigeración de semen de perros jóvenes y mayores.O uso de sêmen refrigerado é uma boa opção na rotina clínica de inseminação, sendo um método prático e barato que permite melhor preservação da fertilidade quando comparado ao sêmen congelado. Contudo, o período de sobrevivência dos espermatozoides é curto. A adição de moléculas antioxidantes ao meio de diluição pode reduzir o estresse oxidativo durante o armazenamento e assim melhorar sua qualidade. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da adição da catalase e vitamina C ao diluente sobre a qualidade do sêmen canino refrigerado. Para isso foram utilizados cinco cães com idade variando de 2 a 5 anos, e cinco com mais de sete anos. O sêmen foi colhido e dividido em três amostras para a refrigeração nos meios controle (sem adição de antioxidante), com adição de vitamina C e com adição de catalase. Antes e após a refrigeração as amostras foram analisadas através do sistema computadorizado CASA, da análise da morfologia espermática e da integridade das membranas plasmática e acrossomal. No presente trabalho a única variável que se beneficiou da ação dos antioxidantes foi à integridade do acrossomo nas amostras de sêmen resfriado obtidas de animais idosos. Além disso, neste mesmo grupo a concentração de catalase utilizada parece ter tido um efeito deletério sobre parâmetros da motilidade espermática. Estes resultados reforçam a evidência de variações individuais na resposta a refrigeração espermática e indicam a necessidade de um maior número de estudos envolvendo animais com idades diferentes

Evaluación del estrés oxidativo en el plasma seminal de perros fértiles y subfértiles después de la suplementación con vitamina C y E

Sperm cells are highly susceptible to oxidative stress due to a high concentration of fatty acid in the composition of their membranes. Oxidative stress occurs due to an imbalance between the concentrations of antioxidants and oxidants, which can lead to the loss of sperm fertilizing ability. The aim of this study was to evaluate, in seminal plasma, the rates of lipid peroxidation and concentration of antioxidants: Superoxide Dismutase (SOD), catalase, vitamins C and E, from fertile and subfertile dogs after an oral supplementation of vitamin C and E for 60 days. For that, it was used 13 dogs of different breeds and ages that were fed with commercial food (Max Adulto - Royal Canin) for four months. Over the past 60 days, animals received a diet added to oral supplementation of 500 mg vitamin C and E. Semen was collected by penis digital manipulation in three times before (M1), 30 (M2) and 60 days (M3) of supplementation. Seminal plasma was obtained after centrifugation (18000g) of the ejaculate and stored in Eppendorff tubes in a freezer at -20 º C. It was measured in seminal plasma the index of lipid peroxidation, by analysis of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and the concentrations of SOD, catalase, vitamin C and E. Analysis of lipid peroxidation, concentrations of SOD, catalase and vitamin C were performed using a spectrophotometer at different wavelengths (532, 530, 230 and 520, respectively) and for the evaluation of SOD it was used a commercial kit (Frutosamina - Labtest ®). The concentration of vitamin E was performed using a high-performance liquid chromatography (HPLC). The results showed significant differences between groups of fertile and infertile dogs only at M1 (before oral supplementation). There was no difference between groups in other moments. Regarding the concentration of antioxidants, there was no significant difference between groups and between moments. Based on the exposed, the oral supplementation with vitamin C and E in dosages of 500 mg / day for 60 days did not interfere on the rates of lipid peroxidation (TBARS) and antioxidant concentrations.Los espermatozoides son muy sensibles al estrés oxidativo debido a la gran concentración de ácidos grasos presentes en sus membranas. El estrés oxidativo se produce debido al desequilibrio entre las concentraciones de las sustancias antioxidantes y oxidantes, lo que puede generar pérdida en la capacidad fértil de los espermatozoides. El objetivo de este estudio fue evaluar, en el plasma seminal, las tasas de peroxidación de lípidos y la concentración de antioxidantes: superóxido dismutasa (SOD), catalasa, vitaminas C y E, en perros fertiles y subfértiles después de la suplementación oral de vitamina C y E durante 60 días. Para este, hemos utilizado 13 perros de diferentes razas y edades que fueron alimentados con una dieta comercial (Max Adultos - Royal Canin) durante cuatro meses. Durante los últimos 60 días, los animales recibieron la dieta comercial en conjunto con una suplementación oral de 500 mg de vitamina C y E durante 60 días. El semen fue colectado por manipulación digital del pene en tres veces antes (M1), 30 (M2) y 60 días (M3) de la suplementación. El plasma seminal se obtuvo a partir de la centrifugación (18000g) del eyaculado y se almacenó en tubos Eppendorff en un congelador a - 20ºC. En el plasma se midieron la peroxidación lipídica mediante análisis de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS), y las concentraciones de SOD, catalasa, vitamina C y E. Los análisis de peroxidación lipidica, las concentraciones de SOD, catalasa y la vitamina C se realizaron en un espectrofotómetro en diferentes longitudes de onda (532, 530, 230 y 520, respectivamente) y para la evaluación de la SOD utilizó un kit comercial (fructosamina - Labtest ®). La determinación de vitamina E se realizó mediante una cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). Los resultados mostraron diferencias significativas entre los grupos de perros fértiles e infértiles sólo en M1 (antes de la suplementación oral). No hubo diferencias entre los grupos en otros momentos. En relación a la concentración de antioxidantes, no hubo diferencias significativas entre los grupos y entre los tiempos. Con base en lo anterior la suplementación oral con vitamina C y E en dosis de 500 mg / día durante 60 días no afectó los índices de peroxidación lipídica (TBARS) ní las concentraciones de antioxidantes.Os espermatozóides são células altamente susceptíveis ao estresse oxidativo devido a grande concentração de ácidos graxos na composição de suas membranas. O estresse oxidativo ocorre devido a um desequilíbrio entre as concentrações de substâncias antioxidantes e oxidantes, o que pode levar a perda da capacidade fertilizante do espermatozóide. O objetivo deste trabalho foi avaliar, no plasma seminal, as taxas de peroxidação lipídica e a concentração das substâncias antioxidantes: Superóxido Dismutase (SOD), catalase, vitaminas C e E de cães férteis e subférteis após uma suplementação oral de vitamina C e E por 60 dias. Foram utilizados 13 cães de diferentes raças e idades que receberam ração comercial (Max Adulto – Royal Canin) por quatro meses. Nos últimos 60 dias, os animais receberam uma suplementação oral de 500mg de vitamina C e E, a qual foi adicionada na ração. O sêmen foi coletado por manipulação digital do pênis em três momentos, antes (M1), após 30 (M2) e 60 dias (M3) de suplementação. O plasma seminal foi obtido após centrifugação (18000g) do ejaculado e armazenado em tubos tipo eppendorf em congelador a -20ºC. Foram mensurados no plasma seminal o índice de peroxidação lipídica, através da análise das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), e as concentrações de SOD, catalase, vitamina C e E. A análise de peroxidação lipídica, das concentrações de SOD, catalase e vitamina C foram realizadas em espectrofotômetro em diferentes comprimentos de onda (532, 530, 230 e 520, respectivamente) sendo que para a avaliação da SOD utilizou-se um kit comercial (Frutosamina – Labtest®). A concentração da vitamina E foi realizada em aparelho de cromatografia líquida de alta performance (HPLC). Os resultados mostraram diferença significativa entre os grupos de cães férteis e subférteis apenas no M1 (antes da suplementação oral). Não foi verificado diferença entre os grupos nos demais momentos. Em relação a concentração dos antioxidantes, não foi observado diferença significativa entre os grupos e entre os momentos. Baseado no exposto a suplementação oral com vitamina C e E nas dosagens de 500mg/dia por 60 dias não interferiu nas taxas de peroxidação lipídica (TBARS) e nas concentrações dos antioxidantes

Evaluación del ultrasonido convencional y dopplerflujometrica durante la fase folicular del ciclo estral de perras

No clinical evaluation on the mating receptivity for the male is a safe method to detect with exactness the occurrence of ovulation. Some females can ovulate in the fifth day of the oestral cycle, while in others ovulation can occur until the thirtieth day. The most recently technique to determine ovulation on bitches is the ovary exploration by ultrassonography. Therefore, the aim of this work was to evaluate the dynamics on the follicular development in bitches by conventional ultrassonography and determinate the dopplerfluxometric values of the intraovarian artery, in order to detect with security the ovulation on bitches. For this, 05 bitches at the beginning of proestrous had been used, submitted to serial examinations ultrassonography. It was evaluated the development of 07 follicles since the initial growth until the formation of the corpora lutea, using ultrasound on B mode with a 10Mhz transducer. The conventional ultrassonography image made it possible to follow the follicular development and/or collapse and formation of corpora lutea in 85.7% of the follicules observed. The use of the Doppler technique was possible during all the period of proestrous and estrous and the average of the maximum velocity of the sistolic peak of the intra-ovarian artery was 26.41cm/s. The resistance index (IR) presented a decline at the day of ovulation until 24 hours, and its value varied of 0.44 ± 0.59 in this period. The IP presented oscillations with decline since 120 hours before until 24 hours after the ovulation and its value in this period was 0.57±1.1.Ninguna evaluación clínica o la recepitividad a la cubricionón por el macho son métodos seguros para ocurrencia y el día de la ovulación en las perras. Algunas hembras pueden ovular en el quinto día del ciclo estral, mientras que en otras la ovulación puede ocurrir hasta el trigésimo día. La técnica más reciente para determinar la ovulación en la perra es la exploración ovariana por ultrasononido. Por lo tanto, este presente trabajo tuvo por objetivo evaluar la dinámica del desarrollo folicular en perras por el examen ultrasonográfico convencional y determinar los valores dopplerflujométricos de la artéria intraovariana, para detectar con seguridad la ovulación en las perras. Fueran utilizadas 05 perras en el inicio de la fase proestro, sometidas a exámenes ultrasonográficos seriados. Fueran evaluados el desarrollo de 07 folículos desde el crecimiento inicial hasta la formación del cuerpo lúteo, utilizando ultrasonido en el modo B con transductor de 10 Mhz. La imagen ultrasonográfica convencional posibilitó acompañar el desarrollo folicular y o colapso y formación del cuerpo lúteo en 85,7 % de los folículos observados. El uso de la técnica Doppler fue posible durante todo el período del proestro y estro y el promedio obtenido de la velocidad máxima del pico sistólico da la artéria intraovariana fue de 26,41 cm/s. El índice de resistência (IR) presentó un declive en el día de la ovulación hasta 24h después, y su valor varió de 0,44- 0,59 en este período. El IP presentó oscilaciones con declive desde 120 horas antes hasta 24 horas después de la ovulación y su valor en ese período fue de 0,57 1,1.Nenhuma avaliação clínica ou a receptividade à cobrição pelo macho são métodos seguros para detectar com exatidão a ocorrência e o dia da ovulação nas cadelas. Algumas fêmeas podem ovular no quinto dia do ciclo estral, enquanto em outras a ovulação pode ocorrer até o trigésimo dia. A técnica mais recente para determinar a ovulação na cadela é a exploração ovariana por ultra-sonografia. Portanto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a dinâmica do desenvolvimento folicular em cadelas pelo exame ultra-sonográfico convencional e determinar os valores dopplerfluxométricos da artéria intra-ovariana, para detectar com segurança a ovulação nas cadelas. Foram utilizadas 05 cadelas no início da fase de pró-estro, submetidas a exames ultra-sonográficos seriados. Foram avaliados o desenvolvimento de 07 folículos desde o crescimento inicial até a formação do corpo lúteo, utilizando ultra-som no modo B com transdutor de 10Mhz. A imagem ultra-sonográfica convencional possibilitou acompanhar o desenvolvimento folicular e ou colapso e formação de corpo lúteo em 85,7% dos folículos observados. O uso da técnica Doppler foi possível durante todo o período do pró-estro e estro e a média obtida da velocidade máxima do pico sistólico da artéria intra-ovariana foi de 26,41cm/s. O índice de resistência (IR) apresentou um declínio no dia da ovulação até 24 horas após, e o seu valor variou de 0,44 – 0,59 neste período. O IP apresentou oscilações com declínio desde 120 horas antes até 24 horas depois da ovulação e seu valor nesse período foi de 0,57 ±1,1