Qualidade do fertilizante in vitro e capacidade do sêmen de touros Crioulos uruguaios criopreservado em dois diluentes comerciais

We evaluated the quality and in vitro fertility (IVF) of semen from the Uruguayan Criollo cattle bank of the Veterinary Faculty. We thawed semen from 8 bulls (0850, 0853, 1026, 1035, 3733, 5834, 9701, 9714), diluted in Triladyl® (T) and Andromed® (A) (with/without egg yolk) and evaluated by CASA: concentration, motility, kinetics, morphology and performed a hyposmotic test, after 2h we repeated motility and kinetics. T-test (5% significance) for time and diluents was applied and percentiles to categorize the 16 samples. The best samples were: T-9714, T-1026, A-9701, A-9714, T-0853, T-9701; except bull 0850 (A and T), the others were acceptable. For IVF we aspirated 404 A-quality oocyte-cumulus complexes (OCC) from bovine ovaries from a slaughterhouse, washed and matured them in TCM with 5% BCS and hormones, in 100μl drops, covered with mineral oil, in incubator (38.5ºC, 5% CO2 and 95% humidity), 22h. 8 groups of OCC were inseminated with selected semen: 1026, 3733, 5834 and 9701 (A and T), which was capacitated by centrifugation in Percoll® gradients (90/45%), in Talp-Sperm and adjusted with Talp-Fert to 2x106sperm/ml, drops were formed, covered with mineral oil and placed the OCC inside, 18h. The zygotes were denuded and cultured in CR1aa with BCS (5%). We evaluated cleavage (48h) and embryo development (ED) on day 7 (IETS standards). Results were analyzed with Chi square (5% significance). There were no significant differences in cleavage between diluents (A:143/207; T:128/197), nor ED (69 and 68 respectively) (p>0.05). There were no significant differences in cleavage between the 1026 (73/109) bull's semen and 9701 (68/101) (p>0.05), nor between them and 5834 (77/102) and 3733 (53/92); although, 5834 had higher cleavage rate than 3733 (p=0.008). There were no significant differences in ED between bulls (p>0.05). This work was important to assess the quality and fertility of the semen bank.Evaluamos la calidad y capacidad fecundante in vitro (FIV) de semen de un banco de bovinos Criollo Uruguayo. Semen de 8 toros, diluido en Triladyl® (T) y Andromed® (A) (con/sin yema de huevo), se evaluó por CASA: concentración, motilidad, cinética, morfología y test hiposmótico. A las 2 horas se repitió motilidad y cinética. Se aplicó el test-T para tiempo y diluyentes y percentiles para categorizar los 16 grupos. Cuatrocientos cuatro complejos ovocito-células del cúmulo (COC) de calidad A, obtenidos de un frigorífico, fueron madurados en TCM con 5% de suero fetal bovino (SFB) y hormonas, en gotas, cubiertas con aceite mineral a 38,5ºC, 5% CO2 y humedad saturada; tras 22h se inseminaron con semen de 4 toros diluidos en A y T, seleccionado por centrifugación en gradientes de Percoll® (90/45%), en Talp-Sperm. Se formaron gotas con Talp-Fert con 2x106spz/ml y se coincubaron con los COC por 18h. Los presuntos cigotos se denudaron y cultivaron en CR1aa con SFB (5%). Se evaluó clivaje (48h) y desarrollo embrionario (DE) al día 7. Los resultados de la FIV se analizaron mediante Chi-cuadrado. No hubo diferencias significativas en el clivaje (A:143/207; T:128/197) ni en el DE (33.33 y 34.52% respectivamente) entre diluyentes. No hubo diferencias significativas en clivaje entre el semen del toro 1026 (73/109) y 9701 (68/101), ni entre ellos respecto a los toros 5834 (77/102) y 3733 (53/92), el 5834 tuvo mayor clivaje respecto al 3733 (p=0.008). No hubo diferencias significativas en DE entre toros. Salvo el toro 0850 (A y T), los demás resultaron aceptables y fueron fértiles en la prueba in vitro. Este trabajo estudió la calidad del semen del banco y su capacidad fertilizante in vitro, resultando adecuados ambos diluyentes. Salvo las muestras de semen de un toro, el resto podrían ser usadas para inseminación artificial u otras biotecnologías.Avaliamos a qualidade e a capacidade de fertilização in vitro (FIV) do sêmen de um banco uruguaio de bovinos crioulos. O sêmen de 8 touros, diluído em Triladyl® (T) e Andromed® (A) (com / sem gema de ovo), foi avaliado pela CASA: concentração, motilidade, cinética, morfologia e teste hiposmótico. Em 2 horas, a motilidade e a cinética foram repetidas. O teste T foi aplicado para tempo e diluentes e percentis para categorizar os 16 grupos. Quatrocentos e quatro complexos cúmulos-ovócitos (COC) de qualidade A, obtidos em geladeira, foram maturados em TCM com 5% de soro fetal bovino (SFB) e hormônios, em gotas, cobertos com óleo mineral a 38,5ºC, 5% CO2 e umidade saturada; após 22h foram inseminados com sêmen de 4 touros diluídos em A e T, selecionados por centrifugação em gradientes de Percoll® (90/45%), em Talp-Sperm. As gotas foram formadas com Talp-Fert a 2x106spz / ml e foram coincubadas com o COC por 18h. Os presumíveis zigotos foram desnudados e cultivados em CR1aa com SFB (5%). A clivagem (48h) e o desenvolvimento embrionário (SD) foram avaliados no dia 7. Os resultados da FIV foram analisados ​​usando Qui-quadrado. Não houve diferenças significativas na clivagem (A: 143/207; T: 128/197) ou no DE (33,33 e 34,52% respectivamente) entre os diluentes. Não houve diferenças significativas na clivagem entre o sêmen dos touros 1026 (73/109) e 9701 (68/101), nem entre eles em relação aos touros 5834 (77/102) e 3733 (53/92), 5834 tiveram maior clivagem em relação a 3733 (p = 0,008). Não houve diferenças significativas no DP entre os touros. Com exceção do touro 0850 (A e T), os demais foram aceitáveis ​​e férteis no teste in vitro. Este trabalho estudou a qualidade do sêmen do banco e sua capacidade de fertilização in vitro, sendo os dois diluentes adequados.&nbsp