Signal-induced ubiquitination of p57Kip2 is independent of the C-terminal consensus Cdk phosphorylation site

AbstractThe cyclin-dependent kinase inhibitor p57Kip2 is required for normal mouse embryonic development. p57Kip2 consists of four structurally distinct domains in which the conserved C-terminal nuclear targeting domain contains a putative Cdk phosphorylation site (Thr342) that shares a great similitude in the adjacent sequences with p27Kip1 but not with p21Cip1. Phosphorylation on Thr187 has been shown to promote degradation of p27Kip1. Although there is sequence homology between the C-terminal part of p27Kip1 and p57Kip2, we show that the ubiquitination and degradation of p57Kip2 are independent of Thr342. In contrast a destabilizing element located in the N-terminal is implicated in p57Kip2 destabilization

Rôle pivot du facteur d'initiation eIF3f dans l'antagonisme atrophie/hypertrophie du muscle squelettique

Le contrôle de la masse musculaire est déterminé par un équilibre entre les processus anaboliques et cataboliques. L'hypertrophie musculaire se caractérise par une augmentation de la synthèse protéique par activation de la voie IGF1/Akt/mTORC1. L'atrophie est le résultat d'une augmentation de la dégradation des protéines, dont le système ubiquitine-protéasome joue un rôle majeur. MAFbx est une E3 ubiquitine ligase dont l'expression est fortement augmentée lors de l'induction de l'atrophie. Les substrats ciblés par MAFbx restent à déterminer. Nous avons identifié le facteur d'initiation eIF3f comme cible du complexe SCFMAFbx lors de l'atrophie. MAFbx induit la poly-ubiquitination sur six residus lysines d'eIF3f conduisant ainsi sa dégradation par le protéasome. Nous montrons le rôle clé d'eIF3f dans l'induction de l'hypertrophie, caractérisée par une augmentation de l'activité de la voie mTORC1. De plus, la sur-expression d'un mutant d'eIF3f résistant à l'ubiquitination est associée à une protection effective contre l'atrophie. eIF3f apparaît être une cible clé de la fonction de MAFbx lors de l'atrophie du muscle et joue un rôle majeur dans l'hypertrophieSkeletal muscle (SM) mass depends upon a dynamic balance between anabolic and catabolic processes. SM hypertrophy is characterized by increased protein synthesis mainly by activation of the IGF1/Akt/mTORC1 pathway. SM atrophy is the results of increased protein breakdown, in which the ubiquitin-proteasome pathway plays a major role. MAFbx is an E3 ligase whose expression is upregulated during muscle atrophy. However the precise function of the SCFMAFbx ubiquitin-ligase in muscle wasting remains unknown. Here, we characterized eIF3f as a target of the SCFMAFbx complex during muscle atrophy. MAFbx induces the poly-ubiquitination of eIF3f in six lyisine residues leading to its proteasomal degradation. We demonstrate that eIF3f plays a key role in hypertrophic by increasing the activity of the mTORC1 pathway. In addition, the overexpression of an eIF3f mutant resistant to poly-ubiquitination is associated with protection against muscle atrophy. Taken together, the specific targeting of eIF3f by MAFbx may account for the decreased protein synthesis observed in atrophy, and eIF3f plays an important role as a mediator of SM hypertrophyMONTPELLIER-BU Sciences (341722106) / SudocSudocFranceF

MyoD et eIF3f : cibles majeures du complexe ubiquitine-ligase SCFMAFbx au cours de l'atrophie musculaire

LE KREMLIN-B.- PARIS 11-BU Méd (940432101) / SudocSudocFranceF

Contrôle des fonctions du facteur de transcription musculaire myod par modifications post-traductionnelles

MyoD est un facteur de transcription spécifique du muscle squelettique (MRFs) régulateur de l'antagonisme prolifération/différenciation au cours de la myogénèse, et essentiel à la régénération musculaire, et dont les fonctions dépendent de son taux d'expression. Dans cette étude nous montrons que la voie ubiquitine/protéasome contrôle post-traductionnellement la dégradation de MyoD, par deux mécanismes d'adressage indépendants. Le premier requiert la phosphorylation spécifique de MyoD au cours de la phase G1 du cycle et permet le maintient des myoblastes en prolifération. Le second est médié par l'activité ubiquitine ligase de la protéine MAFbx/Atrogine-1, surexprimée au cours de l'atrophie musculaire, dont la surexpression active la dégradation de MyoD et inhibe la différenciation terminale des myoblastes. Enfin, MyoD exerce un contrôle sur la transition G2/M, son inactivation et sa dégradation phosphorylation-dépendante à la transition G2/M conditionnent le passage en mitose.The transcription factor MyoD, member of the myogenic regulators family (MRFs), induces differentiation in precursor cells and satellites cells by regulating proliferation/differenciation antagonism and this function seems to be closely link to the level of MyoD protein. Here we show that ubiquitin-proteasom pathway regulates MyoD turn-over by two independant mechanisms. The first requires specific phosphorylation of MyoD at the end of G1 phase of cell cycle and induced MyoD degradation and progression in S phase. The second is mediated by Atrogin-1/MAFbx, an E3 ubiquitin ligase required for skeletal muscle atrophy. MAFbx mediates MyoD ubiquitination in proliferating and differentiating myoblasts and it's over-expression prevent myoblasts differentiation. We finally show that MyoD regulates G2/M transition. MyoD protein's levels increase in G2, its inactivation and destabilization is mediated by specific phosphorylation and trigger mitotic entry.PARIS5-BU Saints-Pères (751062109) / SudocSudocFranceF