Substrate thiophosphorylation by Arabidopsis mitogen-activated protein kinases

Protein sequences of selected MPK3/6 substrates. Table S1. List of primers used for cloning. Table S2. List of primers used for site-directed mutagenesis. (DOCX 21 kb

Funktionelle (psychogene) Hörstörung im Kindesalter - Wie geht es poststationär weiter? Ergebnisse einer Nachbefragung

Hintergrund: Wir verzeichneten in unserer Klinik in den letzten Jahren den Trend, dass unter den Kindern, die aufgrund einer Hörstörung stationär behandelt wurden, der Anteil mit der Diagnose funktionelle (psychogene) Hörstörung deutlich zunimmt. Uns stellte sich die Frage, ob diese Hörstörung nach unserer stationären Behandlung wieder auftritt und ob andere Behandlungen in Anspruch genommen wurden, zumal die vereinbarten Kontrolltermine in unserer Ambulanz häufig nicht wahrgenommen wurden.Material und Methoden: Wir führten standardisierte Nachbefragungen anhand eines Fragebogens per Telefon bei den im Zeitraum von 12/2002 bis 02/2011 mit funktionellen Hörstörungen behandelten Kindern bzw. mit deren Eltern durch.Ergebnisse: Es konnten 29 von 33 Familien befragt werden (Trackingrate: 87%). Bei 2 von 29 Kindern (6,8%) fand eine poststationäre Behandlung statt, u.a. in einer Klinik für Kinder- und Jugendpsychiatrie. Bei 65,5% der Kinder erfolgte eine poststationäre audiologische Kontrolle. Nur 24,1% gaben eine Hörstörung an, die poststationär teilweise im Rahmen von Infekten neu aufgetreten sei. Es zeigte sich, dass 41,4% der Kinder nur schulische und 27,5% sowohl schulische als auch familiäre Probleme (davon als Cofaktoren: 35% LRS, 30% ADHS, 23,8% Adipositas, 23% eine AVWS aufwiesen), 3,4% nur familiäre Probleme und 27,5% sonstige Probleme hatten.41,4% der Kinder befanden sich oder sind noch in kinderpsychiatrischer oder psychotherapeutischer Behandlung, bei 13,8% sei diese Behandlung von den Eltern noch geplant.Diskussion: Bei funktionelle Hörstörungen ist die pädaudiologische Behandlung meist nur das erste Element der Therapie, häufig wird anschließend eine kinderpsychiatrische oder psychotherapeutische Behandlung durchgeführt. Rezidive treten eher selten auf

Combined 15N-Labeling and TandemMOAC Quantifies Phosphorylation of MAP Kinase Substrates Downstream of MKK7 in Arabidopsis

Reversible protein phosphorylation is a widespread posttranslational modification that plays a key role in eukaryotic signal transduction. Due to the dynamics of protein abundance, low stoichiometry and transient nature of protein phosphorylation, the detection and accurate quantification of substrate phosphorylation by protein kinases remains a challenge in phosphoproteome research. Here, we combine tandem metal-oxide affinity chromatography (tandemMOAC) with stable isotope 15N metabolic labeling for the measurement and accurate quantification of low abundant, transiently phosphorylated peptides by mass spectrometry. Since tandemMOAC is not biased toward the enrichment of acidophilic, basophilic, or proline-directed kinase substrates, the method is applicable to identify targets of all these three types of protein kinases. The MKK7-MPK3/6 module, for example, is involved in the regulation of plant development and plant basal and systemic immune responses, but little is known about downstream cascade components. Using our here described phosphoproteomics approach we identified several MPK substrates downstream of the MKK7-MPK3/6 phosphorylation cascade in Arabidopsis. The identification and validation of dynamin-related protein 2 as a novel phosphorylation substrate of the MKK7-MPK3/6 module establishes a novel link between MPK signaling and clathrin-mediated vesicle trafficking

Trineopentylphosphine: A Conformationally Flexible Ligand for the Coupling of Sterically Demanding Substrates in the Buchwald–Hartwig Amination and Suzuki–Miyaura Reaction

Trineopentylphosphine (TNpP) in combination with palladium provides a highly effective catalyst for the Buchwald–Hartwig coupling of sterically demanding aryl bromides and chlorides with sterically hindered aniline derivatives. Excellent yields are obtained even when both substrates include 2,6-diisopropyl substituents. Notably, the reaction rate is inversely related to the steric demand of the substrates. X-ray crystallographic structures of Pd­(TNpP)₂, [Pd­(4-<i>t</i>-Bu-C₆H₄)­(TNpP)­(μ-Br)]₂, and [Pd­(2-Me-C₆H₄)­(TNpP)­(μ-Br)]₂ are reported. These structures suggest that the conformational flexibility of the TNpP ligand plays a key role in allowing the catalyst to couple hindered substrates. The Pd/TNpP system also shows good activity for the Suzuki coupling of hindered aryl bromides