Accuracy of the WHO’s body mass index cut-off points to measure gender- and age-specific obesity in middle-aged adults living in the city of Rio de Janeiro, Brazil

Introduction. Obesity is defined by the World Health Organization (WHO) as a disease characterized by the excessive accumulation of body fat. Obesity is considered a public health problem, leading to serious social, psychological and physical problems. However, the appropriate cut-off point of body mass index (BMI) based on body fat percentage (BF%) for classifying an individual as obese in middle-aged adults living in Rio de Janeiro remains unclear. Materials and methods. This was a prospective cross-sectional study comprising of 856 adults (413 men and 443 women) living in Rio de Janeiro, Brazil ranging from 30-59 years of age. The data were collected over a two year period (2010-2011), and all participants were underwent anthropometric evaluation. The gold standard was the percentage of body fat estimated by bioelectrical impedance analysis. The optimal sensitivity and specificity were attained by adjusting BMI cut-off values to predict obesity based on the WHO criteria: BF% >25% in men and >35% in women, according to the receiver operating characteristic curve (ROC) analysis adjusted for age and for the whole group.Results. The BMI cut-offs for predicting BF% were 29.9 kg/m2 in men and 24.9 kg/m2 in women. Conclusions. The BMI that corresponded to a BF% previously defining obesity was similar to that of other Western populations for men but not for women. Furthermore, gender and age specific cut-off values are recommended in this population

CryoEM structures of the SARS-CoV-2 spike bound to antivirals

(Póster 63) Background: Single-particle cryoelectron microscopy (cryoEM) has played a key role in the fight against COVID-19. The molecular mechanisms for the action of some of the currently approved drugs targeting the SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase, the fast developments of the current available vaccines and antibody therapies are examples of the impact of the knowledge gained from the cryoEM structures of SARS-CoV-2 proteins in complex with proteins (ACE2 or antibodies/nanobodies) or small compounds. Our aim is to use this technology to understand structurally how certain antiviral compounds and proteins targeting the spike may inhibit viral entry. Methods: 1) Production of wild-type and mutated spike and ACE2 proteins using baculovirus/insect cells. 2) Spike binding kinetics: protein-protein and protein-small compound interactions measured by BLI Biolayer interferometry (BLI) and/or microscale Thermophoresis (MST). 3) Buffer optimization for cryoEM grid preparation of spike variants by thermal shift assays and negative-staining electron microscopy (NSEM). These techniques are also used to adjust the molar ratio of spike:ACE2 and spike:small-compound complexes. 4) Structural characterization by cryoEM. Results: At IBV-CSIC we have created a pipeline for the production and characterization of several spike variants and ACE2 decoys. While this pipeline is described in detail in other oral/poster communications, this communication is centered around one of the pillars within this pipeline; the structural characterization of possible drug candidates bound to the SARS-CoV-2 spike by cryoEM. In this way, we have successfully solved structures of the spike bound to: A) protein inhibitors as ACE2 decoys; B) a small inhibitory compound; C) mixtures of proteins and small-compound (nanobody-heparan derivative) working cooperatively as inhibitors. These protein/drug candidates were previously selected based on the results obtained in our interactomics platform, whereas their concentration and the buffer conditions for cryoEM grids preparation were established based on thermal shift assays and NSEM. Conclusion: CryoEM is a powerful tool to directly visualize the effect caused by a potential drug on a protein target. In a short period of time we have developed this technique in our institute to be applied to the SARS-CoV-2 spike protein, not only to obtain high-resolution structures of SARS- CoV-2 spike variants of concern (see WP4) but also to obtain the structures of complexes of the spike with various inhibitory compounds of very different nature

Free-Radical Formation by the Peroxidase-Like Catalytic Activity of MFe2O4 (M = Fe, Ni, and Mn) Nanoparticles

Ferrite magnetic nanoparticles (MNPs) have peroxidase-like activity and thus catalyze the decomposition of H2O2-producing reactive oxygen species (ROS). Increasingly important applications of these ferrite MNPs in biology and medicine require that their morphological, physicochemical, and magnetic properties need to be strictly controlled. Usually, the tuning of their magnetic properties is achieved by the replacement of Fe by other 3d metals, such as Mn or Ni. Here, we studied the catalytic activity of ferrite MNPs (MFe2O4, M = Fe2+/Fe3+, Ni, and Mn) with the mean diameter ranging from 10 to 12 nm. Peroxidase-like activity was studied by electron paramagnetic resonance (EPR) using the spin-trap 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide at different pHs (4.8 and 7.4) and temperatures (25 and 40 °C). We identified an enhanced amount of hydroxyl (•OH) and perhydroxyl (•OOH) radicals for all samples, compared to a blank solution. Quantitative studies show that [•OH] is the dominant radical formed for Fe3O4, which is strongly reduced with the concomitant oxidation of Fe2+ or its substitution (Ni or Mn). A comparative analysis of the EPR data against in vitro production of ROS in microglial BV2 cell culture provided additional insights regarding the catalytic activity of ferrite MNPs, which should be considered if biomedical uses are intended. Our results contribute to a better understanding of the role played by different divalent ions in the catalytic activity of ferrite nanoparticles, which is very important because of their use in biomedical applications.Fil: Moreno Maldonado, Ana Carolina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia del Área de Energía Nuclear. Instituto Balseiro; ArgentinaFil: Winkler, Elin Lilian. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia del Área de Energía Nuclear. Instituto Balseiro; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología - Nodo Bariloche | Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología - Nodo Bariloche; ArgentinaFil: Raineri Andersen, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; ArgentinaFil: Toro Córdova, Alfonso. Universidad de Zaragoza; EspañaFil: Rodriguez, Luis Miguel. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; ArgentinaFil: Troiani, Horacio Esteban. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia del Área de Energía Nuclear. Instituto Balseiro; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mojica Pisciotti, Mary Luz. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; ArgentinaFil: Vasquez Mansilla, Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; ArgentinaFil: Tobia, Dina. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; ArgentinaFil: Nadal, Marcela. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia del Área de Investigación y Aplicaciones No Nucleares. Gerencia de Física. Laboratorio de Resonancias Magnéticas; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Torres Molina, Teobaldo Enrique. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia del Área de Investigación y Aplicaciones No Nucleares. Gerencia de Física. Laboratorio de Resonancias Magnéticas; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: de Biasi, Emilio. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; ArgentinaFil: Ramos, Carlos A.. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia del Área de Investigación y Aplicaciones No Nucleares. Gerencia de Física. Laboratorio de Resonancias Magnéticas; ArgentinaFil: Goya, Gerardo Fabian. Universidad de Zaragoza; EspañaFil: Zysler, Roberto Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; ArgentinaFil: Lima, Enio Junior. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche | Comision Nacional de Energia Atomica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnologia - Nodo Bariloche.; Argentin

Reply to "comment on 'Free-Radical Formation by the Peroxidase-Like Catalytic Activity of MFe2O4 (M = Fe, Ni, and Mn) Nanoparticles'"

Recently we have reported a qualitative, quantitative and reproducible study of the generation of free radicals as a result of the surface catalytic activity of Fe3O4, Fe2O3, MnFe2O4 and NiFe2O4 nanoparticles as a function of the Fe2+/Fe3+ oxidation state under different pHs (4.8 and 7.4) and temperatures (25 ºC and 40 ºC) condition. These results were contrasted with those obtained from the in vitro experiments in BV2 cells incubated with dextran-coated magneticnanoparticles. Based on these results we affirm that our ferrite magnetic nanoparticles catalyze the formation of free radicals and the decomposition of H2O2 by a ?peroxidase-like? activity. In a comment on this article, Meunier and A. Robert question two points: First they assert that the measured free radicals are not produced by a peroxidase reaction. Also, based on a different normalization method from those reported in our work, they also discuss that the reaction is not catalytic. Here we reply the arguments of the authors about these two points.Fil: Moreno Maldonado, Ana Carolina. Instituto de Nanociencia de Aragón; ; EspañaFil: Winkler, Elin Lilian. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Raineri Andersen, Mariana. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Toro Cordova, Alfonso. Universidad de Zaragoza; EspañaFil: Rodriguez, Luis Miguel. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Troiani, Horacio Esteban. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mojica Pisciotti, Mary Luz. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Gerencia del Área de Energía Nuclear. Instituto Balseiro; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vasquez Mansilla, Marcelo. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Tobia, Dina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Nadal, Marcela. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Torres Molina, Teobaldo Enrique. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: de Biasi, Emilio. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Ramos, Carlos Alberto. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Goya, Gerardo Fabian. Universidad de Zaragoza; EspañaFil: Zysler, Roberto Daniel. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; ArgentinaFil: Lima, Enio Junior. Comisión Nacional de Energía Atómica. Centro Atómico Bariloche; Argentina. Comisión Nacional de Energía Atómica. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad Ejecutora Instituto de Nanociencia y Nanotecnología; Argentin

Use of an interactomics pipeline to assess the potential of new antivirals against SARS-CoV-2

(Póster 80) Background: In late 2019 SARS-CoV-2 infection appeared in China, becoming a pandemic in 2020. The scientific community reacted rapidly, characterizing the viral genome and its encoded proteins, aiming at interfering with viral spreading with vaccines and antivirals. The receptor binding domain (RBD) of the viral spike (S) protein plays a key role in cell entry of the virus. It interacts with the cellular receptor for SARS-CoV-2, the membrane-bound human Angiotensin Converting Ectoenzyme 2 (ACE2). With the goal of monitoring interference with this interaction by potential antiviral drugs, we have set up at the Institute for Biomedicine of Valencia (IBV-CSIC) an interactomics pipeline targeting the initial step of viral entry. Methods: For the production part of the pipeline (pure RBD/Spike variants and soluble ACE2), see parallel poster. These proteins allowed monitoring of the RBD/Spike-ACE2 interaction in presence or absence of potential inhibitors. Thermal shift assays (thermofluor) were used for initial detection of compound binding at different ligand/protein ratios and media conditions (pH, buffers, chaotropic agents). Next, binding affinity and on/off kinetics were characterized using Biolayer interferometry (BLI), Surface plasmon resonance (SPR), Microscale Thermophoresis (MST) and/or Isothermal titration calorimetry (ITC). For protein-protein interactions, we mostly used BLI or SPR, whereas for proteinsmall compound analysis MST was generally best. Protein aggregation-dissociation was monitored by size exclusion chromatography with multiangle light scattering (SEC-MALS). Results: Candidates proven by thermal shift assays to bind to RBD/spike protein without affecting the integrity of these proteins were subjected to quantitative affinity measurements. We successfully demonstrated that BLI, SPR and MST can be used to follow the interactions between SARS-CoV- 2 proteins and the putative drug candidates, as well as to monitor the interference with Spike-Ace2 binding of potential drug candidates. While BLI and SPR displayed reproducible results in the measurement of protein-protein interaction (applied to soluble ACE2 used as a decoy), they were less suitable for measuring the binding of small molecules. The fact that most small compounds were only soluble in organic solvents made difficult to obtain a low signal/noise while using BLI, necessary for the assessment of the binding. We overcame that problem by using MST. After dilution of the compounds to the final experimental concentrations, the technique could detect a significant binding signal enough to calculate binding parameters. MST also allowed to measure the degree of interference that each compound was having on RBD/Spike-ACE2 interaction. The pipeline has been customized and validated with compounds of very different nature provided by different groups belonging to the PTI and other external laboratories, as well as with different Ace2 decoys designed at the IBV. Conclusions: The interactomics platform at the IBV has been used to successfully develop two different antiviral approaches in order to fight COVID-19. It has allowed technical specialization of the staff as well as the development, in a very short period of time, of two ambitious projects. We have demonstrated that we can perform interactomic characterization for challenging projects as well as provide information about binding of antivirals to potential new SARS-CoV-2 variants of concern

The structural role of SARS-CoV-2 genetic background in the emergence and success of spike mutations: The case of the spike A222V mutation

The S:A222V point mutation, within the G clade, was characteristic of the 20E (EU1) SARS-CoV-2 variant identified in Spain in early summer 2020. This mutation has since reappeared in the Delta subvariant AY.4.2, raising questions about its specific effect on viral infection. We report combined serological, functional, structural and computational studies characterizing the impact of this mutation. Our results reveal that S:A222V promotes an increased RBD opening and slightly increases ACE2 binding as compared to the parent S:D614G clade. Finally, S:A222V does not reduce sera neutralization capacity, suggesting it does not affect vaccine effectiveness

Monolayer Self-Assembly at Liquid-Solid Interfaces: Chirality and Electronic Properties of Molecules at Surfaces

peer reviewedThe spontaneous formation of supramolecular assemblies at the boundary between solids and liquids is a process which encompasses a variety of systems with diverse characteristics: chemisorbed systems in which very strong and weakly reversible bonds govern the assembly and physisorbed aggregates which are dynamic thanks to the weaker interactions between adsorbate and surface. Here we review the interest and advances in the study of chiral systems at the liquid-solid interface, and also the application of this configuration for the study of systems of interest in molecular electronics, self-assembled from the bottom up

Un ataque combinado químico, virológico, biofísico y estructural hace posible la obtención de nuevos inhibidores de entrada celular de SARS-CoV-2 y la caracterización de su mecanismo de inhibición

Resumen del trabajo presentado al 45º Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular (SEBBM), celebrado en Zaragoza del 5 al 8 de septiembre de 2023.IBV-COVID19 Pipeline: C.Espinosa, N.Gougeard, M.P.Hernández-Sierra, A.Rubio-del-Campo, R.Ruiz-Partida, L.Villamayor.El virus SARS-CoV-2 causa el COVID-19 al infectar las células a través de la interacción de la proteína de su espícula (S) con el receptor celular enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2). Para buscar inhibidores de este paso clave en la infección viral, examinamos una biblioteca interna (IQM-CSIC, Madrid) de compuestos multivalentes derivados de triptófano, primero usando pseudopartículas de Virus de Estomatits Vesicular que expresaban S (I2SysBio, UV y CSIC, Valencia), identificando un compuesto como potente inhibidor de entrada no citotóxico. La optimización química (IQM-CSIC) generó otros dos potentes inhibidores de entrada no citotóxicos que, como 2, también inhibieron la entrada celular de SARS-CoV-2 genuino (I2SysBio). Los estudios con proteínas recombinantes puras (IBV-CSIC, Valencia) usando termofluor y termoforesis de microescala revelaron la unión de estos compuestos a S, y a su dominio de unión al receptor producido separadamente, probando interferencia con la interacción con ACE2. La criomicroscopía electrónica de S (IBV-CSIC), libre o unido al compuesto activo, arrojó luz sobre los mecanismos de inhibición por estos compuestos de la entrada viral a la célula. Esta actividad triinstitucional combinada ha identificado y caracterizado una nueva clase de inhibidores de entrada de SARS-CoV-2 de claro potencial preventivo o terapéutico de COVID-19.ECNextGeneration EUfund 2020/2094 de CSIC/PTI Salud Global; Crue/CSIC/Santander Fondo Supera Covid-19;CSIC-COV19-082; CIBERER-ISCIIICOV20/00437; Covid19-SCI/GValenciana (RG);PID2020- 120322RB-C21 (VR) y PID2020-116880GB-I00 (JLLl) Agenc. Estat Investig.Peer reviewe

The structural role of SARS-CoV-2 genetic background in the emergence and success of spike mutations: the case of the spike A222V mutation

The S:A222V point mutation, within the G clade, was characteristic of the 20E (EU1) SARS-CoV-2 variant identified in Spain in early summer 2020. This mutation has now reappeared in the Delta subvariant AY.4.2, raising questions about its specific effect on viral infection. We report combined serological, functional, structural and computational studies characterizing the impact of this mutation. Our results reveal that S:A222V promotes an increased RBD opening and slightly increases ACE2 binding as compared to the parent S:D614G clade. Finally, S:A222V does not reduce sera neutralization capacity, suggesting it does not affect vaccine effectiveness.This research work was supported by the European Commission–NextGenerationEU through the CSIC Global Health Platform. Additionally, authors would like to acknowledge economic support from the Spanish Ministry of Science and Innovation through Grants: PID2019-104757RB-I00 funded by MCIN/AEI/ 10.13039/501100011033, RTI2018-094399-A-I00, and “ERDF A way of making Europe”, by the “European Union”, Grant SEV 2017-0712 funded by MCIN/AEI /10.13039/501100011033, the “Comunidad Autónoma de Madrid" through Grant: S2017/BMD3817, and the European Union (EU) and Horizon 2020 through grants: Marie-Curie Fellowship EnLaCES (MSCA IF 2020, Proposal: 101024130) (to JK), HighResCells (ERC - 2018 - SyG, Proposal: 810057), and iNEXT-Discovery (Proposal: 871037). AM, VR, JB and JLL are funded by CIBERER-ISCIII (proposal: COV20/00437), Fondo Supera COVID-19 (proposal: CSICCOVID19-082), Banco Santander (Proposal: BlockAce), and CSIC PTI Salud Global (Proposal: 202080E110). VR is funded by the Spanish Ministry of Science and Innovation through Grant PID2020-120322RB-C21. IC is funded by project PID2019-104477RB-100, Fondo COVID COV20/00140 and ERC CoG 101001038. MC is funded by the RyC program from the Spanish Ministry of Science and Innovation, the Generalitat Valenciana (SEJI/2019/011).N

The role of SARS-CoV-2 genetic background in the emergence and success of spike mutations: the case of the spike A222V mutation

Resumen del trabajo presentado a las II Jornadas Científicas PTI + Salud Global, celebradas los días 5 y 6 de octubre de 2022 en el Auditorio Santiago Grisolía de Valencia (España).Peer reviewe