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Conservación in vitro de clones de boniato en condiciones de crecimiento mínimo
Nodal segment of INIVIT B-88, CEMSA 78-354, INIVIT B-90-510 and Cautillo sweet potato in vitro plants clone were conserved for one year in culture medium with abscisic acid 10.0 mg.l- with high survival and recovery percentages without subculture to fresh medium. Reducing of conservation temperature to 17 ± 2ºC decreased the rate growth in all clone and possibility their conservation for one year with high survival percentages. The reduction of salt concentration of culture medium to 50% did not decrease the rate growth in relation with a standard culture medium for this was impossible to conserve the sweet potato clones for a period over six month in this conditions.phytogenetic resourcesKey words: biodiversity, conservation, Ipomoea batatas,Segmentos nodales de plantas in vitro de boniato de los clones INIVIT B-88, CEMSA 78-354, INIVIT B-90-510 y Cautillo fueron conservados durante un año en medio de cultivo con 10.0 mg.l-1 de ácido abscísico con altos porcentajes de supervivencia y recuperación. La reducción de la temperatura de conservación a 17 ± 2ºC disminuyó la velocidad de crecimiento en todos los clones estudiados y permitió su conservación durante un año manteniendo altos porcentajes de supervivencia. La disminución de la concentración de las sales del medio de cultivo hasta un 50% no redujo significativamente la velocidad de crecimiento con respecto al medio de cultivo control, no pudiéndose conservar los clones evaluados por un tiempo superior a los seis meses en estas condiciones.Palabras clave: biodiversidad, conservación, Ipomoea batatas, recursos fitogenético
Determinación de las concentraciones adecuadas de 2,4-D y 6-BAP para la inducción de callos morfogénicos de boniato
Tubers from Inivit B 90-1 and Yabú-8, cultivars were put in the laboratories into water bottle and we chose explants of limbs from sprout. Explants were disinfected with Sodium Hypoclorite (Na OCl) with active chlorine (1%) and they were put into Murashige and Skoog culture medium under different concentrations of 2,4-D independent and combined with 6-BAP in the culture medium. Crops were put on the energy illumination. The best results in four weeks at the morfogenic callus induction were obtained with the concentrations of 2,4-D (0.1 mg.l-1) and 2,4-D (0.1 mg.l-1) combined with BAP (0.2 mg.l-1) in the culture medium.Key words: clon, explants, Ipomoea, tubersRaíces tuberosas de los clones Inivit B 90-1 y Yabú-8, fueron trasladadas al laboratorio y colocadas en frascos con agua; seleccionando de los brotes emitidos explantes de limbos foliares. Los mismos fueron desinfectados con Hipoclorito de Sodio (Na OCl) al 1% y sembrados en el medio de cultivo de Murashige y Skoog que contenía diferentes concentraciones de 2,4-D independiente en el medio de cultivo y combinado con 6-BAP. Los cultivos fueron incubados en condiciones de luz solar y evaluados a las cuatro semanas. Los mejores resultados en la inducción de callos morfogénicos con características de color crema amarillentos, nodulares y friables; se obtuvieron con las concentraciones de 2,4-D (0.1 mg.l-1) independiente y 2,4-D (0.1 mg.l-1) combinado con 6-BAP (0.2 mg.l-1) en el medio de cultivo.Palabras clave: clon, explantes, Ipomoea, tubérculo
Efecto de dos análogos de brasinoesteroides en la inducción y regeneración de callos de Ipomoea batatas
With the purpose of studying, in different clones, the effect of two similar brassinoesteroids in the induction of callus and the regeneration of the same ones, tuberous roots belonging to the clones Cemsa 78-354, Inivit B 90-1, Inivit B 93-1, Yabú-8 and Jewel were gathered and they were placed in flasks with water in the laboratory to induce the sprouting of the buds. Later , explants of the limbo foliar were selected and they were culture in the Murashige and Skoog (1962) culture medium with 2, 4-D (0.1 mg.l-1) and 6-BAP (0.2 mg.l-1) with the similar brassinoesteroids MH-5 and Biobras-6 at different concentrations (0.001, 0.01, 0.05 and 0.1 mg.l-1) and the employment independent brassinoesteroids analogues to induce the formation of callus. Starting from the fourth week the callus were transferred, to facilitate the regenerants induction, to the culture medium previously mentioned to which the independent brassinoesteroids analogues MH-5 and Biobras-6 and cocktails with the regulators of the growth AIA (0.05 mg.l-1) and Kinetina (0.2 mg.l-1)were added . The same ones stayed under sun light conditions to temperatures of 25 ± 2 °C, relative humidity of 80-90% and luminous intensity of 3 000-5 000 l. After four weeks, it was evaluated the morphological behavior of the callus and the regenerants. Good results were obtained in the induction of morphogenic callus , when using the regulators of the independent growth in the culture medium and when being combined with 2, 4-D (0.1 mg.l-1) and 6-BAP (0.2 mg.l-1) to the concentration of 0.01 mg.l-1 with both brassinoesteroids analogues. The regenerantes induction was more favored with the employment of the brassinoesteroids analogues Biobras-6 combined with AIA (0.05 mg.l-1) and Kinetina (0.2 mg.l-1) than when being used independent in the culture medium.Key Words: culture medium, regenerantes, Sweet potatoCon la finalidad de estudiar, en diferentes clones, el efecto de dos análogos de brasinoesteroides en la inducción de callos y la regeneración de los mismos, fueron recolectadas raíces tuberosas pertenecientes a los clones Cemsa 78-354, Inivit B 90-1, Inivit B 93-1, Yabú-8 y Jewel y se colocaron en frascos con agua en el laboratorio para inducir la brotación de las yemas. Posteriormente, se seleccionaron explantes del limbo foliar y se sembraron en el medio de cultivo de Murashige y Skoog con 2,4-D (0.1 mg.l-1) y 6-BAP (0.2 mg.l-1) combinados con los análogos de brasinoesteroides MH-5 y Biobras-6 a diferentes concentraciones (0.001, 0.01, 0.05 y 0.1 mg.l-1) y el empleo de los análogos de brasinoesteroides independientes para inducir la formación de callos. A partir de la cuarta semana los callos fueron transferidos, para posibilitar la inducción de regenerantes, al medio de cultivo anteriormente mencionado al cual se le adicionaron los análogos de brasinoesteroides MH-5 y Biobras-6 independientes y combinados con los reguladores del crecimiento AIA (0.05 mg.l-1) y Kinetina (0.2 mg.l-1). Los mismos se mantuvieron en condiciones de luz solar a temperatura de 25 ± 2 °C, humedad relativa de 80-90% e intensidad luminosa de 3 000-5 000 l. Transcurridas cuatro semanas, se evaluó el comportamiento morfológico de los callos y los regenerantes. Se obtuvieron buenos resultados en la inducción de callos morfogénicos, al emplear los reguladores del crecimiento independientes en el medio de cultivo y al ser combinados con 2,4-D (0.1 mg.l-1) y 6-BAP (0.2 mg.l-1) a la concentración de 0.01 mg.l-1 con ambos análogos de brasinoesteroides. La inducción de regenerantes se vio más favorecida con el empleo del análogo de brasinoesteroides Biobras-6 combinado con AIA (0.05 mg.l-1) y Kinetina (0.2 mg.l-1) que al ser utilizado de manera independiente en el medio de cultivo.Palabras clave: Boniato, medios de cultivo, regenerante
Establecimiento in vitro de yemas de Ipomoea batatas
Different buds of sweet potatowere studied. Roots of the clones Cemsa 78-354, Inivit 90-1, Inivit 93-1, Yabú-8 and Jewel were selected and put in glass with water in the laboratories for inducing the shoots. Afterwards the top shoot and the axiles shoots one to five (from top shoot ) were selected and sown in the Murashige and Skoog medium with the sales MS, Thiamine (1 mg.l-1), myoinositol (100 mg.l-1), sucrose (3%), gelrite (2 g.l-1) and different growth regulator combinations of giberelic acid (AG3) and 3-indol acetic acid (AIA), for example: AG3 (5 mg.l-1) + AIA (0.05 mg.l-1), AG3 (10 mg.l-1) + AIA (0.05 mg.l-1), AG3 (5 mg.l-1) + AIA (0.1 mg.l-1) and AG3 (10 mg.l-1) + AIA (0.1 mg.l-1). The pH was adjusted to 5.8. After five weeks, the morphologic behaviuor of the shoots was evaluated. The better results were obtained in the micropropagation with the use of the axiles shoots two, three and four in the culture medium whit growth regulator AG3 (10 mg.l-1) + AIA (0.05 mg.l-1).Key words: clones, axiles buds, top shoot, brotationCon la finalidad de estudiar el comportamiento de diferentes yemas en el establecimiento in vitro del boniato, fueron recolectadas raíces tuberosas pertenecientes a los clones Cemsa 78-354, Inivit 90-1, Inivit 93-1, Yabú-8 y Jewel; y se colocaron en frascos con agua en el laboratorio para inducir la brotación de las yemas. Posteriormente, se seleccionaron como material de siembra: el ápice meristemático y las yemas axilares uno, dos, tres, cuatro y cinco (a partir del ápice) y fueron sembrados en el medio de cultivo de Murashige y Skoog que contenía las sales MS, tiamina (1 mg.l-1), mioinositol (100 mg.l-1), sacarosa (3%), gelrite (2 g.l-1) y diferentes combinaciones de ácido gibérelico (AG3) y ácido 3-indol acético (AIA), por ejemplo: AG3 (5 mg.l-1) + AIA (0.05 mg.l-1), AG3 (10 mg.l-1) + AIA (0.05 mg.l-1), AG3 (5 mg.l-1) + AIA (0.1 mg.l-1) y AG3 (10 mg.l-1) + AIA (0.1 mg.l-1). El pH fue ajustado a 5.8 ± 0.01 en todos los casos, previo a la adición del agente solidificante. Transcurridas cinco semanas se evaluó el comportamiento morfológico de las yemas. Se obtuvieron buenos resultados en la micropopagación al emplear las yemas axilares dos, tres y cuatro en el medio de cultivo con los reguladores del crecimiento AG3 (10 mg.l-1) + AIA (0.05 mg.l-1).Palabras clave: ápice meristemático, brotación, clones, yemas axilare
Evaluación del efecto del Pectimorf en el establecimiento in vitro de yemas axilares de boniato clon CEMSA 78-354
With the purpose of studying the effect of different Pectimorf dose in the establishment and budding of axillary buds of sweet potato starting from buds, tuberous roots belonging to the clone CEMSA 78-354 were collected and placed in flasks with water in the laboratory under semicontrolled conditions to induce the sprouting of the buds. Later on, axillary buds of the buds of the tubers (establishment) and axillary buds coming from in vitro plants (multiplication)were selected as sowing material (explants), which were sowed in the Murashige and Skoog culture medium containing the MS salts, thiamin (1 mg.l-1), myoinositol (100 mg.l-1), sucrose (3%), gelryte (2 g.l-1), giberelic acid (10.0 mg.l-1) and indol-3-acetic acid (0.05 mg.l-1) and the already mentioned culture medium without the previously refered regulators of the growth with different Pectimorf concentration: 5.0, 10.0 and 15.0 mg.l-1. The morphological behavior of the in vitro plantas was evaluated to the five, fifteen and thirty days after established the buds under in vitro conditions , and different variables related with the in vitro growth of the buds were analyzed, among which we have: number of sprouted buds, height of the in vitro plants (cm), number, longitude and width of the leaves, buds with roots, longitude of the roots (cm) and longitude of the petiole (cm). The best results were obtained when using the axillary buds coming from budding of tuberous roots in comparison with the axillary buds of the in vitro plants and with the use of the culture medium containing 10.0 mg.l-1 of Pectimorf.Key works: Ipomoea batatas, micropropagation, oligogalacturonidesCon la finalidad de estudiar el efecto de diferentes concentraciones de Pectimorf en el establecimiento in vitro de yemas axilares de boniato, fueron recolectadas raíces tuberosas pertenecientes al clon CEMSA 78-354 y se colocaron en frascos con agua en el laboratorio en condiciones semicontroladas para inducir la brotación de las yemas. Posteriormente, se seleccionaron como explantes para la siembra las yemas axilares de los brotes de los tubérculos (establecimiento) y yemas axilares procedentes de plantas in vitro (multiplicación), las cuales fueron sembradas en el medio de cultivo propuesto por Murashige y Skoog que contenía las sales MS, tiamina (1 mg.l-1), mioinositol (100 mg.l-1), sacarosa (3%), gelrite (2 g.l-1), ácido gibérelico (10.0 mg.l-1) y ácido indol-3-acético (0.05 mg.l-1) y este mismo medio de cultivo sin los reguladores del crecimiento antes mencionados, con diferentes concentraciones de Pectimorf: 5.0, 10.0 y 15.0 mg.l-1. Se evaluó el comportamiento morfológico de las plantas in vitro a los cinco, quince y treinta días después de establecidas las yemas en condiciones in vitro y se analizaron diferentes variables relacionadas con el crecimiento in vitro de las yemas: número de yemas brotadas, altura de las plantas in vitro (cm), número, longitud y ancho del limbo foliar (cm), número de yemas con raíces, longitud de las raíces (cm) y longitud de los peciolos (cm). Se obtuvieron los mejores resultados al emplear las yemas axilares procedentes de los brotes de raíces tuberosas en comparación con las yemas axilares de las plantas in vitro y con el empleo del medio de cultivo que contenía 10.0 mg.l-1 de Pectimorf.Palabras clave: Ipomoea batatas, micropropagación, oligogalacturónido
In vitro conservation of sweet potato clone in slow growth conditions
Nodal segment of INIVIT B-88, CEMSA 78-354, INIVIT B-90-510 and Cautillo sweet potato in vitro plants clone were conserved for one year in culture medium with abscisic acid 10.0 mg.l- with high survival and recovery percentages without subculture to fresh medium. Reducing of conservation temperature to 17 ± 2ºC decreased the rate growth in all clone and possibility their conservation for one year with high survival percentages. The reduction of salt concentration of culture medium to 50% did not decrease the rate growth in relation with a standard culture medium for this was impossible to conserve the sweet potato clones for a period over six month in this conditions.
phytogenetic resources
Key words: biodiversity, conservation, Ipomoea batatas