Effets des conditions de culture sur la différenciation des cellules de moelle osseuse

Dans ce travail, les effets des sérums (FCS et Ultroser®) et ceux de la dexaméthasone sur la différenciation des cellules de moelle osseuse de lapin ont été analysés. Une culture en FCS en présence de dexaméthasone apparaît comme la plus favorable pour promouvoir la différenciation des cellules de moelle osseuse. Le traitement à la dexaméthasone favorise l'expression des marqueurs ostéoblastiques. Le choix du sérum n'est pas sans conséquences puisque seule une culture en Ultroser® permet l'expression de la sialoprotéine osseuse et de l'ostéonectine laquelle nécessite la présence de dexaméthasone. L'analyse de la composition de la matrice extracellulaire par l'électrophorèse bidimensionnelle montre des compositions protéiques différentes en fonction des sérums et des modifications importantes induites par la dexaméthasone. Quatre spots néosynthétisés en FCS et dexaméthasone pourraient correspondre à la Gla-protéine matricielle. Enfin, ces profils ne correspondent pas à ceux obtenus à partir d'os déminéralisé. Par "differential display", plusieurs produits d'amplification différentielle ont été observés à partir d'ARNm extraits de cellules de moelle osseuse cultivées en FCS et traitées à la dexaméthasone. L'un d'eux correspond au gène humain de la moésine. La quantification du niveau d'expression de la moésine par PCR semi-quantitative après normalisation par rapport au gène de référence 36B4 montre une réduction significative de son niveau d'expression allant de 4 à 6 fois. Le rôle de cette protéine dans l'organisation du cytosquelette suggère que la dexaméthasone module les capacités d'adhésion et de mobilité des cellules de moelle osseuse.BOULOGNE-BU Droit Lettres (621602101) / SudocSudocFranceF