Análise do envolvimento do fator de início de tradução de eucariotos 5A (eIF5A) na translocação de proteínas para o retículo endoplasmático em Saccharomyces cerevisiae

O fator de início de tradução 5A (eIF5A) é altamente conservado em arqueas e em eucariotos e sofre uma modificação pós-traducional única e essencial chamada hipusinação. Este fator já foi relacionado com início de tradução, transporte nucleocitoplasmático, decaimento de mRNA e proliferação celular. Entretanto, resultados recentes colocam essa proteína novamente no cenário da síntese proteica, mais especificamente na etapa de elongação da tradução. Estudos que relacionam eIF5A com proliferação celular e transição G1/S do ciclo celular sugerem seu envolvimento com tradução específica de proteínas que atuam na progressão do ciclo celular. Interessantemente, resultados em nosso laboratório demonstram, por letalidade sintética, uma interação entre eIF5A e Ypt1 (Yeast Protein Transport 1). Isso sugere uma possível atividade na secreção, mais precisamente na translocação de proteínas para o Retículo Endoplasmático (RE), que representa a etapa em que tradução e via secretória se conectam. No intuito de avaliar a hipótese da participação de eIF5A na tradução de um subgrupo específico de mRNAs, envolvidos na via secretória e proliferação celular, este trabalho estudou o envolvimento deste fator na translocação de proteínas para o RE, usando a levedura Saccharomyces cerevisiae como organismo modelo. Os resultados revelam que eIF5A interage, de uma forma inespecífica, em diferentes etapas da via secretória. Também que eIF5A não atua na via pós- traducional, porém sugere que desempenhe um papel na translocação pela via co-traducional. Com esse estudo será possível um melhor entendimento sobre o papel de eIF5A e os processos proliferativos da célulaFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

eIF5A has a function in the cotranslational translocation of proteins into the ER

The putative eukaryotic translation initiation factor 5A (eIF5A) is a highly conserved and essential protein present in all organisms except bacteria. To be activated, eIF5A requires the conversion of a specific residue of lysine into hypusine. This hypusine modification occurs posttranslationally in two enzymatic steps, and the polyamine spermidine is the substrate. Despite having an essential function in translation elongation, the critical role played by eIF5A remains unclear. In addition to demonstrating genetic interactions with translation factors, eIF5A mutants genetically interact with mutations in YPT1, which encodes an essential protein involved in endoplasmic reticulum (ER)-to-Golgi vesicle transport. In this study, we investigated the correlation between the function of eIF5A in translation and secretion in yeast. The results of in vivo translocation assays and genetic interaction analyses suggest a specific role for eIF5A in the cotranslational translocation of proteins into the ER, but not in the posttranslational pathway. Additionally, we observed that a block in eIF5A activation up-regulates stress-induced chaperones, which also occurs when SRP function is lost. Finally, loss of eIF5A function affects binding of the ribosome-nascent chain complex to SRP. These results link eIF5A function in translation with a role of SRP in the cell and may help explain the dual effects of eIF5A in differential and general translation.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq