Niveles séricos de factor de necrosis tumoral-α e interferón- γ en pacientes con dengue febril

Los monocitos/macrófagos constituyen las células diana para el virus dengue, activandolinfocitos T, liberando citoquinas proinflamatorias como el Factor de Necrosis Tumoral alfae Interferón gamma. El objetivo del estudio fue determinar TNF-α e IFN-γ en suero depacientes dengue IgM positivo e IgM negativo, que concurrieron al Instituto deInvestigaciones en Ciencias de la Salud, de febrero a abril 2007. Se realizó un estudioanalítico en 163 sueros de pacientes con dengue, 143 IgM positivo y 20 IgM negativo, deambos sexos con edad promedio de 30 y rango entre 18 a 70 años. El anticuerpo IgMpara dengue y las citoquinas fueron determinados por ELISA de captura. En los 143sueros dengue IgM positivo, el IFN-γ se detectó en 73% (104/143) con valores entre 558y superiores a 2000 pg/ml y en el 27% (39/143) valores por debajo del punto de corte.Se encontró una diferencia estadísticamente significativa comparado con sueros dengueIgM negativo (p = < 0.005). El TNF-α se detectó en 24% (35/143) sueros IgM positivo,de los cuales 33 presentaron valores entre 45 a 176 pg/ml y 2 con valores superiores a2000 pg/ml. No hubo significancia estadística comparando con sueros dengue IgMnegativo (p = 0.26). Niveles elevados de IFN-γ y TNF-α podrían ser consideradosmarcadores de pronóstico para la progresión al dengue hemorrágico. Se debería tener encuenta la potencial significancia terapéutica de estas citoquinas que podrían ayudar en lasestrategias de inhibir o inducir perfiles de citoquinas adecuadas en respuesta al dengue

Comparación de dos cepas de Leishmania en el ELISA para el diagnóstico de leishmaniosis visceral canina

La leishmaniosis visceral es una enfermedad causada por protozoos del género Leishmania, afecta fundamentalmente al hombre y a los caninos, englobando un amplio espectro de procesos patológicos que parten desde cuadros cutáneos autocurables a viscerales con desenlace fatal. La leishmaniosis se conoce en Paraguay desde los años 1913; y se observa un aumento de los casos en paralelo al proceso de deforestación y expansión agrícola. La infección en los caninos es causada por parásitos del género Leishmania complejo L. donovani, especies L. infantum en el viejo mundo y L. chagasi en el nuevo mundo. Entre las técnicas de diagnóstico serológico se destacan la aglutinación directa (DAT), la inmunofluorescencia indirecta (IFI), el ELISA, la inmunocromatografía y el inmunoblotting. La sensibilidad y especificidad de cada una de ellas dependen en gran medida del antígeno utilizado. Sin embargo, pocos análisis comparativos se han hecho con tests que utilizan diferentes antígenos para identificar el mejor antígeno. El trabajo realizado fue un estudio analítico que tuvo como objetivo comparar a las dos cepas de leishmania: L. chagasi y L. donovani utilizadas en el ELISA indirecto para el diagnóstico serológico de leishmaniosis visceral canina que se realiza en el IICS. Del total de muestras analizadas, 173/185 (94%) resultaron concordantes. Utilizando la prueba de ELISA con antígeno L. chagasi como referencia, el antígeno de L. donovani dio una positividad y negatividad del 92% y 100% respectivamente. Se obtuvo una excelente concordancia (Kappa 0.82) y una fuerte asociación de 125.29 (p<1x10-7) por chi2. Estos resultados sugieren que el antígeno L. donovani podría ser utilizado en el ELISA indirecto para la detección de anticuerpos anti-leishmania en caninos

Mantenimiento y titulación del virus de dengue para obtención de antígeno viral

El dengue es un grave problema de salud pública que no posee vacuna ni tratamiento específico.El método de diagnóstico más utilizado es el serológico, específicamente, la detección de anticuerpos IgM anti-dengue. Los antígenos virales utilizados en este método pueden ser preparados en cultivo de células de Aedes albopictus (C6/36). El objetivo de este trabajo fue el mantenimiento de los cuatro serotipos virales [D1 (RIO), D2 (RIO), D3 (H-87), D4 (BV)] en células C6/36 para la futura preparación de antígenos virales. Las células C6/36 fueron cultivadas en medio L-15 con 10% de SFB a 28 ºC, e infectadas con 50 μl de cada uno de los serotipos virales por 5 a 7 días. Una vez confirmada la infección por inmunoflurescencia indirecta, los virus fueron titulados por la técnica de placa de lisis. Los títulos de los serotipos fueron D1 (RIO) [2,9 x 106 PFU/ml], D2 (RIO) [4,4 x107 PFU/ml], D3 (H87) [6,4 x 107 PFU/ml] y D4 (BV) [5,1 x106 PFU/ml]. La producción de antígenos virales es de gran importancia dado que los mismos pueden ser utilizados en diversos métodos diagnósticos

Clinical features and genetic biomarkers associated with different phenotypes of systemic lupus erythematosus in Paraguayan patients

Corresponding author: Isabel Acosta-Colman, Department of Rheumatology, Faculty of Medical Sciences, National University of Asunción, San Lorenzo, Paraguay; email: [email protected] lupus erythematosus (SLE) is a complex autoimmune disease characterized by a heterogeneous clinical picture that makes the diagnosis and follow-up of these patients difficult. This study aimed to identify correlations between clinical, immunological, and genetic biomarkers and clinical manifestations in SLE. A retrospective study of data from medical records and immunological and genetic studies of SLE patients in Paraguay was carried out. A descriptive analysis was performed based on the type of variable. Human leukocyte antigen (HLA) allele frequencies (DPA1, DPB1, DQA1, DQB1, and DRB1) were calculated, and univariate logistic regression analyses were performed between each of the explanatory variables and the presence or absence of each phenotype. Odds ratios, 95% confidence intervals, and p values were recorded. Associations with p<0.05 were considered statistically significant. 104 SLE patients were included: 86% were female, with a mean age of 32.80±10.36 years. An association was identified between anti-double stranded DNA (antidsDNA) and the presence of the renal phenotype and between anti-dsDNA and the absence of the joint and hematological phenotypes. Immunoglobulin M isotype rheumatoid factor was associated with the absence of a renal phenotype. HLA-DQB1*02:02 and HLA-DRB1*07:01 were associated with the cutaneous phenotype. An association was identified between age at disease onset over 30 years and the presence of the joint phenotype. No other associations were identified. Potential clinical, immunological, and genetic biomarkers of phenotypes have been identified in SLE Paraguayan patients.Consejo Nacional de Ciencia y TecnologíaPrograma Paraguayo para el Desarrollo de la Ciencia y Tecnología. Proyectos de investigación y desarroll

Revisiting the dengue epidemic of 2011 in Paraguay : molecular epidemiology of dengue virus in the Asuncion metropolitan area

Correspondence: [email protected]. Dengue is one of the most important re-emerging viral diseases and the most common human arthropod-borne viral infection worldwide. Any of the four Dengue virus serotypes (DENV-1 to 4) can cause asymptomatic infections or clinical manifestations that range in severity from a mild, self-limited illness, to a severe disease characterized by a shock syndrome that can lead to death. Paraguay suffers periodic epidemic outbreaks of dengue since 1988 when the DENV-1 was introduced in the country. Epidemics caused by all four serotypes have been reported and the country. Although dengue is endemic in Paraguay, few studies have described the molecular epidemiology of DENV in the country, which is important to understand the local and global spread, as well as the evolution of this pathogen. Methods. This was a cross-sectional study of a convenience sample. Suspected dengue patients of any age were recruited from the Emergency Laboratory of the Central Hospital of the Institute of Social Welfare, Asuncion, Paraguay, from February to June of 2011. A DENV antigen test was used to confirm the infection. The protein E gene sequences of isolated viruses were sequenced for phylogenetic analysis. Results. Dengue was confirmed in 55.1% of the participants (n = 98/178). The most frequent clinical findings were fever, headache, and myalgia. Identity analyses of the protein E gene sequence of 56 viruses isolated showed the circulation of DENV-1 (n = 45) and DENV-2 (n = 11) in the Asuncion metropolitan area in 2011. Molecular epidemiology analyses suggest that DENV-1 was introduced into Paraguay from Argentina, while the DENV-2 from Brazil, replacing previous virus lineages. Conclusions. We have analyzed the molecular epidemiology of DENV-1 and DENV-2 isolated in Paraguay in 2011. We found strong evidence that DENV-1 was introduced into Paraguay from Argentina, while the DENV-2 from Brazil, replacing previous virus lineages. Molecular epidemiology studies are of great interest to analyze the dynamic of DENV spread, which are useful for early implementation of containment measures to reduce the risk of explosive epidemics caused by this virus.Consejo Nacional de Ciencia y TecnologíaPrograma de Apoyo al Desarrollo de la Ciencia, Tecnología e Innovació

Perfil antigénico de extractos proteicos solubles de dos cepas de Trypanosoma Cruzi

El objetivo general del trabajo fue caracterizar el perfil antigénico de los extractos proteicos solubles de diferentes cepas de Trypanosoma cruzi.CONACYT – Consejo Nacional de Ciencia y TecnologíaPROCIENCI

Antigenic profile characterization of soluble protein extracts from two Trypanosoma cruzi strains

Autor correspondiente: María Eugenia Acosta de Hetter. Departamento de Producción, Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Asunción. Paraguay. Email: [email protected] parásito Trypanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas. El mismo presenta una amplia diversidad biológica y genética, por lo cual se lo agrupa en 6 unidades taxonómicas discretas. Las cepas Y, CL Brener y una aislada en Paraguay aún no caracterizada en su totalidad fueron empleadas en este estudio con el fin de determinar sus perfiles proteico y antigénico para aportar en la investigación sobre esta enfermedad en nuestro país, aplicando técnicas como SDS-PAGE, ELISA y Western blot. Se observaron semejanzas en los perfiles proteicos de los extractos solubles de Y Lote 73 e Y Lote 74, siendo ambos obtenidos a partir de la misma cepa, así como perfil diferente de éstos con los de CL Brener y Py. Se detectaron bandas de proteínas de pesos moleculares comunes entre extractos, principalmente las consideradas de bajo peso molecular. Se constató la capacidad antigénica al ensayar los 4 extractos frente a sueros chagásicos, no chagásicos, controles positivos y negativos, se evidenció la importancia de confirmar el diagnóstico con pruebas de principios diferentes. Además, se detectaron proteínas antigénicas comunes a los 3 extractos empleados en el Western blot, las que podrían ser estudiadas con mayor profundidad debido a su potencial antigénico, característica de interés para fines diagnósticos.The parasite Trypanosoma cruzi is the causal agent of Chagas disease. It presents a wide biological and genetic diversity, therefore it is grouped into 6 taxonomic units. The strains Y, CL Brener and one strain isolated in Paraguaywere used in this study in order to determine their protein and antigenic profiles, applying techniques such as SDS-PAGE, ELISA and Western blot. Similarities were observed in the protein prifles of the soluble extracts of Lot 73 Y and Lot 74 Y both obtained from the same strain, and the different profile of these with those of CL Brener and Py strains. Protein bands of common molecular weights, manly those considered low, were detected between extracts. By testing the four extracts against chagasic and non-chagasic sera, positive and negative controls, the antigenic capacity was verified and the importance of utilizing different test to confirm diagnosis was shown. In addition antigenic proteins common to the three extracts used in the Western blot were detected and can be further investigated due to their antigenic potential, an interesting characteristic for diagnostic purpose.Consejo Nacional de Ciencia y TecnologíaPrograma Paraguayo para el Desarrollo de la Ciencia y Tecnología. Proyectos de investigación y desarroll

Biomarcadores Genéticos y no Genéticos de susceptibilidad a padecer una enfermedad inmunomediada

El Proyecto tiene el objetivo de identificar Biomarcadores GENETICOS (i.e. HLA) y NO GENETICOS (i.e. clínicos, epidemiológicos e inmunológicos) de susceptibilidad de pacientes con enfermedades inmunomediadas pacientes paraguayos.CONACYT – Consejo Nacional de Ciencia y TecnologíaPROCIENCI