Mesure directe des constantes de sédimentation de désoxyribonucléase par ultracentrifugation analytique

Dans ce travail, nous décrivons la mesure directe de la constante de sédimentation de la désoxyribonucléase neutre du crabe avec de très faibles concentrations en protéines en utilisant une ultracentrifugeuse analytique et une cellule à séparation fixe. Quelques déterminations ont été effectuées avec une autre désoxyribonucléase, une endonucléase acide extraite du bivalve Glycymeris glycymeris. Dans les deux cas, il y a un bon accord entre les masses moléculaires calculées à partir des résultats de l’ultracentrifugation analytique et mesurées par filtration sur gel de Sephadex G 100

Comparaison des propriétés physicochimiques du DNA natif et du DNA ultrasoné

On a étudié par diffusion de la lumière, ultracentrifugation et dénaturation thermique l’influence de la force ionique (solutions de NaCl 0,0015 M à 1 M) sur la configuration du DNA natif (Mm ~ 6.106) et du DNA fragmenté par sonication en batonnets (Mw ~ 0,6.106). Dans le cas du DNA natif, quand la force ionique du milieu décroît, il y a une augmentation des interactions intermoléculaires (second coefficient du viriel, extrapolation à concentration nulle pour déterminer les constantes de sédimentation). Dans les limites de force ionique étudiées, on n’a pu mettre en évidence aucune perturbation dans le comportement du DNA soniqué