A neurogênese induzida por crises no giro denteado não está relacionada ao brotamento de fibras musgosas, mas é dependente da idade, em ratos durante o desenvolvimento

Neurogenesis in the dentate gyrus (DG) has attracted attention since abnormal supragranular mossy fiber sprouting occurs in the same region, in temporal lobe epilepsy. Thus, we submitted developing rats to pilocarpine-induced status epilepticus (SE) to study the relationship between neurogenesis and mossy fiber sprouting. Groups were submitted to SE at: I-P9, II-P7, P8 and P9, III-P17 e IV-P21. Neurogenesis was quantified using BrdU protocol and confirmed through double staining, using neuronal pentraxin. Other animals were monitored by video system until P120 and their brain was studied (Timm and Nissl staining). The neurogenesis at P17 (p=0.007) and P21 (p=0.006) were increased. However, only P21 group showed recurrent seizures and the mossy fiber sprouting in the same region, during adult life, while P17 did not. Thus, our results suggest that neurogenesis is not related to mossy fiber sprouting neither to recurrent spontaneous seizures in pilocarpine model.A neurogênese no giro dentado tem atraído atenção já que ela ocorre na mesma região do hipocampo que o brotamento das fibras musgosas, na epilepsia do lobo temporal. Assim, submetemos ratos em desenvolvimento ao status epilepticus induzido (SE) por pilocarpine. Grupos foram submetidos em I-P9, II-P7, P8, P9; III-P17 e IV-P21. A neurogênese foi observada usando o protocolo do BrdU e confirmada por dupla marcação com pentraxina neuronal. Outros animais foram monitorados até P120 e seus cérebros analisados (Nissl e Timm). A neurogênese nos grupos P17 (p=0,007) e P21 (p=0,006) aumentaram. Entretanto, o P21 apresentou crises espontâneas e brotamento de fibras musgosas, na mesma região onde ocorreu a neurogênese, enquanto o grupo P17 apresentou somente aumento na neurogênese. Assim, nossos resultados sugerem que o fenômeno da neurogênese não está relacionado com o brotamento de fibras musgosas nem com o aparecimento de crises espontâneas e recorrentes no modelo da pilocarpina.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de MedicinaUNIFESP, EPMSciEL

Mitogen-activated protein kinase in status epilepticus induced by pilocarpine

A administracao sistemica de PILO em ratos adultos, induz o aparecimento de crises limbicas que culminam em estado de mal epileptico. Estudos recentes mostram a ativacao das cascatas das MAPK em diferentes condicoes normais e patologicas. A MAPK e uma proteina serina treonina quinase que e regulada por multiplos sinais extracelulares e e expressa em altos niveis no cerebro adulto normal. A MAPK pode ser ativada por estimulacao glutamatergica e tem um papel fundamental no processo de transducao de sinais na membrana neuronal. No presente trabalho, utilizamos a tecnica de 'ununohistoquimica para analisar o padrao de distribuicao espaco-temporal da expressao da proteina NWK e de sua forma ativada apos a inducao de SE por PILO. Usou-se dois diferentes anticorpos, com o objetivo de distinguir a forma ativa da K (A-MAPK) da forma total (MMK). Atraves desta metodologia observamos importantes alteracoes nos animais tratados com PILO em relacao aos animais injetados com salina. Nos animais injetados com salina assim como nos animais que nao evoluiram a SE apos ser injetados com PILO, foi observada uma discreta Ir para K Ac em neuronlos piramidais de CAI e CA3 de hipocampo assim como na porcao inferior da camada granular e o hilo do giro denteado, amigdala e cortex pirifonne, cingulada e entorrinal. Porem, a Ir para A-NWK Ac, so foi vista em neuritos das celulas de CA3 e do hilo do giro denteado e nas celulas dos cortex plriforme, entorrinal e cingulado. Em animais sacrificados entre 30 e 60 min de SE demostrou-se um incremento da Ir para ambos anticorpos em estruturas que formam parte do sistema limbico, com 5 horas esta expressao diminuiu alcancando as 12 horas, niveis quase similares ao grupo salina. Estes resultados mostram uma expressao diferenciada da proteina MAPK que pode variar, dependendo do tempo de exposicao ao SE e que varia de localizacao dentro das estruturas do sistema limblco. Estes resultados indicam que a expressao e ativacao da K pode representar um elemento de iniciacao para as multiplas alteracoes neuropatologicas que evidenciam-se, nestas estruturas apos o SE induzido por PILO. A proteina K pode ter uma participacao importante no mecanismo de epuleptogenese, tanto em fases agudas, como nas alteracoes que sao evidenciadas a longo prazo, no modelo de epilepsia do lobo temporal induzido por PILOBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe