Effect of extraction and hydrolysis conditions on the determined content value of folic acid and folates in apple juice

Soki owocowe fortyfikowane witaminami mogą stać się wygodnym źródłem składników biologicznie aktywnych, w tym kwasu foliowego i naturalnie obecnych w owocach jego pochodnych, folianów. Związki te wykazują jednak niską stabilność chemiczną, co znacznie utrudnia ich oznaczanie. Na podstawie danych literaturowych i badań własnych można stwierdzić, że każdy materiał biologiczny wymaga zastosowania odmiennych warunków przeprowadzenia efektywnej ekstrakcji i hydrolizy badanych składników przed oznaczeniem ich metodą HPLC. Celem badań była ocena wpływu warunków ekstrakcji (pH buforu, czas/temperatura) i hydrolizy (ilość plazmy krwi szczura RP jako źródła koniugazy folianowej) na oznaczenie zawartości kwasu foliowego i folianów w badanym materiale. Największą zawartość kwasu foliowego (32,62 - 34,53 µg/100 ml soku) uzyskano, prowadząc ekstrakcję w buforze fosforanowym o pH = 7,0 w temp. 100 ºC przez 15 min. Największą natomiast zawartość formy metylowej (4,23 - 4,29 µg 5CH₃FH₄/100 ml soku) oznaczono, prowadząc ekstrakcję w buforze fosforanowym o pH=6,1, w temp. 100 ºC/15 min. Różny dodatek plazmy krwi szczura – przy tych samych warunkach ekstrakcji – nie wpłynął istotnie (α = 0,05) na wynik oznaczenia zarówno kwasu foliowego, jak i formy 5CH₃FH₄.Vitamin-fortified fruit juices may be a convenient source of biologically active compounds including the folic acid and folates, its derivatives, which naturally occur in fruits. However, those compounds show a low chemical stability, which makes the determination of their content very difficult. Based on the reference literature and the authors’ own study, it has been found that any biological material needs different conditions to be applied to the effective extraction and hydrolysis of its components prior to their determination using a HPLC method. The objective of the research was to determine the effect of different conditions of extraction (pH of buffer, time/temperature) and hydrolysis (RP - quantity of plasma in the blood of rats as a source of folate conjugase) on the content of folic acid and folates in the material analyzed. The highest content of folic acid (32.62 - 34.53 µg/ 100 ml juice) was determined when the extraction was performed using a phosphate buffer of pH = 7.0 at 100º C for 15 minutes. The highest content of methyl form (4.23 - 4.29 µg 5CH₃FH₄/ 100ml juice) was determined in the case of the extraction carried out in a phosphate buffer of pH=6.1 at 100º C for 15 minutes. Different amounts of plasma in the blood of rats added under the same conditions of extraction had not any significant effect (α =0.05) on the determined content values of both the folic acid and 5CH₃FH₄

Content of folates in fresh and cold stored kefirs and yoghurts

Celem pracy była ocena zawartości folianów w mleku towarowym, kefirach i jogurtach świeżych i przechowywanych do 34 dni w temperaturze chłodniczej. Kefir i jogurt wyprodukowano metodą termostatową. W badanych próbkach zidentyfikowano tylko formę metylową folianów, tj. 5CH3FH4. W zbiorczym świeżym mleku zawartość 5CH3FH4 wynosiła ok. 4,0 μg/100 g. Proces pasteryzacji nie wpłynął na istotne (p = 0,05) zmniejszenie zawartości tej formy folianów. W próbkach kefiru nie stwierdzono zmian zawartości 5CH3FH4 w porównaniu z mlekiem wyjściowym, natomiast w jogurcie miała miejsce istotna (p = 0,05) jego redukcja. Czas przechowywania wpłynął na zawartość 5CH3FH4 w kefirach w sposób zróżnicowany. W jednej serii kefirów nie nastąpiło istotne zmniejszenie zawartości 5CH3FH4, natomiast w drugiej serii stwierdzono istotne zwiększenie zawartości folianów po 19 dniach przechowywania, a następnie istotne zmniejszenie po 21 dniach. W obydwu seriach jogurtów stwierdzono zmniejszenie zawartości folianów w czasie przechowywania w warunkach chłodniczych.The objective of the research study was to assess the content of folates in commercial milk and fresh kefirs and yoghurts as well as in kefirs and yoghurts that were stored at a refrigeration temperature for max 34 days. Kefirs and yoghurts were produced using a thermostatic method. In the samples tested, only a methyl form of folate (5CH3FH4) was identified. In the raw bulk milk, the content of 5CH3FH4 was ca. 4.0 μg/100 g. The process of milk pasteurization do not cause decreasing of the folate content. In the kefir samples, no changes were reported in the amount of 5CH3FH4 compared to the raw bulk milk; however, a significant decrease (p ≤ 0.05) was found in the content of folate in the yoghurts. The storage time had a different effect on the content of 5CH3FH4 in the kefirs. In one series of the kefirs, no significant decrease occurred in the content of 5CH3FH4; however, in the second series, a significant increase was found in the content of folates after a 19 day storage, then, it was followed by a significant decrease after a storage period of 21 days. In the two series of yoghurts, a content of folates was found to decrease during refrigeration storage

Effect of time and temperature of storage on stability of folic acid and folates in some selected fruit and fruit-vegetable juices

Celem pracy było określenie wpływu czasu i temperatury przechowywania na stabilność kwasu foliowego i folianów w fortyfikowanych sokach owocowych i owocowo-warzywnych. Zawartość kwasu foliowego i folianów oznaczano w sokach świeżych oraz po 3, 6 i 9 miesiącach przechowywania w temp. 20 - 22 ºC i w chłodziarce (5 - 7 ºC). W żadnym badanym soku nie stwierdzono istotnych ubytków kwasu foliowego po 3 miesiącach przechowywania, niezależnie od temperatury przechowywania. Największe straty zaobserwowano w sokach o najniższym pH, wynoszącym 3,45 (sok klarowany owocowy) i 4,25 (sok typu przecierowego, owocowo-warzywny), po 9 miesiącach przechowywania. W badanych próbkach soków oznaczono bardzo małe ilości tylko jednej zidentyfikowanej, naturalnej formy folianów, tj. 5-metylotetrahydrofolianu (5CH₃FH₄). Do 3 miesięcy przechowywania, zarówno w temp. 20 - 22 ºC, jak i chłodniczej, nie wykazano istotnych strat 5-metylotetrahydrofolianu, ale już po 9 miesiącach składowania stwierdzono ubytki tej witaminy, zwłaszcza w sokach przechowywanych w temperaturze pokojowej.The objective of the research study was to determine the effect of time and temperature of storage on the stability of folic acid and folates in fortified fruit and fruit-vegetable juices. The contents of folic acid and folates were determined in fresh juices and in juices stored for 3, 6, and 9 months at temperatures ranging between 20 and 22o C and in juices stored in a refrigerator (5 to 7 °C). No significant losses of folic acid were reported in any of the analyzed juices that were stored for 3 months, irrespective of the storage temperature. The highest losses were reported in the juices having the lowest pH of 3.45 (clarified fruit juice) and 4.25 (fruit-vegetable puree type of juice) and stored for 9 months. In the juice samples analyzed, very low amounts of only one identified natural form of folates were determined, i.e. of 5-methyltetrahydrofolate (5CH₃FH₄). No significant losses of 5-methyltetrahydrofolate were found to occur in juices stored not longer than for 3 months at temperatures ranging from 20 to 22 °C; however, in the juices stored for 9 months, there were reported losses of this vitamin, especially in the juices stored at a room temperature

High temperature extrusion of pinto bean [Phaseolus vulgaris] and field pea [Pisum sativum] flours

Different flour types (whole, dehulled and high starch fraction) of pinto bean and field pea were extrusion-cooked in a Wenger TX-52 twin screw extruder. The temperature and moisture level were changed during the extrusion process to obtain the best quality extruded products. The extrudates were analysed for expansion, texture, ultrastructure and some functional properties. Our experiments showed that the quality of the extruded products depends upon the conditions of operation of the extruder and the raw material used. The highest expansion indices were noted for both pinto bean and field pea high starch fractions. Also samples from dehulled and whole field pea flour showed very good puffing properties compared to extrudates from corn meal and high starch fractions. Although there were no significant differences in expansion between whole seeds and dehulled flour of pinto bean, differences in density and stress were noted. Stress values of field pea were lower than pinto bean and corresponded very well (inversely) with expansion and density. Scanning electron microscopy showed differences in ultrastructures of extrudates depending on type of flour and extrusion conditions.Trzy rodzaje mąk (całe ziarno, częściowo obłuszczone oraz frakcja wysoko skrobiowa) z fasoli (Phaseolus vulgaňs) i zielonego grochu (Pisum sativum) (tab.1) poddano procesowi ekstruzji (HTST) przy użyciu ekstrudera o podwójnym ślimaku typu Wenger TX-52. Parametry ekstruzji tj. temperturę i wilgotność surowca zmieniano w czasie trwania procesu. Badano fizyko-chemiczne i funkcjonalne właściwości ekstrudatów. Najwyższym współczynnikiem ekspansji charakteryzowały się produkty otrzymane z frakcji bogatych w skrobię zarówno z fasoli jak i zielonego grochu (tab. 2, 3). Również ekstrudaty z całych i częściowo obłuszczonych ziaren zielonego grochu wyróżniały się bardzo dobrą ekspansją porównywalną z chrupkami otrzymanymi z grysu kukurydzianego. Wyniki analiz siły cięcia świadczącej o kruchości produktu były znacznie niższe dla ekstrudatów z zielonego grochu niż różnych mąk fasoli. Analiza mikroskopowa wykazała różną strukturę uzyskanych ekstrudatów w zależności od rodzaju surowca i parametrów procesu ekstruzji (rys. 1)

Evaluation of methods for the determination of folic acid and folate in fruit juices

Celem pracy było oznaczenie kwasu foliowego i folianów w fortyfikowanych sokach owocowych oraz zbadanie możliwości skrócenia metody ich oznaczania. W badanych sokach stwierdzono o około 30% niższe zawartości kwasu foliowego niż deklarowane przez producentów. W doświadczeniu modelowym nie stwierdzono istotnego wpływu dodatku enzymów i ekstrakcji w temperaturze 100°C na wynik oznaczenia dodanego kwasu foliowego. Wynika z tego, że metodę oznaczenia kwasu foliowego można skrócić i pominąć etapy: ekstrakcji oraz hydrolizy. Etapy te miały natomiast istotny wpływ (α = 0,05) na wynik oznaczenia naturalnej formy folianów, tj. 5-metylotetrahydrofolianu.The aim of the study is to examine folic acid and folate content in fortified fruit juices and to shorten the method of these compounds determination. In the tested juices, folic acid was found at the level of about 30% less than declared by the manufacturers on the product package. In the pilot study, no significant effect of enzymes addition and extraction at 100 °C on the result of additive folic acid determination was observed. Thus, it can be concluded that in folic acid determination method the extraction and hydrolysis steps can be omitted. However, the mentioned steps had a significant effect on the result of natural folate form, 5-methyltetrahydrofolate, determination

Shelf-life stability of flavoured pinto bean [Phaseolus vulgaris] and field pea [Pisum sativum] extrudates

Snacks from whole pinto bean and field pea flours were produced by high temperature extrusion using Wenger TX-52 twin screw extruder. Seasonings were blended into the flours before extrusions. Flavouring of extruded snacks was accomplished by first applying a fine spray of Canola oil (10% of puffs weight), followed by coating them with cheese powder (15%). Shelf-life stability of extruded products showed very high microbiological quality after processing and during 6 months of storage. Also no significant changes in peroxide and acid values were noted for the same period of time. Storage time did not influence texture of the extrudates. Some improvement was observed in in vitro protein digestibility for some of the snacks made from field pea