Kinetics of growth of Leishmania (Leishmania) chagasi cycle in McCoy cell culture

Cinéticas de crescimento de Leishmania realizadas in vitro após a internalização da forma promastigota na célula e a ocorrência da transformação do parasito na forma amastigota foram descritas por vários autores, seja com a utilização de explantes de macrófagos em células de baço de hamster ou atualmente da célula de linhagem de macrófago humano U937. Aliando a microscopia à descrição das inter-relações morfológicas e à síntese de moléculas específicas foi possível esclarecer pontos sobre a biologia do parasito. O presente estudo mostra o acompanhamento do ciclo de crescimento da Leishmania chagasi em uma cinética realizada com células de linhagem McCoy, no período de 144 horas. Durante o processo, as transformações morfológicas foram reveladas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e as moléculas liberadas no meio extracelular foram observadas pelo método de SDS-PAGE, em intervalos de 24 horas no período de 144 horas. Observou-se que nas primeiras 72 horas, a forma promastigota da L. chagasi fica aderida à membrana das células com aspecto arredondado (amastigota-like). Em 96 horas as células infectadas apresentaram alterações morfológicas; em 120 horas, as células liberaram, para o meio extracelular, antígenos fluorescentes solúveis; e em 144 horas foram observadas novas formas alongadas dos parasitos como se fossem promastigotas. No SDS-PAGE, proteínas com pesos moleculares específicos são observadas em cada ponto da cinética, mostrando que a célula McCoy parece mimetizar o macrófago e que pode ser um modelo útil para o estudo da infecção do binômio leishmânia/célula.The kinetics of growth of Leishmania performed in vitro after internalization of the promastigote form in the cell and the occurrence of the transformation of the parasite into the amastigote form have been described by several authors. They used explants of macrophages in hamster spleen cell culture or in a human macrophage lineage cell, the U937. Using microscopy, the description of morphologic inter-relationship and the analysis of the production of specific molecules, it has been possible to define some of the peculiarities of the biology of the parasite. The present study shows the growth cycle of Leishmania chagasi during the observation of kinetic analysis undertaken with a McCoy cell lineage that lasted for a period of 144 hours. During the process, the morphologic transformation was revealed by indirect immunofluorescence (IF) and the molecules liberated in the extra cellular medium were observed by SDS-PAGE at 24-hour intervals during the whole 144-hour period. It was observed that in the first 72 hours the promastigote form of L. chagasi adhered to the cell membranes and assumed a rounded (amastigote-like) form. At 96 hours the infected cells showed morphologic alterations; at 120 hours the cells had liberated soluble fluorescent antigens into the extra cellular medium. At 144 hours, new elongated forms of the parasites, similar to promastigotes, were observed. In the SDS-PAGE, specific molecular weight proteins were observed at each point of the kinetic analysis showing that the McCoy cell imitates the macrophage and may be considered a useful model for the study of the infection of the Leishmania/cell binomial

Flebotomíneos de várzea do rio Aguapeí, região noroeste do Estado de São Paulo, Brasil

OBJETIVO: Investigar a sazonalidade de flebotomíneos de acordo com sua ocorrência e densidade. MÉTODOS: A pesquisa for realizada em área de várzea do rio Aguapeí, do município de Mirandópolis, Estado de São Paulo. Os flebotomíneos foram capturados mensalmente com armadilhas automáticas luminosas, instaladas das 18:00 às 7:00 horas, durante um ano (2004-2005), em dois locais: varanda de um rancho de pesca e mata. Utilizou-se a média de Williams para o cálculo da sazonalidade dos flebotomíneos e teste de qui-quadrado para comparação. RESULTADOS: Foram capturados 35.995 flebotomíneos. Cinco espécimes eram Brumptomyia avellari, um Psathyromyia (Xiphomyia) hermanlenti e os demais Nyssomyia neivai, que apresentou freqüência mais elevada no inverno. É o primeiro registro de Ps. hermanlenti no Estado. CONCLUSÕES: A alta densidade de Nyssomyia neivai, um dos vetores suspeitos de transmitir a leishmaniose tegumentar americana, aponta o risco de transmissão dessa doença no local, principalmente nos períodos mais secos do ano.OBJECTIVE: To investigate the seasonal variation of sand flies regarding their occurrences and densities. METHODS: The study was conducted in the Aguapeí river floodplain in the state of São Paulo, southeastern Brazil. Sand flies were monthly captured with automatic light traps set up between 18:00 and 7:00 hours, over a period of one year (2004-2005), at two sites: veranda of a domicile and in a forest on the banks of Aguapeí River. The Williams' average was used for estimating the seasonal variation and the Chi-square test for comparison. RESULTS: A total of 35,995 specimens were captured: five Brumptomyia avellari, one Psathyromyia (Xiphomyia) hermanlenti and the rest Nyssomyia neivai, which had the highest frequency during the winter. Ps. hermanlenti is first recorded in state of São Paulo. CONCLUSIONS: The high density of Nyssomyia neivai, a suspected vector of cutaneous leishmaniasis, points out to the risk of transmission of this disease in this setting, especially during drier periods of the year

Mudanças climáticas e saúde urbana

As mudanças climáticas podem ter impactos significativos na população humana, sobre tudo das área s urbanas. Seus efeitos podem levar à exposição a condições extremas, como desastres naturais – furacões, secas e inundações –, ao aumento na propagação de doenças disseminadas por vetores, incluindo mosquitos provocadores de incômodos. Apresentam-se aspectos de como o aquecimento global pode impactar a população de dípteros transmissores de agentes de algumas doenças, tais como a leishmaniose visceral, a filariose e as arboviroses – dengue, chikungunya e zika –, com impactos na saúde pública e exigindo maiores esforços na vigilância e controleClimate changes may have significant impacts on human population, especially in urban areas. Their effects might lead to exposure to extreme conditions such as those resulting from natural disasters – hurricanes, droughts and floods − and the increasing spread of vector-borne diseases, including those caused by troublesome mosquitoes. Here we present some comments on how global warming might affect the populations of vectors of some disease agents such as those of visceral leishmaniasis, filariasis, and the arboviruses − dengue, Chikungunya and Zika − causing impacts on public health and calling for more rigorous surveillance and control measure

Ocurrence of Nyssomyia intermedia (Lutz & Neiva) (Diptera: Psychodidae) in Paraná State, south of Brazil

Nyssomyia intermedia s. lat. tem sido citada por vários autores no Paraná. No entanto, alguns estudos apontam que esse táxon corresponde a Nyssomyia neivai (Pinto). Em coletas realizadas em galinheiro e em ambiente de mata, com armadilhas, entre novembro de 2005 e outubro de 2006, em Adrianópolis, Morretes e Pontal do Paraná, localizados na região de Mata Atlântica na Serra do Mar e no litoral do Paraná, sete fêmeas de Nyssomyia intermedia s. str. (Lutz & Neiva) foram encontradas juntamente com outras 14 espécies de flo ebotomíneos, confirmando a ocorrência de N.intermedia em área de costa e de mata Atlântica do Paraná.The occurrence of Nyssomyia intermedia s.lat. in the state of Paraná, Brazil, has been registered by several authors; however, studies have identified this taxon as belonging, in Paraná, to Nyssomyia neivai (Pinto). During captures with traps in a hen-house and forested areas, from November 2005 to October 2006, in Adrianópolis, Morretes and Pontal do Paraná, situated in the Atlantic forest domain, Paraná state, seven females of Nyssomyia intermedia s.str. (Lutz & Neiva) were collected together with other 14 sand floy species. Thus the occurrence of N. intermedia on the coast and in areas of Atlantic forest in Paraná is confirmed

Estudo de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) em foco de leishmaniose visceral no Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil

INTRODUCTION: In the Americas, Lutzomyia longipalpis has been incriminated as the vector of visceral leishmaniasis in almost all the areas in which this disease has been reported. The notification of human cases of visceral leishmaniasis and the presence of dogs with an appearance suggestive of the disease in the county of Corumbá, Mato Grosso do Sul State, Brazil, led us to undertake an entomological investigation in this area, for the purpose of identifying the phlebotomine vector. MATERIAL AND METHOD: The county of Corumbá is located in the Pantanal region and its urban area is situated at 18° 59’ 44" South and 57° 39’ 16" West. The research project was carried out in peri and intradomiciliary environments, in three urban districts, one of which was central and the other two on the outskirts, and in a cave situated outside the urban perimeter. Most of the captures were made weekly with light automatic traps, in the period from February 1984 to December 1986. Meteorological data for this period were obtained from the city,s meteorological station and those for the period from 1925 to 1982 from the literature. RESULTS: The urban phlebotomine fauna consisted of eight species and was similar to that of the cave, except that in the latter the species were more abundant. Lutzomyia cruzi was predominant in the peri and intradomiciliary environments. Its prevalence in the central district was of 90.3% and lower in the outskirts. Lu. forattinii presented considerable prevalence (39.0%) in one of the outlying districts too. In the cave, Lu. corumbaensis was the predominant species, followed by Lu. sordellii, Lu. forattinii, Lu. peresi and Lu. cruzi. The impact of the climatic condition and the action of insecticides in the urban area on the frequence of the species, as well as the use of the cave as a breeding ground by the phlebotomines, in view of the changes in the sex rate, are commented. Data on anthropophily and captures of Lu. forattinii using dog bait have been added. CONCLUSION: The predominance of Lu. cruzi in the urban area; the great prevalence of Lu. forattinii in most of the outlying areas studied and the anthropophily of this latter species, as well as the strong affinity of these species with Lu. longipalpis, the main vector of visceral leishmaniais in other areas of the Americas, suggest the participation of both in the transmission of the disease in Corumbá.INTRODUÇÃO: Nas Américas, Lutzomyia longipalpis tem sido incriminada como vetora da leishmaniose visceral em, praticamente, todas as áreas de ocorrência dessa parasitose. A notificação de casos humanos a partir de 1980 e a presença de cães com aspecto sugestivo de leishmaniose visceral no Município de Corumbá, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil, levaram a investigações entomológicas na área, com o objetivo de identificar a população de flebotomíneo vetora. MATERIAL E MÉTODO: A pesquisa foi realizada no peri e intradomicílio de três residências urbanas e em ecótopo natural, representado por uma gruta, situado fora do perímetro urbano. As capturas, semanais em sua maioria, foram realizadas com armadilhas automáticas luminosas, no período de 1984 a 1986. Os dados metereológicos desse período foram obtidos junto à Estação Metereológica da cidade e os de 1925 a 1982, de bibliografia. RESULTADOS: A fauna flebotomínea urbana, composta de oito espécies, mostrou-se semelhante à da gruta, porém nesta, a abundância das espécies foi maior. Na área urbana, Lu. cruzi predominou tanto no intra como no peridomicílio: no bairro central, representou 90,3% dos espécimens e nos dois bairros periféricos, os seus percentuais foram menores. Lu. forattinii, também, teve freqüência expressiva em um dos bairros periféricos (39,0 %). Na gruta, Lu. corumbaensis foi a espécie predominante. Comenta-se o impacto das condições climáticas e do inseticida aplicado na área urbana na freqüência das espécies, e da utilização da gruta como criadouro pelos flebotomíneos, com base na evolução da razão entre os sexos ao longo do período. Foram adicionadas informações sobre antropofilia e de coleta com isca canina de Lu. forattinii. CONCLUSÃO: O predomínio de Lu. cruzi na área urbana; a expressiva freqüência de Lu. forattinii na periferia da cidade, bem como a sua antropofilia e o estreito grau de parentesco destas espécies com Lu. longipalpis, a principal vetora da leishmaniose visceral em outras áreas da América, são aspectos que sugerem a participação de ambas na transmissão da doença, em Corumbá

Psychodidae (Diptera) del Perú I: Phlebotominae en Huánuco, Pasco y Cusco, su relación con la enfermedad de Carrión y la leishmaniosis tegumentaria

One hundred and twenty species had been reported up to 1999 and the following 11 are now added to Peruvian phlebotomine fauna: Brumptomyia quimperi, Evandromyia sallesi, Lutzomyia fispaili, L. scorzai, L. watsi, Micropygomyia longipennis, Trichophoromyia howardi, T. arevaloi, Trichopygomyia turelli, Warileya euniceae and W. leponti. A complete list of species in Huanuco, Pasco and Cusco departments is included and new records for Ayacucho, Amazonas, Cajamarca, Huancavelica, Junin, La Libertad, Loreto and San Martin are given. There appears to be epidemiological evidences of some phlebotomines of the subgenera Helcocyrtomyia and Pifanomyia as likely vectors of dermal leishmaniosis and Carrion's disease.A las 120 especies de flebotomíneos reportadas hasta 1999 para el Perú, se adiciona: Brumptomyia quimperi, Evandromyia sallesi, Lutzomyia scorsai, L. rispaili, L. wattsi, Micropygomyia longipennis, Trichophoromyia howardi, T. arevaloi, Trichopygomyia turelli, W. euniceae y W leponti, incrementando a 131 especies el número de flebotomíneos. Se da a conocer la distribución geográfica de flebotomíneos en los departamentos de Huánuco, Pasco y Cusco; además, se destaca nuevos reportes de flebotomíneos en los departamentos de Ayacucho, Amazonas, Cajamarca, Huancavelica, Junín, La Libertad, Loreto y San Martín. Así mismo, se presentan evidencias epidemiológicas de algunos flebotomineos de los subgéneros Helcocyrtomyia y Pifanomyia como probables vectores de agentes patógenos de la leishmaniosis tegumentaria y de la enfermedad de Carrión (verruga peruana)

Descripción de la hembra de Pintomyia (Pifanomyia) deorsa (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae)

Pintomyia (Pifanomyia) deorsa (Pérez, Ogusuku, Monje & Young, 1991) was described on the basis of a single male; the female is being described here from specimens collected in Ollantaytambo, Cusco, Peru. Diagnoses for the Pintomyia genus, Pifanomyia subgenus, Verrucarum series and both sexes of Pi. deorsa are presented, as well as an identification key to distinguish the females of the Verrucarum series.Pintomyia (Pifanomyia) deorsa (Pérez, Ogusuku, Monje & Young, 1991) fue descrita en base a un solo espécimen macho; la hembra es descrita aquí a partir de especímenes colectados en Ollantaytambo, Cusco, Perú. El diagnóstico para en género Pintomyia, el subgénero Pifanomyia, la série Verrucarum y ambos sexos de Pi. deorsa son presentados, así como claves para la identificación y separación de las hembras de la serie Verrucarum